儿童腹泻中的伤寒沙门菌耐药监测情况分析

李雪平 胡跃林 严维强 刘海娟 刘天艳 唐斌

摘要：目的 对腹泻儿童患者中伤寒沙门菌耐药监测分析，为临床提供合理的用药指导。方法  通过对我院2020年7月～2022年1月1003例儿童腹泻患者进行大便培养，筛查伤寒沙门菌。对分离后的菌株进行药敏试验，并对相关结果以及患者的临床资料进行了解和研究。结果 在1003例腹泻儿童临床样本中，共分离78株伤寒沙门菌，阳性率为7.8%。78株伤寒沙门菌中，血清分型有鼠伤寒沙门菌血清型39例、沙门菌D群17例、沙门菌属7例、沙门菌鸡血清型4例、沙门菌E群2例、肠炎沙门菌血清型1例、沙门菌B群某种6例、沙门菌伦敦血清型1例、沙门菌首都柏林血清型1例。上述菌株在进行药敏试验期间，其与氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、复方新诺明耐药性相对较高，耐药率依次为87%、74%、38.9%。药敏试验进行期间还发现，上述菌株对阿米卡星药物未发现出现耐药性情况。结论 加强对伤寒沙门菌的耐药监测，医护人员应在患者治疗期间对药敏试验结果进行充分了解，以此为基础对治疗方案进行调整，以防止伤寒沙门菌耐药状况加重而给患儿和家属带来不必要的麻烦。

关键词：儿童腹泻;伤寒沙门菌;临床耐药监测

伤寒沙门菌是一种常见菌株，其可以从人、动物体内进行分离获得。该菌株具有较多的血清型，致病性也具有较为明显的特异性。在该菌属之中，部分专门对动物致病的病菌，也存在部分对人和动物都可致病的菌种。在开展研究期间发现，沙门菌可能导致多种感染性疾病的发生。病情较轻的患者，可能出现自愈性胃肠炎;感染较重疾病的患者，可能出现致死性伤寒。本研究通过对伤寒沙门菌进行临床耐药监测回顾分析，以便指导临床合理用药。

1材料与方法

1.1 菌株来源

从2020年7月～2022年1月1003例本院就诊的住院腹泻感染患儿的大便标本中，刷选出78株伤寒沙门菌，患儿年龄0～9岁。

1.2 仪器与试剂

药敏纸片、vitek-32型全自动微生物鉴定系统（生物梅里埃，法国）、伤寒沙门菌的血清鉴定试剂、编码管、SS平板、麦康凯平板，卫生部提供的质控菌株CMCC（B）50071。

1.3 方法

首先标本采集。大便不能被尿液等其他的东西污染，收到样本应立即镜检，后续再做细菌培养等项目。最好是早晨的大便，便完后用竹签取少量置无菌培养管中。为提高检出率，要采集新鲜粪便作培养，以提高阳性率。虽然粪便含有多种杂菌，但也应尽量采用无菌容器。当疑为细菌性痢疾、肠炎、肠结核和顽固性腹泻时，应在急性期采集，最好在用药之前，以提高检出率;肠热症患者应在两周以后采集理。采用自然排便法或直肠拭子法，挑取有脓血、粘液的粪便2～3 g 置于无菌容器中送检。随后对标本进行分离的培养以及菌株的鉴定，将大便标本接种在血平板、SS平板、麦康凯平板上，在35℃厌氧孵育箱里培养24～48 h。在此基础上，在接种板上选择光滑、圆形、湿润、半透明、边缘整齐的菌落。选择全自动微生物鉴定系统，对培养的菌种进行鉴定处理。最后，将美国临床以及实验室标准化协会2008年颁布的有关抗菌敏感试验相关规定开展药敏试验操作。（1）采取血清鉴定型，鉴定出各种血清型的比率。（2）采用仪器测定所分离菌株对氨苄西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、氨曲南、厄他培南、环丙沙星（肠道内外）、复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、头孢吡肟、亚胺培南、左旋氧氟沙星的敏感、中介及耐药率。

