海南省海口地区生殖道支原体感染及耐药分析

周 芬, 张余彬, 肖美芳

(海南省妇女儿童医学中心 检验科, 海南 海口, 570206)

支原体是生殖道感染中常见的微生物病原体，能引起泌尿生殖道感染的支原体主要有解脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)。治疗生殖道支原体感染中抗菌药物使用不得当会导致药物耐药率升高，给后续治疗带来一定困难，因此临床在治疗生殖道感染过程中对于抗菌药物的选择和剂量方面应慎重。为了解海口地区支原体生殖道感染及抗菌药物的耐药情况，本研究将就诊于海南省妇女儿童医学中心2016年1月—2020年12月10 109份支原体培养及药敏结果进行回顾性统计分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月—2020年12月就诊于海南省妇女儿童医学中心疑似生殖道支原体感染患者的10 109份标本进行支原体培养及药敏试验，其中女性患者标本8 981份，男性患者标本1 128份。

1.2 标本采集

1.2.1 男性患者标本采集: ① 尿道分泌物采集。取材前先用生理盐水清洗尿道口，用无菌棉球擦拭，用极细的无菌纤维棉拭子插入尿道内2～4 cm取出分泌物，放入无菌管立即送检。② 前列腺液采集。取材前先用生理盐水清洗尿道口，前列腺按摩后用无菌棉拭子取分泌物，放入无菌管立即送检。③ 精液采集。禁欲7 d, 取材前先用生理盐水清洗尿道口，采用手淫法射精于无菌杯，立即送检。

1.2.2 女性患者标本: ① 阴道分泌物采集。取材前先清洁外阴部，用窥阴器扩开阴道后，采用无菌棉拭子采取阴道口内4 cm内侧壁或后穹窿处分泌物，放入无菌管立即送检。② 女性宫颈分泌物采集。取材前先清洁外阴部，采用窥阴器扩开阴道后，用无菌棉拭子插入宫颈口1～2 cm, 轻轻旋转1圈，蘸取有柱状上皮细胞的分泌物，放入无菌管立即送检。

1.3 试剂与方法

支原体鉴定药敏试剂盒采购于珠海美华医疗科技有限公司。试剂由支原体培养基和检测卡组成。抗菌药物相关信息如下: 四环素(低浓度4 mg/L、高浓度8 mg/L), 红霉素(低浓度1 mg/L、高浓度4 mg/L), 强力霉素(低浓度4 mg/L、高浓度8 mg/L), 氧氟沙星(低浓度1 mg/L、高浓度4 mg/L), 交沙霉素(低浓度2 mg/L、高浓度8 mg/L), 阿奇霉素(低浓度0.12 mg/L、高浓度4 mg/L), 克拉霉素(低浓度1 mg/L、高浓度4 mg/L), 环丙沙星(低浓度1 mg/L、高浓度2 mg/L), 左氧氟沙星(低浓度1 mg/L、高浓度4 mg/L), 罗红霉素(低浓度1 mg/L、高浓度4 mg/L), 司巴沙星(低浓度1 mg/L、高浓度4 mg/L), 美满霉素(低浓度4 mg/L、高浓度8 mg/L), 地红霉素(低浓度1 mg/L、高浓度4 mg/L)。先在空白孔中加入100 μL培养液，再将棉拭子插入培养液中旋转搅拌混匀，在瓶口挤干拭子后取出，然后各加100 μL混有标本的培养基至剩余微孔中，放入(35±1) ℃培养箱培养, 24、48 h后分别记录结果。

当有支原体Uu和(或)Mh生长时，培养基中的尿素和精氨酸分解, pH值上升，酚红指示剂变红，培养基由黄色变成红色。Uu≥104孔呈红色，判定为检出解脲脲原体, Uu感染; Mh≥104孔呈红色，判定为检出人型支原体, Mh感染; Uu≥104孔与Mh≥104孔均呈红色，判定为Uu合并Mh感染。

1.4 统计学处理

采用SPSS 25.0统计软件进行数据分析，计数资料以百分率表示，组间比采用卡方检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 近年生殖道支原体培养结果

2016年1月—2020年12月共收集男性生殖道标本1 128份和女性生殖道标本8 981份，共计10 109份，其中生殖道支原体培养阳性3 491例，总阳性率为34.53%, 其中Uu的阳性率为32.04%, 均高于Mh和Uu合并Mh, 差异有统计学意义(P<0.001)。生殖道支原体培养结果表明，女性阳性率为37.25%, 高于男性的12.94%, 差异有统计学意义(P<0.001), 见表1。

