大黄素对肉仔鸡生长性能、肉品质、抗氧化能力及免疫机能的影响

刘旭乐，苏莹莹，赵淑敏，雒爱玲，焦喜兰,2，景亚岐,2，王成章,2，李振田,2*

（1.河南农业大学动物科技学院，河南郑州 450046；2.河南省草地资源创新与利用重点实验室，河南郑州 450046）

世界范围内对鸡肉需求的不断增长使得肉鸡养殖压力不断上升，这需要通过提高肉鸡的生长速度、饲料转化率来提高养殖经济效益，但也可能因此使鸡肉品质降低，营养物质流失。肉仔鸡生长周期短，免疫器官等发育不完全，可能会因大规模养殖密度过高或传染性疾病造成应激或死亡。许多研究表明，中草药提取物可用于改善畜禽生长性能、肉品质以及免疫机能等。

大黄素，学名1,3,8-三羟基-6-甲基蒽醌，以游离和苷的形式存在于蓼科植物掌叶大黄、大黄、唐古特大黄的根茎及根中，属于蒽醌类衍生物。近几年来，随着研究不断深入，人们发现蒽醌类衍生物在抑菌、抗炎、抗氧化应激等方面有显著功效。目前，大黄素在医学和水产动物的应用中较为广泛。曹丽萍等研究表明，在建鲤的饲料中添加3～5 g/kg 大黄素可以提高其生长性能，清除自由基、提高超氧化物歧化酶（SOD）活性，并抑制丙二醛（MDA）的生成。杨维维等研究发现，大黄素也能显著提高克氏螯虾的免疫机能。此外，大黄素可以提高大鼠的抗氧化能力。但关于大黄素在畜禽应用上的研究较少，而大黄素在肉仔鸡方面的研究还未见报道。因此，本试验旨在研究日粮中添加不同水平的大黄素对肉仔鸡生长性能、肉品质、抗氧化性能和免疫机能的影响，以期为大黄素在肉仔鸡生产中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.2 试验动物及日粮 采用单因素试验设计，选择320只健康状况良好、体重（42±2 ）g、1 日龄商品代艾拔益加（AA）肉仔鸡，公母各半，随机分为4 组，每组5个重复，每个重复16 只鸡，试验期为49 d。0～21 日龄，大黄素组在饲喂基础日粮的基础上均添加50 mg/kg 大黄素；21～49 日龄，各组饲粮大黄素水平分别为0（对照组）、100、200、400 mg/kg。参 照NRC（1994）配制玉米-豆粕型基础日粮，基础日粮组成及营养成分见表1。

表1 肉仔鸡基础日粮组成及营养成分（饲喂基础）

1.3 饲养管理 饲养管理严格按照标准执行。进雏前清理鸡舍，打扫鸡舍周围环境。进雏后，1～4 d 充分做好饮水、开食、温度、光照等因素的调控。进雏时，将舍内温度设置为33℃左右，之后随着雏鸡的生长，每周降低2℃左右，5 周之后将舍内温度稳定在21℃左右。初始舍内光照时长设置为23 h，黑暗1 h；从4 d 起每天光照18 h，黑暗6 h。之后将光照时长稳定为自然光照时长。此外，检查舍内风机湿帘的正常运转从而保持舍内良好的通风条件，防止废气积累。所有肉仔鸡在试验期间均可自由进行饮食。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 生长性能 试验期间共进行4 次称重。进雏时对所有肉仔鸡进行称重，记录其平均体重；在21、35 d时以重复为单位，随机挑选8 只鸡测定其平均体重，此为第2、3 次称重；第49 天出栏时记录每个处理组平均末体重。每次称重时同时记录其采食量。试验结束后，计算日均采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及耗料增重比（F/G）。

1.4.2 肉品质 试验结束时，每重复选择体重接近分组肉仔鸡体重平均值的2 只鸡进行屠宰。取其左侧的胸肌和腿肌，取完后立即放置于自封袋内-30℃保存，取一部分样品悬挂放在4℃冰箱中保存24 h 后，擦干表面水分计算滴水损失；采用高温干燥法，计算肌肉水分和失水率；用C-LM3 型数显式嫩度仪测定肌肉剪切力；采用凯氏定氮仪（杭州绿博仪器有限公司产KDN）测定肌肉粗蛋白质含量；采用乙醚浸提法测定胸肌和腿肌内脂肪含量；按照国家标准《肉与肉制品 胆固醇含量测定》（GB/T 9695.24-2008）测定肌肉胆固醇。

