玉竹中三种高异黄酮的显微红外光谱学研究

韩璐 徐涛

摘要：目的：建立一种快速、简便、准确性高的鉴别方法，对玉竹中的高异黄酮成分进行红外光谱学研究。方法：采用提取、分离、纯化工艺制备玉竹中高异黄酮类化合物，对获得的三种高异黄酮化合物进行显微红外光谱测定和分析。结果：得到显微红外谱图信息，分析数据得到三种高异黄酮特征性信号峰及指纹性信号峰。结论：首次对玉竹中三种高异黄酮进行显微红外光谱学研究，为今后玉竹中高异黄酮类成分的研究提供理论基础。

关键词：玉竹;高异黄酮;显微红外光谱

【中图分类号】 R4 【文献标识码】 A      【文章编号】2107-2306（2022）09--01

玉竹为百合科多年生的草本植物[1]。玉竹中的高异黄酮类化合物，具有降血糖、降血脂、降血压等作用[2]。高异黄酮类化合物主要存在于百合科植物中[3]，目前，研究人员发现高异黄酮类化合物具有多种生物活性，主要有抗肿瘤、抗癌作用;抗炎、抗菌、抗病毒作用;降血糖和胆固醇作用;对心血管系统的作用，如对血压的影响，抑制血小板凝集的作用，对外周血管的影响等。

显微红外光谱法是将显微镜与傅里叶变换红外光谱仪相结合的仪器，既是微区分析又是微量分析的一种现代的技术，与传统的红外光谱技术相比，优点在于其灵敏度比较高，不需要加入任何的稀释剂，可以反映其样品的本质光谱[4-6];制备方法简单，大多数的样品无需制备，可以直接进行检测;尤其是一些晶体，不需要压片，可以保持原有的结构，进行无损伤检验。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Nicolet iN10TM显微红外光谱仪（赛默飞世尔科技有限公司，美国）;电子天平（梅特勒公司，瑞士）;KQ5200DE数控超声波清洗器（昆山市超声儀器有限公司，中国）;N1001旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）等。

1.2 试药

甲醇为色谱纯;无水乙醇为分析纯;乙酸乙酯为分析纯;石油醚为分析纯;玉竹药材（河北安国市）等。

2 方法与结果

2.1 玉竹中高异黄酮的提取与制备

取玉竹药材10kg，加4倍量的95%的乙醇回流提取2次，每次2h，过滤，将提取液合并。旋转蒸发浓缩，加适量蒸馏水进行分散，充分震荡后静置。水分散溶液置于冷冻离心机4℃，9000r/min的条件下离心15分钟，弃去上清液，取水不溶的部分于50℃烘干，加适量甲醇超声溶解，过滤，续滤液转移至旋转蒸发仪中，近蒸干时转移至蒸发皿，蒸干得到浸膏，称重，反复柱层析分离，制备液相色谱制备后，Sephadex-LH-20凝胶柱色谱纯化，得到三种高异黄酮化合物。

2.2 三种高异黄酮的结构鉴定

质谱数据显示化合物Ⅰ的准分子离子峰m/z为345.1452[M+H]+，对其分子进行二级质谱检测，得到主要二级碎片为121.0692和较小碎片峰251.0924、223.0642、137.0609。化合物Ⅱ的准分子离子峰m/z为331.1293[M+H]+，对其分子进行二级质谱检测，主要二级碎片为107.0508和225.0775。化合物Ⅲ的准分子离子峰m/z为315.1320[M+H]+，对其分子进行二级质谱检测，得到主要二级碎片为107.0509和209.0827。

经ESI-MS、1H-NMR与13C-NMR谱分别鉴定化合物I～III分别为3-（4’-甲氧基苯甲基）-5，7-二羟基-6-甲基-8-甲氧基-苯丙二氢吡喃-4-酮（C18H18O5）、3-（4’-羟基苯甲基）-5，7-二羟基-6，8-二甲基-苯丙二氢吡喃-4-酮（C19H20O6）、5，7-二羟基-6-甲氧基-8-甲基-3- （2’，4’-二羟基苯甲基）-苯丙二氢吡喃-4-酮（C18H18O6）。

2.3 三种高异黄酮单体的显微红外光谱研究

实验前，先将液氮加入显微红外光谱仪中，MTC检测器进行冷却处理，开机预热30分钟，待仪器进入稳定工作状态后，所制的样品置于载物平台，调整显微镜确定测试位点，在显微红外光谱仪上以分辨率4cm-1，扫描次数64次，MCT检测器，背景扫描设定为样品前扫描，扫描范围400～4000cm-1的条件下进行红外光谱测定，结果如图1、2。

通过对三种高异黄酮化合物显微红外光谱检测，对比主要峰位可知，3400cm-1附近为分子内-OH伸缩振动峰，1630cm-1附近为-C=O伸缩振动峰，1480 cm-1附近为苯环骨架伸缩振动峰，三种高异黄酮主体母核基本一致，其它峰位见表1，不同峰位表明三种高异黄酮苯环上取代基不同，本实验首次建立三种高异黄酮化合物显微IR光谱图，为后续玉竹中高异黄酮及其它中药中高异黄酮成分的光谱学研究提供理论基础。

参考文献：

[1]夏光辉.玉竹二氢高异黄酮分离与抗氧化活性研究[D].沈阳农业大学，2020.

[2]徐涛.玉竹中高异黄酮的TLC-SERS联用技术研究（D）.佳木斯：佳木斯大学，2015.

[3]李海明，白虹，李巍，等.玉竹化学成分研究[J].食品与药品，2010，1（3）：102-104.

[4]金樱华，顾中怡，强音等.傅里叶变换显微红外光谱法鉴定多层复合薄膜成分[J].理化检验（化学分册），2016，02：219-221.

[5]张轩，胡超，闫妍等.显微红外反射光谱法快速鉴别珍珠粉真伪[J].光谱学与光谱分析，2014，09：2424-2428.

[6]冯艳春，胡昌勤.近红外光谱法在药物分析中的应用[J].中国药事，2003，17（5）：312-314.

作者简介：韩璐（1989年3月—），女，汉族，黑龙江省齐齐哈尔市人，本科学历毕业，助理实验师，研究方向，药学。

通讯作者：徐涛（1988年7月—），男，汉族，黑龙江大庆市人，硕士研究生毕业，实验师，研究方向：药物分析。