表1 10 109份生殖道支原体培养结果

2.2 生殖道支原体感染在不同年龄段的分布情况

生殖道支原体感染患者可分为≤20岁、21～30岁、31～40岁、41～50岁、≥51岁5个不同年龄段人群，其中≤20岁年龄段人群阳性率最高(42.86%)，与其他年龄段比较，差异有统计学意义(P<0.05), 见表2。

表2 不同年龄段人群生殖道支原体培养阳性分布情况

2.3 生殖道支原体药敏结果分析

生殖道支原体药敏试验结果表明, Uu耐药率从低到高依次为交沙霉素、阿奇霉素、克拉霉素、美满霉素、强力霉素、四环素、罗红霉素、左氧氟沙星、司巴沙星、红霉素、地红霉素、氧氟沙星、环丙沙星。Mh耐药率从低到高依次为交沙霉素、强力霉素、美满霉素、四环素、司巴沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素/地红霉素/罗红霉素(药物Mh耐药率相同)、红霉素。Uu合并Mh耐药率从低到高依次为交沙霉素、美满霉素、强力霉素、四环素、左氧氟沙星、司巴沙星、氧氟沙星、阿奇霉素、地红霉素/环丙沙星(Uu合并Mh耐药率相同)、罗红霉素/克拉霉素(Uu合并Mh耐药率相同)、红霉素，见表3。

表3 3 491例生殖道支原体培养阳性菌株药敏试验结果分析

3 讨 论

支原体是一类缺乏细胞壁、形态上呈高度多形性，能通过除菌滤器，能在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物。生殖道支原体感染可引起多种疾病，如输卵管慢性炎症、子宫内膜炎症、妊娠的不良结局、胚胎停育、反复自然流产、不孕不育和部分新生儿疾病等[1-6]。

本研究发现，生殖道支原体感染以单纯Uu感染为主，其次为Uu合并Mh感染，单纯Mh感染较少见。本研究进一步对泌尿生殖道支原体感染的性别和年龄进行了分析，结果显示，阳性患者年龄段主要集中于21～40岁的女性感染者，原因可能与女性生理解剖结构、内分泌激素调节有关[7]。同时对不同年龄段人群支原体感染情况进行分析发现, ≤20岁年龄段人群感染率最高，这可能与该年龄段人群卫生意识和健康性生活意识较差有关，应加强该年龄段人群相关知识教育。

本研究药敏试验结果显示, Uu对环丙沙星等喹诺酮类药物耐药率较高，这可能与Uu编码II型拓扑异构酶的基因喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变有关[8]。Uu对交沙霉素、阿奇霉素、克拉霉素的耐药率普遍较低，但相关报道对比不同性别克拉霉素治疗生殖道支原体感染的研究显示，男性患者的治疗效果更好，但不良反应也更多[9], 临床在选择克拉霉素治疗生殖道支原体感染时应引起重视，在保障疗效的同时也要重视不良反应的发生。Mh对14、15元环大环内酯类抗菌药物耐药率较高，这可能与其23S RNA V区G2057A变异相关[10]。本研究Mh感染患者的药敏试验中未发现交沙霉素耐药菌株，与临床上使用较少相关，待后续试验进一步明确。Mh长期接触低剂量喹诺酮类药物会出现耐药情况，临床在选择喹诺酮类药物治疗Mh感染的患者时应注意疗程和剂量,gyrA、parE基因中的点突变可能是导致这种耐药机制的一部分原因[11]。Uu合并Mh与Mh单独感染相同，均对喹诺酮类和14元环、15元环的大环内酯类药物具有较高的耐药率，而对16元环大环内酯类药物较敏感。本研究显示，生殖道支原体中单独Mh感染、Uu合并Mh感染患者药敏试验结果表明，多种大环内酯类抗菌药耐药率达90%以上，临床应引起重视。Uu合并Mh感染时耐药率高于单纯Uu、单纯Mh的感染，与国外报道[12]的支原体混合感染中更容易出现药物交叉耐药相符。交沙霉素、强力霉素、美满霉素近年来多地区报道[13-15]的耐药率均较低，可作为生殖道支原体感染的推荐用药。

综上所述，本研究中的生殖道支原体感染以Uu为主，感染者主要为21～40岁女性。本研究药敏试验分析结果表明，交沙霉素、强力霉素、美满霉素可作为本地区生殖道支原体感染的推荐用药。不同类型的支原体感染表现出的耐药性不同，因此临床医生在选择抗生素治疗生殖道支原体感染时应重视药物的选择，避免滥用抗生素造成菌株多重耐药现象。