乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平变化及其临床意义

李昆，顾建伟，季峰，龚金星，陈焱

昆山市中医医院甲状腺乳腺外科，江苏昆山 215300

乳腺癌是起源于乳腺上皮组织的恶性肿瘤，是全球女性最常见的恶性肿瘤。据统计，2020年全球乳腺癌的发病率和病死率分别为58.5/10万、17.7/10万，其防治形势十分严峻［1］。血清肿瘤标志物检测一直是乳腺癌早期筛查的重要手段。癌胚抗原（CEA）和癌抗原15-3（CA15-3）是目前乳腺癌早期筛查应用最广泛的血清肿瘤标志物。但近年研究报道，血清CEA、CA15-3 水平早期筛查乳腺癌的假阳性率高，并且易受肺病、肝硬化、结肠炎等疾病的影响［2-3］。因此，探索新的血清肿瘤标志物对乳腺癌早期筛查意义重大。癌胚抗原相关细胞黏附分子1（CEACAM1）是CEA 家族的重要成员，能够通过介导细胞黏附参与肿瘤细胞分化、迁移和凋亡等生物学过程［4-5］。四跨膜蛋白超家族成员 1（TM4SF1）为跨膜四蛋白超家族中的一员，可参与肿瘤细胞新陈代谢和微环境形成，能够调控肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移等［6-7］。以往研究发现，CEACAM1、TM4SF1 在乳腺癌组织中高表达［8-9］。但二者在乳腺癌患者血清中的水平变化尚不明确。本研究探讨了乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1 水平变化及其临床意义。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2015年1月—2020年12月昆山市中医医院收治的女性乳腺癌患者100 例（观察组）。所有患者经组织病理检查明确诊断。纳入标准：①符合乳腺癌诊断标准；②初诊，入组前未接受任何抗肿瘤治疗；③年龄≥18 岁；④女性；⑤临床病理资料完整。排除标准：①合并其他部位肿瘤者；②合并心、肝、肾等重要脏器严重疾病者；③合并全身感染性疾病者；④合并血液系统疾病者。患者年龄25～65（50.87 ± 10.53）岁，其中≥50 岁36 例、＜50岁64例；肿瘤直径：≥4 cm 47例，＜4 cm 53例；病理类型：浸润性癌43 例，非浸润性癌57 例；雌激素受体：阳性72例，阴性28例；孕激素受体：阳性57例，阴性43 例；组织分化程度：低分化41 例，中高分化59 例；TNM 分期［10］：Ⅰ、Ⅱ期49 例，Ⅲ、Ⅳ期51 例；转移：无转移53例，局部转移29例，远处转移18例。同期选择在昆山市中医医院体检健康的女性志愿者50 例（对照组），年龄22～68（51.54±10.75）岁。两组年龄具有可比性。本研究经昆山市中医医院医学伦理委员会批准（审批编号：20200812），所有研究对象或其家属知情同意并签署书面知情同意书。

1.2 血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3检测 观察组入院次日，对照组体检当日，采集空腹肘静脉血3 mL，3 000 r/min离心10 min、离心半径8 cm，留取上层血清，-80 ℃冰箱保存，72 h 内完成检测。采用Multiskan™FC酶标仪、ELISA法检测血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3。CEACAM1 ELISA 试剂盒购自北京百奥莱博科技有限公司，TM4SF1 ELISA试剂盒购自上海抚生实业有限公司，CEA ELISA 试剂盒购自上海江莱生物科技有限公司，CA15-3 ELISA 试剂盒购自上海梵态生物科技有限公司。所有操作严格按照仪器操作规程和试剂盒说明进行。

1.3 统计学方法 采用SPSS26.0 统计软件。计数资料比较采用χ2检验。计量资料经Shapiro-Wilk 检验，符合正态分布的以表示，结果比较采用t检验或F检验；符合偏态分布的以M（P25，P75）表示，结果比较采用U检验或H检验。预测效能分析采用受试者工作特征（ROC）曲线，曲线下面积（AUC）比较采用Hanley & McNeil法。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清 CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平比较 见表1。

表1 两组血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平比较

2.2 乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1 水平与临床病理特征的关系 见表2。

表2 乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平与临床病理特征的关系（ng/mL）

2.3 血 清 CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3 水平对乳腺癌的诊断效能分析 ROC 曲线分析显示，血清CEACAM1、TM4SF1 水平联合诊断乳 腺 癌 的AUC高 于 血 清 CEA、CA15-3、CEACAM1、TM4SF1 水平单独（P均＜0.01）。见 表 3、图 1。

图1 血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平诊断乳腺癌的ROC曲线

表3 血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平诊断乳腺癌的效能分析

3 讨论

乳腺癌是由乳腺上皮细胞增殖失控进而恶变形成的恶性肿瘤。随着人口老龄化加剧、生活节奏加快和生活方式转变，乳腺癌的发病率逐年升高，并且发病人群呈年轻化趋势［11］。近年来，随着手术、放化疗、靶向治疗、免疫治疗等综合治疗策略不断发展，乳腺癌患者预后得到极大改善。但乳腺癌早期症状不典型，等到出现明显症状就诊时大多数患者已进展至中晚期，即使多学科综合治疗仍难以改善预后，中位生存期仅2～3 年［12］。因此，早期诊断对延长乳腺癌患者生存期具有重要意义。目前，乳腺癌早期筛查主要依靠影像学检查、血清肿瘤标志物等，但影像学检查的假阳性率较高，血清CEA、CA15-3 虽然是乳腺癌重要的特异性标志物，但易受多种因素影响，灵敏度较低。因此，探索新的血清肿瘤标志物对乳腺癌早期筛查的意义重大。

