西洋参叶山楂叶有效部位组合物活血化瘀作用的实验研究

陈 岩，袁 晨，刘 宁，纪凤兰，丁 涛，温富春，徐惠波

(吉林省中医药科学院·吉林 长春 130021)

血瘀证是中医临床常见证候，与冠心病、心绞痛，动脉粥样硬化等多种疾病具有相关性[1-3]，中医的治疗原则多为活血化瘀[4]。XS组合物是由西洋参茎叶与山楂叶有效部位经科学配比组合而成，具有补气养阴、行气散瘀之功，可用于治疗胸痹(气阴两虚证冠心病)。本研究通过观察XS组合物对以皮下注射肾上腺素及冰浴刺激致大鼠急性血瘀模型血液流变学指标变化和正常大鼠血小板聚集率变化的影响，证实其活血化瘀作用，为XS组合物临床应用的有效性和新药开发提供理论研究依据。

1 实验材料

1.1 实验动物 Wistar大鼠，雄性，5～6周龄，SPF级，体质量(200±10)g，购自长春亿斯实验动物技术有限公司，合格证：SCXK(吉) 2011-004。SD大鼠，5～6周龄，SPF级，雄性，体质量(212±12)g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司。许可证号：SCXK(京)2009-0004。动物饲养在本单位屏障环境动物观察室，温度21～25 ℃，相对湿度40%～60%。

1.2 药物与试剂 XS组合物(西洋参茎叶提取物∶山楂叶提取物=1∶1.1)：吉林省中医药科学院新药研究与开发中心剂型室提供，批号：20160101；益心酮分散片，海南天煌制药有限公司生产，批号：1608211。盐酸肾上腺素注射液(Adr)：天津金耀氨基酸有限公司，批号：1003121；二水合柠檬酸三钠(柠檬酸钠、又称枸橼酸钠)：南京化学试剂有限公司，批号：050580052；水合氯醛：国药集团化学试剂有限公司，批号：20100709；ADP：大连美仑生物技术有限公司，批号：091M70002V；肝素钠：北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司，批号：151809086A。

1.3 主要仪器 BT255型十万分之一电子天平：北京赛多利斯科学仪器有限公司；JJ2000型电子天平：常熟市双杰测试仪器厂；FASCO-3010全自动血流变快测仪：重庆大学为多生物工程研究所；DT5-3型低速台式自动平衡离心机：北京时代北利离心机有限公司；LBY-NJ血液凝聚仪：北京普利生精密仪器研究中心。

2 方法

2.1 急性血瘀模型大鼠血液流变学指标的测定 取Wistar大鼠60只，适应饲养3 d后按体质量随机分为6 组：正常对照组10只，血瘀模型组10只，阳性对照药益心酮片(96 mg/kg)组10只，XS组合物(58.8、29.4、14.7 mg/kg) 高、中、低3个剂量给药组每组10只。每天给药1次，灌胃剂量为10 mL/kg，实验过程中正常对照组及血瘀模型组给予等量的蒸馏水，各给药组均给予供试药液，连续给药7 d。给药第7 d，除正常对照组大鼠皮下注射等体积生理盐水外，其余各组大鼠皮下注射Adr0.08 mL/100 g体质量，2 h后将大鼠置于1.5 ℃冰水中游泳4 min，捞出后2 h再注射Adr0.08 mL/100 g体质量1 次，制备大鼠急性血瘀证模型[5]。大鼠第2次注射肾上腺素后，将大鼠禁食不禁水12 h，次日，大鼠灌胃给药1 h后，大鼠腹腔注射水合氯醛(300 mg/kg)将其麻醉，进行大鼠腹主动脉取血5 mL，缓慢注入肝素抗凝管中(血液与抗凝剂体积比为9∶1)混匀(每组前10只动物取血)。将肝素钠抗凝管中的血液先取出适量测定血沉和红细胞压积。剩余血液用FASCO-3010全自动血流变快测仪测定大鼠全血黏度的高切(200/s)、中切(30/s)及低切(3/s)值；然后将全血3 000 r/min离心10 min，取出贫血小板血浆测定血浆黏度。

2.2 正常大鼠血小板聚集率的测定 取SD大鼠55 只随机分为5 组，空白对照组，益心酮分散片(96 mg/kg)给药组，XS组合物(58.8、29.4、14.7 mg/kg)高、中、低3 个剂量给药组，每组11 只，各组大鼠每天灌胃给药1次，连续7 d，空白对照组给予同体积(10 mL/kg)蒸馏水。末次灌胃给药1 h后，于腹腔注射水合氯醛300 mg/kg麻醉大鼠，腹主动脉采血4.5 mL，缓慢注入装有3.8%枸橼酸钠溶液0.5 mL的试管中(血液与抗凝剂体积比为9∶1)，混匀，离心，1 000 r/min，分离PRP血小板血浆和3 000 r/min，分离PPP血小板血浆，按文献[6]方法用血液凝聚仪测定ADP(每份样本加ADP7μL)诱导血小板1、3、5 min聚集率及最大聚集率。

3 结果

3.1 XS组合物对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响 见表1。

表1 各组大鼠血液流变学指标的比较

3.2 XS组合物对大鼠血小板聚集率的影响 见表2。

表2 各组大鼠血小板聚集率比较

4 讨论

急性血瘀证是中医临床中常见的基本证候之一，是心、脑血管疾病发生、发展的病理生理基础，而血瘀证的重要诊断指标有血液流变性、血小板聚集功能的改变等[7]。冠心病气虚血瘀证一直是中医领域研究的热点，中医学认为气虚血瘀是冠心病的主要病机，气虚则无力推动血液运行，血液凝滞成瘀，阻于心脉，则会产生心前区憋闷疼痛[8]。XS组合物是由西洋参叶提取物与山楂叶提取物根据均匀设计原理经计算机计算配比比例后组合而成[9]，方中选用西洋参茎叶提取物，取其补心气、益脾气之功；选用山楂叶提取物取其行气散瘀之力，两药合用可使心血得以滋养、脾气得以健运、肝气得以疏泄，共奏补气养阴、行气散瘀之功。气行则血行，心脉通畅，心血充足，机体功能得以恢复。现代医学研究证明西洋参有抗氧化、抗心肌缺血、增加心肌收缩力等作用[10-12]；山楂有活血化瘀、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、保护心肌缺氧的功能[13-17]。为此，西洋参叶与山楂叶有效部位组合，可用于治疗胸痹(气阴两虚证冠心病)。本实验目的是探讨XS组合物预防治疗冠心病心绞痛的机制，并针对其补气养阴、行气散瘀的功能选用了血瘀模型。实验结果显示该药可明显改善急性血瘀大鼠血液流变学指标，明显降低全血黏度，降低红细胞压积和血沉值，还能降低正常大鼠的血小板1、3、5 min的聚集率及最大聚集率。提示XS组合物能改善血瘀大鼠异常的血液流变学指标，抑制血小板聚集；具有活血化瘀作用，可用于防治胸痹，还有可能通过该作用防治其他心、脑血管疾病。