基于QuEChERS结合气相色谱-质谱测定新会柑（陈皮）及其制品中8种拟除虫菊酯残留

◎ 梁伟华，张健玲，伍长春，彭晓俊

（1.新会海关综合技术服务中心，广东 江门 529100；2.江门海关技术中心，广东 江门 529100）

新会柑，学名茶枝柑，其最大特色是皮肉兼用，药食同源，已有700多年的种植历史，因其果皮有药用和食疗价值而闻名海内外[1]。新会柑干燥成熟果皮即广陈皮是我国著名的中药材，具有理气健脾、燥湿化痰、降气止呕等功效[2-3]。拟除虫菊酯农药是一类能防治多种害虫的广谱杀虫剂，具有高效、低毒、低残留和对作物安全等特点，在新会柑的种植过程中被广泛使用[4]。有文献指出[5]拟除虫菊酯类农药据有蓄积性，长期接触会引起神经毒性、生殖毒性和免疫毒性等疾病。随着新会柑（陈皮）及其制品行业发展，消费者食品安全意识的提高，农药残留及快速检测的问题愈发受到重视。因此，建立简单、快速、高效的分析方法检测新会柑（陈皮）及其制品中拟除虫菊酯残留，对于保障新会柑（陈皮）其及制品质量安全具有重大意义。

目前拟除虫菊酯残留检测的方法主要有液相色谱法[6]、液相色谱-串联质谱法[7]、气相色谱法[8]、气相色谱-质谱联用仪[9]以及气相色谱-串联质谱法[10]。其中气相色谱-质谱联用仪法具有选择性好、灵敏度高等特点，是拟除虫菊酯常用的分析方法。本文根据QuEChERS净化方法，结合气相色谱-质谱联用仪建立新会柑（陈皮）及其制品中8种拟除虫菊酯快速、准确、高效的检测方法，为新会柑（陈皮）及其制品的拟除虫菊酯农残检测提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

新会柑、陈皮、陈皮果脯以及陈皮普洱茶等实验样品，购于江门茶之柑陈皮茶业有限公司。

联苯菊酯（Bifenthrin）、甲氰菊酯（Fenpropathion）、氯氟氰菊酯（Lambda-cyhalothrin）、氯菊（Permethrin）、氯氰菊酯（Cypermethin）、氟氰戊菊酯（Flucythrinate）、氰戊菊酯（Fenvalerate）及溴氰菊酯（Tralomethrin）8种拟除虫菊酯（1 mL，100 μg·mL-1，农业部环境保护科研监测所）；正己烷、乙酸、乙酸乙酯及乙腈均为色谱纯；实验室用水均为去离子水。

1.2 仪器与设备

GCMS-QP2010 Ultra气相色谱-质谱联用仪；AOC-20si自动进样系统（日本岛津）；2-16型通用台式高速离心机（德国Sigma公司）；LAB DANCER涡旋混合器（德国IKA公司）；DN-12W氮吹仪（上海比郎公司）；BAS124S电子天平（德国Sartorius公司）；Milli-Q型超纯水系统（德国默克密理博公司）。

1.3 仪器条件

1.3.1 色谱条件

色谱柱：Shimadzu Rtx-1701（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；载气：高纯氦气（纯度大于99.999%）；进样量：1 μL；流速：1 mL·min-1；进样口温度：285 ℃；进样方式：不分留进样；升温程序：初始温度50 ℃，保持1 min；以15 ℃·min-1升到200 ℃，保持8 min；以 5 ℃·min-1升到 275 ℃，保持 12 min。

1.3.2 质谱条件

电离方式：EI；离子源温度：230 ℃；接口温度：275 ℃；电离能量：70 eV；测定方式：选择离子监测模式（Selected Ion Monitoring，SIM），质谱条件参数见表1。

表1 8种拟除虫菊酯的CAS号、保留时间及质谱参数表

1.4 样品提取

分别称取粉碎的新会柑、陈皮、陈皮普洱茶、陈皮果脯和陈皮酱试样各2.000 0 g放置于50 mL具塞塑料离心管中，加入水（陈皮、普洱茶加4 mL，其他加2 mL），用移液枪准确加入乙腈10 mL，拧好瓶盖，涡旋振荡混匀2 min，以9 000 r·min-1离心5 min。

1.5 提取液净化

用移液枪准确吸取上述提取液2 mL于QuECh ERS净化管中，涡旋振荡2 min，以9 000 r·min-1离心5 min，吸取上清液过0.22 μm有机滤膜，进气相色谱-质谱联用仪（Gas Chromatography-Mass Spectrometry，GC-MS）分析。