细胞黏附分子异常表达或功能丧失能够引起细胞调控机制失常或恶性转化，导致肿瘤细胞黏附能力降低，继而从肿瘤原发灶上脱离形成游离细胞，破坏细胞外基质，促使肿瘤细胞突破结缔组织，引起肿瘤细胞浸润和迁移［13］。因此，细胞黏附分子异常表达或功能丧失对肿瘤的发生、发展至关重要。CEACAM1 基因定位于人染色体19q13.2，其编码蛋白广泛表达于内皮细胞、上皮细胞、淋巴细胞等，能够通过邻近细胞表达的N 末端免疫球蛋白区域或p27、CEA 等中介因子调控细胞黏附。陈立新等［14］研究报道，甲状腺癌组织CEACAM1 高表达，并且其表达与肿瘤恶性程度呈正相关关系。KANG 等［15］研究发现，肾细胞癌组织CEACAM1 低表达，下调CEACAM1 表达会促进肾细胞癌血管生成。以上研究结果表明，CEACAM1 在不同肿瘤中发挥的作用不同。本研究结果显示，观察组血清CEACAM1 水平显著高于对照组，与顾立学等［8］研究结果一致。进一步研究发现，乳腺癌患者血清CEACAM1 水平与肿瘤组织分化程度、TNM 分期、局部或远处转移有关。提示CEACAM1 在乳腺癌中可能发挥促癌作用，血清CEACAM1 水平升高与乳腺癌恶性进展密切相关，这可能与CEACAM1 能够介导乳腺癌细胞黏附有关。近年研究发现，免疫功能紊乱与乳腺癌发生密切相关，而CEACAM1可作为T细胞活化后的协同受体，抑制T细胞产生细胞因子，从而调控机体的 免 疫 功 能［16］。 STEIN 等［17］研 究 报 道 ，上 调CEACAM1表达能够抑制T细胞活性，促进乳腺癌细胞免疫逃逸，进而促进乳腺癌的发生、发展。

四跨膜蛋白超家族是一个以四个高度保守的跨膜结构为特征的蛋白家族，能够通过与细胞表面多种跨膜蛋白形成复合物，从而参与调控细胞的多种生物学行为。TM4SF1 基因定位于人染色体3q25.1，其编码蛋白通常位于细胞表面，能将细胞外信号传送至细胞质中，主要参与细胞生长和上皮间质 转 化（EMT）调 控［18］。 TANG 等［19］研 究 报 道 ，TM4SF1能够通过Wnt/β-catenin/Y染色体性别决定区-盒转录因子2 信号通路，促进结直肠癌细胞EMT，进而促进结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移。FU 等［20］研究发现，TM4SF1 能够通过调节 Yes 相关蛋白/转录增强缔合域信号通路，促进非小细胞肺癌细胞增殖、侵袭和迁移。本研究结果发现，观察组血清TM4SF1水平显著高于对照组，与既往高新雅等［9］报道一致。进一步研究发现，乳腺癌患者血清TM4SF1 水平与肿瘤组织分化程度、TNM 分期、局部或远处转移有关。提示TM4SF1 在乳腺癌中亦发挥促癌作用，血清TM4SF1 水平升高与乳腺癌恶性进展密切相关，其机制可能与TM4SF1 能够调控乳腺癌细胞EMT 有关。EMT 是指细胞从上皮状态向间质状态转换的过程，该过程中会修饰细胞表达的黏附分子，使细胞具备迁移和侵袭能力，从而促进肿瘤细胞的恶性生物学行为［21］。而TM4SF1 能够通过Ras 同族体基因信号通路介导EMT［18］。近期亦有研究报道，上调TM4SF1 表达能够促进乳腺癌细胞EMT，进而促进乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移［22］。

本研究ROC 曲线分析显示，血清CEACAM1、TM4SF1 水平诊断乳腺癌的AUC分别为0.770、0.787，稍高于传统血清肿瘤标志物CEA、CA15-3，提示CEACAM1、TM4SF1可作为乳腺癌早期诊断的新型肿瘤标志物。血清CEACAM1、TM4SF1水平联合诊断乳腺癌的AUC为0.872，显著高于血清CEA、CA15-3、CEACAM1、TM4SF1 单 独 ，说 明 血 清 CEACAM1、TM4SF1水平联合能够提高对乳腺癌的诊断价值。

综上所述，乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平升高，且其水平与组织分化程度、TNM 分期、局部或远处转移有关。CEACAM1、TM4SF1 可作为诊断乳腺癌的血清生物标志物。但CEACAM1、TM4SF1 参与乳腺癌的具体分子机制尚不清楚，仍需进一步研究。