70例卵巢癌患者治疗期间外周血T淋巴细胞亚群测定的临床意义

娄 俊 易 韵 储小燕 钟琳琳 王 超

卵巢癌是女性生殖系统常见恶性肿瘤，在全球患病致死率居高位[1]。目前临床治疗方案以化疗药物、手术及靶向药物等联合的综合治疗。本研究通过流式细胞仪检测卵巢癌患者外周血T细胞亚群在整个治疗过程中的变化，观察其免疫功能变化规律，为临床提供有价值的文献资料。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取本院2018年3月至2021年3月收治的70例均经手术病理检查证实的卵巢癌患者为研究对象，年龄为37～75岁，平均(57.9±8.39)岁，FIGO分期Ⅰ期6例，Ⅱ期7例，Ⅲ期38例，Ⅳ期19例。患者治疗以化疗加手术治疗为主。本研究治疗时段分为：治疗早期、治疗中期、治疗后期；以手术为节点，手术前化疗和手术为治疗早期，手术后3个周期化疗为治疗中期，最后3个周期化疗为治疗后期。疗效差是指患者肿瘤CA125下降不理想、上升和(或)影像学检查提示病情进展；复发患者指再次因卵巢恶性肿瘤复发入院；疗效好是指患者规范完成治疗疗程，定期复查病情稳定、无复发；本研究间隔时长≤2年。以上所有患者无免疫系统疾病，未服用免疫相关制剂，未行放疗。

1.2 检测方法

所有入组患者晨起空腹抽静脉血5 ml，以肝素抗凝。红细胞裂解液裂解红细胞、淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，随后使用流式细胞仪检测。观察记录CD3、CD4、CD8的数据，分析各淋巴细胞亚群情况；本实验CD3、CD4、CD8数据正常范围分别为：770～2860个/μl、414～1440个/μl，238～1250个/μl。操作严格按照试剂盒仪器说明书进行。各项数据上传于数据库。

1.3 治疗方法

入组患者为卵巢癌初诊患者，有意愿纳入研究对象，经我院卵巢癌规范化治疗，手术方案根据患者术中探查具体情况，中晚期患者在第2～3个周期新辅助化疗后手术，化疗方案以紫杉醇类加铂类经典方案。有病理确诊，如病理检查提示其他性质肿瘤给予剔除。

1.4 统计学处理

应用SPSS 19.0软件进行统计处理，计量资料采用均数±标准差表示，组间比较采用t检验，P<0.05认为差异具有统计学意义；计数资料采用χ2检验，P<0.05表示差异具显著性。

2 结果

2.1 不同临床分期卵巢癌外周血淋巴细胞亚群水平的比较

治疗前早中期(Ⅰ、Ⅱ期)与晚期(Ⅲ、Ⅳ期)卵巢癌患者血CA125水平比较差异有统计学意义(P<0.05)；而不同临床分期患者在年龄、淋巴细胞亚群数值、白细胞数量、碱性磷酸酶以及C-反应蛋白水平比较无显著性差异(P>0.05)，见表1。

表1 不同临床分期卵巢癌患者各项指标的比较

2.2 治疗期间患者外周血淋巴细胞亚群水平变化

表2表明：在不同治疗时期外周血CD3、CD4、CD8和白细胞数量、CA125数值，各组间均有统计学意义(P<0.05)，治疗前期CD4/CD8比值与治疗中、后期比较存在统计学差异(P<0.05)。

表2 治疗期间CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、白细胞、碱性磷酸酶、CA125水平对比

2.3 疗效差、复发患者和疗效好患者外周血淋巴细胞亚群的变化

疗效差者或复发者外周血淋巴细胞数呈下降趋势或持续低下状态，其比例与疗效好患者比较有明显统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 疗效差、复发与疗效好者淋巴细胞数变化(例，%)