1.6 标准曲线的绘制

分别取1 mL的8种拟除虫菊酯标准溶液配制成20 μg·mL-1的混合标准溶液，稀释成 1 μg·mL-1，然后分 别 吸 取 10 μL、20 μL、50 μL、100 μL、500 μL 和1 000 μL，正己烷定容到1 mL，配制浓度为0.010 mg·L-1、0.020 mg·L-1、0.050 mg·L-1、0.10 mg·L-1、0.50 mg·L-1和1.0 mg·L-1的标准工作曲线。

2 结果与分析

2.1 提取溶剂的选择

根据农药的极性，在农药残留检测中，常用的提取溶剂为正己烷、丙酮、乙酸乙酯和乙腈等。本实验分别考察了上述有机溶剂作为提取液的提取效率。正己烷易于挥发；丙酮易于提取样品中的色素，易溶于水，不利于萃取净化；乙酸乙酯易于提取蜡质，不利于净化；乙腈作为提取溶剂，不容易受脂溶性杂质的影响，提取效率较理想。综合考虑，本实验选择乙腈作为提取溶剂。

2.2 提取方式的选择

在提取前，加入水有利于增加样品的浸湿，提高有机溶剂对拟除虫菊酯的提取效率。本实验分别在空白新会柑、陈皮样品的前处理过程中加水和不加水，加入10 mL乙腈，旋涡振荡提取2 min，以9 000 r·min-1离心5 min，然后吸取2 mL提取液进行净化。在8种拟除虫菊酯添加水平0.5 mg·kg-1时，不加水和加水前处理的回收率分别为81.2%～109.6%、89.4%～112.5%，结果表明加水处理对提取的效率有一定的提升。综合考虑，本实验选择前处理加水、乙腈提取。

2.3 质谱条件的选择

本实验考察在标准电压70 eV EI，离子源温度分别使用200 ℃、230 ℃。结果表明离子源230 ℃时8种拟除虫菊酯的响应更高，因此本实验选择离子源温度230 ℃；配制8拟除虫菊酯的混合标准溶液，以全扫描方式得到总离子流图见图1，确认保留时间，根据谱库对每个物质的碎片离子、丰度比进行确认，选择响应最高的离子为定量离子，选择响应次高的离子作为定性离子。

图1 8种拟除虫菊酯混合标准溶液的总离子流图

2.4 基质效应

由于新会柑、陈皮等样品富含有机酸、色素等物质，在提取阶段与目标物质共提取，在进入色谱柱后，直接影响目标物的电离，从而影响目标物的重复性和准确性。

本实验配制浓度分别为 0.02 mg·L-1、0.50 mg·L-1的基质标准溶液和纯有机试剂标准溶液，重复测定6次，考察8种拟除虫菊酯在新会柑、陈皮、陈皮果脯、陈皮普洱茶中的基质效应，基质效应（Matrix Effect，ME）计算为：

结果表明，新会柑、陈皮、陈皮果脯和柑普茶作为基质，8种拟除虫菊酯的基质效应在92.3%～106.2%，表明基质效应对定量结果影响不明显，本实验选择纯有机溶剂配制标准曲线。

2.5 线性范围与检出限

按1.6中方法绘制标准工作曲线，以质量浓度为横坐标，对面物质的定量离子峰面积为纵坐标，考察8种拟除虫菊酯的线性关系。结果表明，8种拟除虫菊酯的线性关系良好，R2均大于0.998 5，以3倍信噪比（S/N）计算方法的检出限，见表2。

表2 8种拟除虫菊酯的线性参数和检出限表

2.6 回收率与精密度

选择空白新会柑、陈皮、陈皮普洱茶样品分别添加浓度水平为 0.010 mg·kg-1、0.050 mg·kg-1、0.100 mg·kg-1的混合标准溶液进行回收率实验，每个设置6个平行样品。由表3可知，8种拟除虫菊酯的回标回收率为88.4%～110.8%，相对标准偏差在3.6%～8.9%，表明该方法准确度高、稳定性好，能够满足检测要求。

表3 8种拟除虫菊酯的加标回收率和相对标准偏差表（n=6）

2.7 样品分析

按上述实验方法对新会柑、陈皮、陈皮普洱茶、陈皮果脯和陈皮酱等100批次样品进行检测，其中有2份陈皮普洱茶的联苯菊酯有检出，其余样品均未检出拟除虫菊酯，根据国家食品中农药最大残留限量，检出的联苯菊酯未有超过限量值。

3 结论

本文针对新会柑、陈皮、陈皮普洱茶、陈皮果脯和陈皮酱等基质特点，以乙腈作为提取溶剂，经QuEChERS净化，采用气相色谱-质谱联用仪法建立新会柑（陈皮）及其制品中8种拟除虫菊酯的定性定量分析方法，该法操作简单、快速高效，能够为新会柑（陈皮）及其制品的拟除虫菊酯农残检测提供参考。