胃癌组织中胎盘特异性基因1在不同部位的表达与临床病理特征及预后的关系

王 磊 辛小敏 闫小燕 王秀敏

胃癌是临床常见的消化道恶性肿瘤，其发病率和死亡率均居高不下，是全球第四大癌症，但80%患者就诊时已处于中晚期，诊疗效果较差，5年总生存率仅约30%[1-3]。胎盘特异性基因1(placenta-specific 1，PLAC1)为癌-睾丸抗原(CT抗原)家族中的一员，在生殖细胞或胎盘滋养层组织等正常组织中表达，在肿瘤组织中普遍高表达[4-5]。研究报道PLAC1在胃癌中高度表达，并影响患者预后[6]。有研究表达，PLAC1在乳腺癌、肝癌和肺癌等肿瘤中具有促癌作用，但是在胃癌中的作用机制仍不清楚[7-8]。在不同肿瘤组织中PLAC1的表达以及发挥的功能可能不同，因此，本研究探讨胃癌组织中不同部位PLAC1表达与临床病理特征以及预后的关系。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2020年1月本院收治的胃癌患者68例，年龄18～69岁，平均(57.32 ±7.64)岁。纳入标准：①符合《胃癌规范化诊疗指南(试行)》[9]中关于胃癌的诊断标准，患者经病理检查确诊为胃癌； ②行根治术或姑息术切除肿瘤，且术前未接受过放化疗、免疫治疗患者；③所有患者病理组织均可进行免疫组织化学检测； ④患者签署自愿受试同意书，患者及其家属需签署知情同意书。排除标准：①合并其他器官严重性病变患者 ；②合并其他恶性肿瘤患者。

1.2 免疫组化法检测PLAC1表达

将包埋制作好的组织芯片蜡块切成3～5 μm的薄片，烘片后置于二甲苯中20 min，经无水乙醇、90%、80%、70%梯度乙醇清洗，ddH2O清洗后，3%H2O2溶液浸泡，PBS浸泡后加封闭液37℃封闭1 h。PBS浸泡后加一抗，4℃孵育过夜。PBS浸泡后加二抗，室温孵育1 h，PBS浸泡清洗后加DAB显色。ddH2O漂洗后苏木精衬染后自来水冲洗玻片，65℃烘干后中性树胶封固。结果判定：采用双盲法阅片。在低倍镜(100×)、高倍镜(400×)下观察癌周与癌巢部位染色强度，细胞核呈棕黄色颗粒为阳性。根据阳性细胞百分比计分：无阳性细胞数为0分、<10%为1分、10%～50%为2分、>50%为3分，其中0～1分为低表达，2～3分为高表达。

1.3 随访

采用电话或门诊的方式进行随访，随访截止日期为2021年1月，总生存期(OS)定义为从肿瘤确诊至随访截止日期或死亡时间。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 胃癌中PLAC1在癌周和癌巢组织中的表达与临床病理特征的关系

PLAC1在癌周组织中高表达率为41.18%(28/68),在癌巢组织中高表达率为47.06%(32/68)。胃癌中PLAC1在癌周组织中的表达与患者年龄、性别、肿瘤分期、淋巴结远处转移等临床病理特征均无关(P>0.05)；胃癌中PLAC1在癌巢组织中的高表达与肿瘤最大直径有关(P<0.05)，与其他病理特征无关(P>0.05)，见表1。

表1 胃癌中PLAC1在癌周和癌巢表达与临床病理特征的关系/例

2.2 PLAC1表达与患者生存预后的相关性

Kaplan-Meier生存分析结果显示：癌周PLAC1表达与患者生存呈负相关(P=0.034)，即高表达的患者的生存期更差，癌巢PLAC1表达与患者生存无显著相关性(P=0.395)，见图1。

图1 PLAC1 在癌周和癌巢表达与患者生存分析

2.3 影响胃癌患者预后的单因素分析

截止到2021年1月，68例患者中生存38例，死亡30例。

单因素分析发现淋巴结远处转移、癌周PLAC1表达是影响胃癌预后的因素(P<0.05)，见表 2。

表2 影响胃癌患者预后的单因素分析/例

2.4 影响胃癌患者预后的多因素分析

多因素分析显示淋巴结远处转移、癌周PLAC1表达是影响胃癌预后的独立危险因素，见表3。

表3 影响胃癌患者预后的多因素分析

3 讨论

胃癌是常见的消化道恶性肿瘤，发生率与死亡率分别位居全球第5位与第3位[10]。我国胃癌发病率与死亡率仅次于肺癌，居第2位，多数患者因中晚期胃癌就诊[11-12]。胃癌的主要临床表现为远期生存状况低下、临床治疗效果差，且具有易复发、易转移的特点[13]。尽管近年来晚期胃癌患者手术及放化疗方案不断发展，但是5年生存率仍然较低[14]。虽然针对表皮生长因子受体、c-met等药物正在进行临床试验，但是胃癌的发生、发展是多因素、多步骤的复杂过程，其在胃癌中的应用存在局限性[15-16]。另外关于胃癌发生发展和转移的分子机制尚不清楚，因此探讨胃癌的发生、发展、浸润、转移及复发等过程的作用机制，寻找新的预后指标是目前临床研究亟待解决的问题。

PLAC1在正常组织中低表达，在多种肿瘤组织中高表达，因此PLAC1可作为肿瘤特异性抗原，有成为肿瘤治疗靶点的潜力[17]。有研究报道PLAC1在胃癌组织中高表达，且高表达PLAC1患者预后差，且PLAC1表达与胃癌的肿瘤分期有关，分期越高PLAC1表达量越高[18]。本研究发现虽然癌巢组织中PLAC1的表达和患者的生存期不存在相关性，但与肿瘤大小有关，提示癌巢PLAC1高表达的患者中肿瘤最大直径超过5 cm的患者更多、恶性程度更高。虽然胃癌中PLAC1在癌周表达与患者临床病理特征均无关，但是癌周PLAC1表达与患者生存呈负相关，即高表达的患者的生存期更差，癌周PLAC1表达是影响胃癌预后的独立危险因素，提示癌周PLAC1有潜力成为预测胃癌患者预后的生物标志物，但其中具体作用机制尚不明确，潜在的原因还需进一步试验数据加以验证。本研究并未发现PLAC1表达与胃癌肿瘤分期之间存在相关性，可能与样本量偏少以及其他影响因素有关。

综上所述，胃癌癌巢组织中PLAC1表达与肿瘤最大直径有关，癌周组织PLAC1表达可作为预测胃癌患者预后的生物标志物，具有临床指导意义。但本研究由于是单中心研究，样本量偏少，在研究结果上存在一定的局限性，因此需要更具前瞻性的大样本量研究。