1.4.3 肌肉抗氧化指标 肌肉抗氧化指标的肉样处理同肉品质测定。SOD（黄嘌呤氧化酶法）和MDA（硫代巴比妥酸法）的测定方法严格按照南京建成生物工程研究所的试剂盒说明书进行操作。

1.4.4 免疫器官指数 屠宰时取肉仔鸡的脾脏、胸腺和法氏囊并称重，计算各脏器指数。

1.5 统计分析 试验数据用Excel 2010 记录整理，采用SAS 8.12 统计软件，对各项指标进行单因素方差分析（ANOVA），Duncan's 法进行多重比较，并按照添加剂量进行一次线性、二次曲线性分析，显著水平定为<0.05，结果用平均值±标准差来表示。

2 结果

2.1 不同水平大黄素对肉仔鸡生长性能的影响 在整个饲喂期间，添加大黄素对肉仔鸡的ADFI、ADG 及F/G 的改善作用不明显（表2），但所有大黄素饲喂组的ADFI和ADG 均高于对照组，且400 mg/kg 大黄素组各阶段的ADFI、ADG 均为4 组最高，F/G 则相反。在21～35 d时肉仔鸡的ADFI 和ADG 随着大黄素添加水平的提高呈线性升高（<0.05），其ADFI 呈二次升高，F/G 呈二次降低（<0.05）。在35～49 d 时，200 mg/kg 大黄素组和400 mg/kg 大黄素组ADG 高于对照组（<0.05）。1～49 d，肉仔鸡的ADFI 随大黄素添加水平的提高呈线性提高（<0.05），ADG 随大黄素添加水平的提高呈二次提高（<0.05）。

国内对于新闻漫画的多模态隐喻研究已经取得的成果有： 俞燕明基于认知语言学隐喻映射理论，对政治漫画中隐喻表征方式展开研究，将漫画模态实现和配置进行了分类。[8] 赵秀凤、朱嫣然以认知语言学中的概念整合理论为基础，分别探讨了政治漫画多模态隐喻的动态建构过程[9，10]； 赵秀凤、冯德正通过以《经济学人》中94篇涉华政治漫画语篇为例，系统分析了多模态语篇中隐转喻的互动与融合对于中国形象构建产生的影响。[11]

表2 不同水平大黄素对肉仔鸡生长性能的影响

2.2 不同水平大黄素对肉仔鸡肉品质的影响 如表3 所示，大黄素组胸肌的各项物理学特性指标均低于对照组，且当大黄素添加量为400 mg/kg 时，4 组所有指标均最低（>0.05）。100、200、400 mg/kg 大黄素组腿肌的滴水损失和失水率均低于对照组（>0.05），以400 mg/kg 大黄素组的各项指标为最低（>0.05）。200、400 mg/kg 大黄素组腿肌的剪切力低于对照组（<0.05），100 mg/kg 大黄素组与对照组间差异不显著。其中，胸肌的滴水损失随着大黄素添加水平的提高呈线性升高（<0.05），其剪切力和失水率则呈线性降低（<0.05）。胸肌和腿肌的滴水损失均随着大黄素添加水平的提高呈二次降低（<0.05）。

表3 不同水平大黄素对肉仔鸡肌肉物理学特性的影响

如表4 所示，大黄素组胸肌和腿肌的水分、粗脂肪以及粗蛋白质均高于对照组。200、400 mg/kg 大黄素组胸肌含水量、粗蛋白质含量高于对照组（<0.01），400 mg/kg 大黄素组腿肌粗蛋白质含量也高于对照组（<0.01）。胸肌的粗脂肪以及腿肌的水分和粗蛋白质均随大黄素添加水平的提高呈线性提高（<0.05），腿肌的水分随大黄素添加水平的提高呈二次提高（<0.05）。此外，200、400 mg/kg 大黄素组胆固醇含量低于对照组（<0.05），100 mg/kg 大黄素组则与对照组差异不显著。胸肌粗脂肪、腿肌的水分和粗脂肪组间差异不显著。