3 讨论

治疗卵巢癌手段以化疗结合手术为主综合治疗，化疗作为卵巢癌必备治疗方式，目前国际上公认的上皮性卵巢癌化疗一线方案为TP方案，即紫杉类化合物联合铂类抗肿瘤化疗。两类化疗药物作用机制:前者属于植物类细胞周期特异性药物，作用于细胞M期，加强微管蛋白聚合作用和抑制微管解聚作用，导致形成非功能性微管束，破坏肿瘤细胞有丝分裂；后者铂类化疗药属于细胞周期非特异性药物，直接破坏DNA并阻止其复制的药物。TP化疗对卵巢癌患者虽然能起到杀死肿瘤细胞和防止复发，但机体正常细胞对化疗药物的耐受性不可忽视。卵巢癌分期手术和肿瘤细胞减灭术为卵巢癌治疗的首选，是有效治疗手段。有文章报道[2]恶性肿瘤外周血T淋巴细胞亚群随着肿瘤病情的进展，体内CD4、CD4/CD8比值降低，通过手术后癌细胞减少，体内可能存在的免疫抑制因子失活，CD4、CD4/CD8比值上升至正常水平。本实验研究显示患者治疗早期因肿瘤细胞抑制和减负，机体免疫系统得已重建并提升；而治疗晚期可能因多次化疗导致机体整体免疫系统受损并对免疫系统产生抑制作用。

T淋巴细胞作为一种胸腺依赖性淋巴细胞，T细胞活化及其细胞因子表达在抗肿瘤免疫效应中发挥重要作用[3]。外周血T淋巴细胞目前研究多为CD3、CD4、CD8，CD3起到传递抗原信息并激活T细胞，CD4为协助并增强免疫能力，CD8为杀伤T细胞，直接识别、杀伤异常细胞，且具有免疫调节效应，CD4/CD8比值的恒定维持着细胞免疫反应的平衡。免疫功能低下存在于内在因素及外在因素，包括自身免疫系统缺陷，肿瘤对免疫系统的抑制及长期应用药物对免疫细胞的杀伤。从研究资料图表卵巢癌患者外周血T淋巴细胞亚群的变化进行分析，入院中晚期卵巢癌患者因自身条件因素免疫系统存在不同程度下降；患者经化疗后，从图表免疫系统CD3、CD4、CD8、CD4/CD8的数值来分析，前期治疗过程中能有效改善及恢复免疫系统，早前阶段化疗能促进免疫系统修复；后期化疗对患者免疫系统可能有一定损伤，大部分患者在第5个周期化疗后患者免疫系统急剧下降，且临床观察发现多周期化疗后药物累积毒副反应加重，白细胞减少、胃肠反应程度、肝肾功能受损等相应提升。大量文献报道[4]，给予多次化疗患者联合生物免疫治疗，治疗效果更好，患者依从性更强，能有效提高患者治疗率，对患者生活质量也能起到积极作用。因此我们可以得出结论，卵巢癌晚期患者在需要行化疗同时，建议可适当予免疫支持治疗，CA125下降理想且能稳定保持，在提高患者疗效同时还能助于改善其机体免疫系统。

有部分研究报道[5]，卵巢癌病情严重程度与免疫系统受损程度呈正相关，病情越晚，免疫功能越差。本实验研究所述，入院检测卵巢癌患者免疫功能低下，病情早晚与她们的免疫状态无明显相关性，治疗后免疫淋巴细胞存在改变，通过测定不同治疗时段的卵巢癌患者外周血免疫细胞数值，了解卵巢癌免疫功能状态，为治疗评判疗效可提供参考，也为今后肿瘤免疫治疗时机选择提供数据支持。免疫治疗[6]在肿瘤患者运用前景广泛，方式多样，目前单用免疫检查点抑制剂单克隆治疗，如PD-1或PD-L1，效果欠佳，联合化疗、靶向药物治疗已取得一些临床数据，有部分数据是可喜的，表明免疫治疗有治疗意义所在；研究[7]进一步还表明，PD-1联合PAPPi抑制剂治疗发现对于BRCA突变、重组缺陷患者来说效果更好。还有更多研究实验在探索免疫治疗药物对卵巢癌患者的疗效中，我们临床医师期待更多惊喜。