1.4 统计学处理

使用WHONET5.4软件记率、计算，并分析相关结果数据。

2结果

伤寒沙门菌血清分离出的例数，见表1。

3讨论

本次采用回顾性分析的研究模式，对被纳入研究之中患儿的临床资料进行统计，并对其粪便标本进行病原微生物检验[1]。1003例儿童细菌性腹泻患儿的年龄范围在0～7岁。诊断标准如下：①符合《细菌鉴定手册》之中的诊断标准;②患儿存在相关临床症状;③患儿粪便培养之中存在细胞生长。符合上述2条或2条以上就可确诊为细菌性腹泻[2]。潜伏期数小时至数天、数周。多急性起病，少数起病较缓慢。临床表现轻重不一，其中胃肠道症状最为明显，在发病之后会持续出现纳差、恶心等一系列症状，同时伴随着呕吐、腹胀、腹痛等。在病情较为严重的情况下，还会出现多次腹泻、畏寒、发热、乏力、头晕等一系列症状。随着病情的加重，患儿在大量丢失水分的情况下，会出现脱水、电解质紊乱、休克等。病程为数天至1～2周，常为自限性，少数可复发。不同细菌所致腹泻的临床类型不同[3]。排除标准：①患儿存在脏器功能严重不全;②患儿存在其他严重病变或者并发症;③患儿临床资料不完整;④患儿存在内分泌系统和血液系统疾病[4]。在开展本次研究中，对被纳入研究之中的所有患儿开展病源微生物调查，此过程中完全按照《全国临床检验操作过程》之中的相关方式以及方法进行细菌的培养和分离[5]。在对患儿粪便标本进行采集之后，将患儿粪便标本制作成图片并进行染色，随后使用显微镜对标本进行观察[6]。在SS、血平板及麦康凯培养基中置入标本，调节温度为37℃并对标本进行持续培养，再次检测培养基中可疑菌落，然后应用生化反应检测以及血清凝集试验进行生物类型检测[7]。之后对粪便样品进行药敏检验，在35℃温度下进行菌株培养，持续培养18～20h后取出，对抑菌圈直径状况进行测量，然后依照抑菌圈直径对细菌耐药性进行判断，确保各项操作严格依照操作标准进行[8]。对患儿病原微生物检测情况进行统计，并分析分离出的各类病原微生物分布状况，分析氨苄西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、氨曲南、厄他培南、环丙沙星（肠道内外）、复方新诺明、氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、头孢吡肟、亚胺培南、左旋氧氟沙星等药物的耐药情况[9]。

伤寒沙门菌又称伤寒杆菌，是革兰氏阴性杆菌，伤寒杆菌在自然界中活力比较强，在水中可以存活2到3周，在粪便中可以存活1到2个月[10]。伤寒杆菌主要以动物为寄存宿主，比如鸡、鸭、鹅、牛、猪、羊等，这些都可以成为传染源，人类感染伤寒杆菌主要是食物传播，饮水传播，还有直接接触伤寒病人所污染的用具。伤寒杆菌感染后主要表现为发热、腹痛、腹泻或便秘的症状，在临床上表现为持续高热、相對缓脉、皮肤玫瑰疹、肝脾肿大等，预防伤寒杆菌感染要加强食品安全，同时隔离伤寒杆菌病人，治疗主要是应用抗生素和对症治疗。

伤寒沙门菌感染可以累及人体的多个组织和器官出现损害，症状具体如下：（1）常见的临床表现有最初是发热，常伴有全身的不适、乏力、咳嗽、咽痛等临床表现，随着病情的进展发热可以高达39-40℃以上;（2）此外，病人还可以出现腹胀、便秘、腹泻等消化系统症状，以及精神恍惚、表情淡漠、反应迟钝、听力减退，甚至出现昏迷等神经系统症状;（3）有的病人可以累及心脏，出现心律不齊等循环系统症状;（4）部分病人还可以出现皮肤的皮疹。

小儿细菌性腹泻病理机制十分复杂，病原主要侵犯小肠黏膜绒毛，引起绒毛脱落，排列紊乱，导致肠上皮功能障碍，腹泻严重时可能导致患儿营养不良，从而影响到患儿的生长发育，严重的引发死亡。本实验挑选1003例儿童细菌性腹泻患儿，通过的性别、年龄、病程、呕吐、发热、腹泻及体重等对本市细菌性腹泻的流行病学进行调研，进一步分析和研究其病原微生物检验结果，同时对分离出来的细菌进行药敏分析，以期为临床诊疗提供实验室依据。

参考文献

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[3] 陈建， 张金金， 杨虹，等. 深圳市腹泻患者沙门菌感染状况和耐药性分析[J]. 中国人兽共患病学报， 2018， 34（6）：6.

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[6] 张亮， 邱炜， 张秋平. 2015—2018年珠海市10岁及以下儿童沙门菌感染情况[J]. 公共卫生与预防医学， 2019.

[7] 余晓君， 陈强， 陈冲，等. 引起儿童腹泻鼠伤寒沙门菌对喹诺酮类药物耐药机制研究[C]// 首届中国临床微生物学大会（宁波会议）暨医学参考报微生物学与免疫学论坛. 0.

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[9] 张建群， 袁士杰， 苗超. 2007-2018年浙江省余姚市沙门菌血清型变迁及耐药分析[J]. 疾病监测， 2020.

[10] 谷宇佳.儿童细菌性腹泻的病原微生物检验结果分析[J].系统医学，2018，3（22）：83-85.