表4 不同水平大黄素对肉仔鸡肌肉化学成分的影响

2.3 不同水平大黄素对肉仔鸡肌肉抗氧化功能的影响由表5 可见，400 mg/kg 大黄素组腿肌SOD 活性高于其他3 组（<0.05），其他组胸肌和腿肌的SOD 活性高于对照组、MDA 含量低于对照组（>0.05）。胸肌中MDA 含量随着大黄素添加水平的提高呈线性降低（<0.05），腿肌中SOD 活性随着大黄素添加水平的提高呈线性提高（<0.05），腿肌中MDA 含量随大黄素添加水平的提高呈二次降低（<0.05）。

表5 不同水平大黄素对肉仔鸡肌肉抗氧化功能的影响

2.4 不同水平大黄素对肉仔鸡免疫功能的影响 由表6可见，200、400 mg/kg 大黄素组肉仔鸡的脾脏指数高于对照组和100 mg/kg 大黄素组（<0.05）。4 个处理组胸腺指数差异不显著。400 mg/kg 大黄素组法氏囊指数高于其他3 组（<0.05）。

表6 不同水平大黄素对肉仔鸡免疫器官指数的影响 g/kg

3 讨论

3.1 大黄素对肉仔鸡生长性能的影响 肉仔鸡在育雏期时由于自身体温调节机制、免疫系统、消化系统等不完善，容易因应激或疾病造成死亡率升高。研究表明，低剂量的大黄素具有良好的保肝作用，而高剂量大黄素则能导致肝毒性、肾毒性。临床中大黄总蒽醌人用治疗剂量为420 mg/d，当换算成大鼠用量时为44.1 mg/kg。由于中药具有作用缓慢、作用时间持久的特点。因此，本试验中1～21 d 时试验组均添加50 mg/kg 的大黄素，以提高肉仔鸡的适应性；当肉仔鸡转入快速生长期后，将大黄素组的大黄素水平分别提高到100、200、400 mg/kg。以往研究显示，大黄素仅在水产动物方面表现出良好的促生长作用。如大黄素可以提高罗氏沼虾的生长性能，也可以显著提高被氧化鱼油刺激的武昌鲂的最终体重和增重率。本试验中，添加大黄素对肉仔鸡的生长性能影响与对照组无显著差异，但大黄素组肉仔鸡的ADG 和ADFI 较对照组有所提高，F/G有所降低，采食量增加可能是由于大黄可促进胃肠蠕动，加快了食糜的排空速度，且大黄素可以提高小肠内胃动素并降低生长抑素含量；这可能促进了肉仔鸡的生长。在35～49 d 时，200 mg/kg 大黄素组和400 mg/kg大黄素组ADG 显著高于对照组，表明添加大黄素对肉仔鸡育肥期的生长有一定影响。而Straub 等试验发现，当仔猪饲喂添加0.25% 大黄的饲粮时31 d 时，其ADG 和ADFI 均较对照组显著增加，但当大黄含量提高至0.5%～1%时，会导致其ADG 和ADFI 逐渐降低，并提高其F/G。因此，大黄素对动物的促生长作用可能与其大黄素含量有关。

3.2 大黄素对肉仔鸡肉品质的影响 肉品质对于确保消费者满意至关重要。剪切力可反映肌肉嫩度，剪切力越小，则鸡肉的嫩度越好。滴水损失和失水率是肌肉保水能力的重要指标之一，反映了肉的多汁性。明建华研究表明，大黄素对团头鲂的鱼体肥满度并无显著影响。在本试验中，不同大黄素组肉仔鸡的胸肌剪切力、滴水损失和失水率均低于对照组，且200、400 mg/kg 大黄素组腿肌的剪切力显著低于对照组。肌纤维直径与肉的柔嫩度呈负相关。研究发现，中草药添加剂可以降低生长育肥猪的肌纤维直径，提高其肌纤维密度，从而提高肌肉的保水性能。因此，大黄素可能是通过改变肉仔鸡肌纤维直径来改变其肌肉剪切力。

