583株无乳链球菌的感染分布及药敏分析

陈 庆 程 烽 邱华红

福建省妇幼保健院检验科，福建福州 350001

无乳链球菌（Streptococcus agalactiae，GBS）是一种革兰氏阳性链球菌，目前研究证实[1]，GBS 是造成新生儿感染的主要致病菌，同时也可引发老年群体、围产期孕妇等免疫功能低下人群的侵袭性感染。相关研究证实[2]，GBS 感染可导致孕妇出现早产、胎膜早破等不良妊娠结局。在GBS 感染干预方面，目前仍以抗生素为主，但近年来由于耐药菌株出现的增加，使GBS 感染人群治疗效果受到一定影响。充分了解GBS 感染情况，明确其耐药性，对于指导临床合理用药，改善患者预后具有重要意义。本研究以此为切入点，对福建省妇幼保健院GBS 阳性标本进行分析，同时分析GBS 对常见抗菌药的药敏试验，旨在为临床提供参考。

1 资料与方法

1.1 菌株来源

584 株无乳链球菌均来自福建省妇幼保健院2019年1月1日至2020年12月31日住院各科室送检的生殖道分泌物、血液、脐部、脑脊液、脓液、尿液等标本。

1.2 培养基及培养方法

哥伦比亚血培养基购于贝瑞特生物技术（郑州）有限责任公司。按《全国临床检验操作规程》（第4 版）[3]进行培养分离。

1.3 细菌鉴定及药敏

采用法国梅里埃公司VITEK2 全自动细菌鉴定药敏分析系统作鉴定和药敏试验，药敏结果按美国临床和实验室标准协会（Clinical Laboratory Standards Institute，CLSI）标准判定。质控标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC29213，购自卫建委临床检验中心。

1.4 D 试验

对红霉素耐药而克林霉素中介或敏感的GBS，采用纸片扩散法（K-B）法进行D 试验。将细菌按标准纸片扩散法接种，贴上15 μg 红霉素（英国Oxoid 公司，生产批号：3312034）和2 μg 克林霉素（英国Oxoid 公司，生产批号：2972599）纸片贴于相邻位置，纸片间距12 mm，经5%CO2在35℃下孵育18～24 h 后，结果显示邻近红霉素纸片侧克林霉素出现似字母D 的抑菌环，则提示存在可诱导的克林霉素耐药，判定为D 试验阳性。

1.5 观察指标

①分析GBS 菌株来源情况，对各菌株的获取部位进行统计，计算构成比。②分析GBS 菌株科室分布情况，对各菌株报告科室进行统计。③分析GBS 的药敏试验和D 试验检测结果，计算GBS 对不同抗菌药的敏感率、耐药率、中介率，药物敏感性、耐药性、中介由专人根据CLSI 标准判定[4]。

2 结果

2.1 标本来源部位分布情况

583 株GBS 标本来源分布以生殖道分泌物和血液为主，各占83.7%和8.1%（表1）。

表1 583 株GBS 的标本来源分布及构成比（%）

2.2 标本的科室分布情况

583 株GBS 标本主要分布于产科病区，妇科病区和新生儿科，分别占65.7%，19.2%、12.2%（表2）。

表2 GBS 的科室分布及构成比

2.3 GBS 的药敏试验和D 试验检测结果

分离出的583 株GBS 标本对万古霉素、青霉素G、利奈唑胺、替加环素、奎奴普汀/达福普汀及氨苄西林6 种抗菌药的敏感率为100.0%，无中介或耐药现象；对左氧氟沙星、莫西沙星、红霉素、克林霉素、四环素的耐药率分别为28.0%、27.4%、58.3%、49.1%、75.6%（表3）。583 株GBS 中有116 株对克林霉素中介或敏感而对红霉素耐药，进一步对这116 株菌进行D 试验后发现共有31 株阳性，阳性率为26.7%，提示克林霉素诱导耐药，报告修正为克林霉素“耐药”。

3 讨论

随着微生物组学研究的不断深入，目前研究证实[5]，人体中微生物的种类及数量会随着饮食、体重、激素及多种因素的变化而改变。相关研究显示[6]，在疾病情况下由于激素水平、体重及免疫系统的改变，人体微环境随之改变，导致机体中定植的微生物比例发生变化，优势菌群可能出现改变，出现GBS 的定植，对于孕妇而言，阴道优势菌群的改变可对新生儿及孕妇的健康构成严重威胁。

本研究结果显示，583 例GBS 阳性标本来源分布以生殖道分泌物为最高，其次为血液。科室分布以产科为最高，其次为妇科和新生儿科。而其中血液、脐分泌物、脑脊液、脓液、结膜的标本约90%来源于新生儿科。女性生殖道分泌物GBS 阳性占临床GBS 阳性比例较大，产科是临床GBS 感染高危科室，考虑与女性特殊生殖结构有关。微生物学研究显示，GBS 菌株含有丰富的磷酸酯酶，可对细胞膜表面的磷脂酶产生破坏作用，导致细胞膜裂解，引发局部炎症反应，在炎症因子作用下最终可导致胎膜早破[7]。相关研究表明，GBS 菌株还可上行进入子宫腔，引发宫内感染，造成胎儿发育异常及早产，严重者甚至引发胎儿窘迫[8]。在分娩过程中GBS 还会通过新生儿口咽部进入呼吸道，引发新生儿肺炎、脑膜炎、新生儿脓毒症等，对母婴结局产生严重不良影响[9]。

本研究对583 株GBS 病原体进行药敏试验，结果显示GBS 对青霉素、氨苄青霉素、替加环素、奎奴普汀/达福普汀、利奈唑胺、万古霉素均无耐药，敏感率为100%。对左氧氟沙星、莫西沙星、红霉素、克林霉素、四环素耐药率分别为28.0%、27.4%、58.3%、49.1%、75.6%。为了预防和减少GBS 定植对母亲和新生儿的危害，欧美一些发达国家非常重视对孕妇孕晚期GBS 的筛查，美国疾病控制中心于2010年更新修订了《围产期B 族链球菌感染筛查及防治指南》[10]，指南中指出，在产程开始或胎膜破裂时开始给予抗生素治疗，首选青霉素G，备选氨苄西林，无需进行药敏试验，如果低风险青霉素过敏可选用头孢唑啉作为替代药物。若高风险青霉素过敏，则需要报告红霉素与克林霉素药敏结果。对红霉素、克林霉素均敏感或克林霉素敏感但红霉素耐药者行诱导试验阴性者可用克林霉素。对克林霉素耐药、红霉素耐药或诱导实验阳性者选用万古霉素，不再建议使用红霉素治疗[11]。

左氧氟沙星和莫西沙星属于喹诺酮类抗生素，对胎儿软骨有损害，不建议使用[12]。而四环素的耐药率高达75.6%，并且会引起四环素牙，影响美观，不推荐使用[13]。此外如奎奴普汀/达福普汀、利奈唑胺、替加环素临床应用也需谨慎[14]。对GBS 携菌孕妇在临产时或胎膜早破时进行敏感抗生素预防性治疗可使新生儿GBS 败血症的发病率降低，改善妊娠结局[15-17]。

综上所述，对妊娠晚期孕妇进行GBS 筛查，对阳性患者进行积极有效的干预治疗，可有效降低孕妇的感染率，避免早产、宫内感染等产前不良事件的发生。