鸡肉中粗蛋白质和粗脂肪是反映鸡肉常规营养的基础指标。研究表明，大黄素可以显著降低肝脏中粗脂肪的积累，也能促进小鼠腹股沟白色脂肪棕色化并减少白色脂肪的积累。张磊等研究表明，不同大黄素、大黄酸和芦荟大黄素配比可抑制大鼠体内胆固醇的生成。本试验中，200、400 mg/kg 大黄素组显著提高了肉仔鸡的胸肌水分以及胸肌和腿肌中粗蛋白质含量，并显著降低了肌肉中胆固醇含量；从整体上看，处理组肌肉的水分、粗脂肪和粗蛋白质含量均高于对照组。研究发现，大黄素一方面可以通过抑制甾醇调节元件结合蛋白-2（SREBP-2）转录活性，从而抑制胆固醇的生物合成；另一方面，大黄素可以通过促进胆固醇7-羟化酶的活性，加速胆固醇向胆盐的转化，从而降低机体内胆固醇含量。

3.3 大黄素对肉仔鸡抗氧化机能和免疫机能的影响 氧化应激是一种细胞状态或疾病，其发生是由于抗氧化剂和氧化剂（自由基或反应性物质）水平与之间的生理失衡。一些健康疾病（如糖尿病、脑损伤、神经退行性疾病等）的发生和发展与通过氧化应激产生的自由基或反应性物质有关。而氧化应激的第一道防线即为SOD、CAT、谷胱甘肽过氧化氢酶（GPX）等。以往研究证明，低剂量的制首乌游离蒽醌可以显著上调大鼠体内SOD mRNA 的相关表达。Nemmar 等则发现，大黄素对大鼠肺部的氧化应激有较好的改善作用。本试验中，添加大黄素一定程度上提高了肉仔鸡肌肉中SOD 活性，降低了肌肉中MDA 含量。有研究表明，大黄素可以提高血清SOD 活性，通过抑制核因子（NF）-B 的结合活性，抑制血清炎症因子的表达从而起到抗氧化作用。此外，大黄素也能通过Nrf2/TLR4/NF-B 产生抗氧化作用。

在健康动物中，免疫器官的重量也是反映机体免疫机能状态的重要参考。家禽免疫器官的快速发育提高了其免疫功能和抗病能力。脾脏中含有大量的淋巴细胞和巨噬细胞，可以产生免疫球蛋白等物质参与机体的免疫过程。法氏囊是禽类动物独有的免疫器官，与胸腺共同构成了机体免疫的中枢器官，随着胸腺指数和法氏囊指数的增大，机体的免疫力也会有一定程度增强。王珅等发现，1.0%的虎杖蒽醌提取物可使小鼠胸腺指数和脾脏指数分别提高23.66%和46.73%。本试验结果也表明，与对照组相比，添加大黄素后肉仔鸡的免疫器官指数均有所升高，其中400 mg/kg 大黄素组和对照组脾脏指数和法氏囊指数显著提高。蒽醌衍生物被证明可以通过促进小鼠脾脏T、B 淋巴细胞的增殖，增强巨噬细胞吞噬中性红的能力，提高自然杀伤细胞活性及分泌肿瘤坏死因子的活性，从而提高机体的免疫能力。此外，大黄素也可以通过抑制TLR2 介导的NF-B 信号通路来促进脂多糖诱导的急性肾损伤大鼠的免疫炎症调节作用。

4 结论

本研究结果表明，在肉仔鸡饲粮中添加大黄素可提高肉仔鸡育肥期的平均日增重，提高肉仔鸡的生长性能；可降低鸡肉剪切力，改善鸡肉口感；提高鸡肉水分和粗蛋白质含量，降低胆固醇含量，提高鸡肉营养价值；可以改善肉仔鸡的抗氧化功能，显著提高了其肌肉中SOD 活性，并降低MDA 含量；显著提高了肉仔鸡的免疫器官指数，提高了肉仔鸡的免疫功能。