薄层液基细胞学与DNA定量分析联合检测对肺癌的诊断价值

李启生

(微山县人民医院 山东 济宁 277600)

肺癌是一种呼吸系统常见疾病，发病率和致死率均较高，是威胁患者生命安全的主要恶性肿瘤。因此，及早发现、诊断和明确患者病理类型，对肺癌患者治疗效果提升和预后改善具有重要意义。薄层液基细胞学(TCT)是临床筛查肺癌等疾病的重要方法，具有操作简便，准确度及特异度高等优势，且给患者造成的创伤小，属于微创检测，但是容易出现漏诊或误诊等情况[1]。液基细胞学检查通常应用于宫颈癌等疾病筛查，现在该方法在细胞学诊断中也应用广泛。DNA定量分析技术是一种新型的DNA含量测量技术，主要利用基因水平快速测量和自动分析细胞内DNA含量，也是诊断肺癌的重要手段，为了解这两种检测方式联合应用于肺癌诊断的临床效果，本文对其研究如下：

1 资料与方法

1.1一般资料

纳入2016年1月～2021年1月期间在我院接受治疗的疑似肺癌患者130例，纳入标准：(1)所有患者经胸部CT检查发现肺部存在阴影；(2)存在咳痰、咳血等临床症状，临床判断为疑似肺癌；(3)自愿参与研究并签署同意书。排除标准：(1)近期服用抗生素治疗者；(2)合并周围神经病变；(3)合并心血管疾病；(4)合并恶性肿瘤；(5)肝肾等脏器功能不全或不配合者。其中男性76例，女性54例，年龄31～82岁，平均年龄(52.96±4.72)岁。病理检查确诊为阳性80例，阴性50例。

1.2方法

本研究所有患者均采集晨起痰液标本，对其进行TCT和DNA定量分析，(1)TCT检测：采集痰液标本，将其保存于新柏液基细胞保存瓶中，静置半小时后使用黏液消解剂对痰黏液进行消除，然后使用美国豪洛捷医疗公司生产的膜式TCT制片机进行薄层细胞学片制作，实施HE染色后，对其实施TCT检测。(2)DNA定量分析：称取0.9g的二硫苏糖醇(DTT)固体粉末，将其加入到100毫升50%乙醇中，充分搅拌后配置成DTT溶解液，将其密封保存于4℃条件下。取适量痰液标本， 加入20ml的清洗液和和2～3滴DTT溶解液，振荡10分钟以促进黏液消化，操作完成后将痰液标本转移至含有细胞保存液的试管中，以每分钟2500转的速度对标本进行离心处理，去除上清液后，若细胞层仍肉眼可见黏液或血可重复上述步骤，留下离心管尖底部细胞，转移至细胞分散液中，将其制作成两张薄层细胞片，经HE染色、Feulgen染色等处理后，应用DNA定量分析系统进行DNA倍体定量分析。

1.3观察指标

由经验丰富的病理科医生进行TCT镜下阅片与诊断。(1)TCT检查根据痰细胞学诊断结果分为正常、异型、可疑恶性和恶性肿瘤，其中前两者纳入为阴性，后两者确定为阳性。(2)DNA阴性：正常细胞的DNA指数(DI)为1；可疑恶性：有1～2个DI≥2.5的DNA倍体异常细胞；恶性：3个及以上DI≥2.5的DNA倍体异常细胞及出现异倍体峰。分析比较两种检查方法对肺癌患者的组织学类型检出结果，并分析TCT与DNA定量单独应用和联合应用对肺癌的诊断效能。

1.4统计学方法

2 结果

2.1 TCT检查对肺癌组织学类型的诊断结果

本研究130例经病理检查确诊为阳性80例，阴性50例，通过对其病理组织类型进行分析发现，TCT检查对鳞癌的诊断准确率为66.67%，对腺癌的诊断准确率为63.16%，对小细胞癌诊断准确率53.85%，对大细胞癌和类癌的诊断准确率分别为42.86%和56.25%。详见下表1。

表1 TCT检查对肺癌组织学类型的诊断结果

2.2 DNA定量分析对肺癌组织学类型的诊断结果

DNA定量分析检出正常21例，可疑恶性22例，恶性37例，其中鳞癌诊断准确率86.67%，腺癌准确率78.95%，小细胞癌、大细胞癌准确率分别为65.38%和71.42%，类癌准确率50.00%。见表2。

表2 DNA定量分析对肺癌组织学类型的诊断结果

2.3 TCT与DNA定量分析对肺癌的诊断效能

通过对130例患者的检查结果进行分析发现，TCT单独检测真阳性45例，真阴性42例，DNA定量分析单独应用的真阳性与真阴性数分别为59例和44例，而将两者联合应用后的真阳性和真阴性检出数量均显著增加。见表3。

表3 TCT与DNA定量分析单独与联合应用诊断效能

TCT与DNA定量分析联合对肺癌的诊断灵敏度为92.50%，准确度为93.08%，阴性预测值88.68%，与单独TCT和单独DNA定量分析检测结果比较，具有统计学差异(P<0.05)。见表4。

表4 不同检查方法的诊断效能比较

3 讨论

肺癌属于临床常见病，对于该疾病的具体发病机制目前尚无定论，分析其可能与遗传、职业、空气污染以及饮食等因素相关，患者临床主要表现为咳嗽、呼吸困难以及胸痛等症状，影响患者的生活质量，若治疗不及时容易导致上腔静脉阻塞综合征、骨转移等情况出现，威胁患者生命安全[2]。由于该病早期临床症状无特异性，部分患者确诊时已达到中晚期，治疗难度加大，具有较高死亡率。因此，及早发现和明确肺癌疾病性质，才能制定针对性治疗方案，从而提升患者疗效。常规细胞学检验在肺癌诊断中特异性较高，是临床常用于诊断肺癌的检验方法之一，但该方法检验过程中极易受到多种因素的影响，导致其敏感性下降，一定程度上影响了诊断准确性。薄层液基细胞学是一种新兴的细胞制片技术，常用于妇科肿瘤的早期筛查诊断，但近几年该方法也逐渐应用于肺癌诊断中。

TCT检测具有操作简单、制片规范及制片效果好等特点，患者比较容易接受，且自带标本制备和自动制片系统，不仅能大批量处理标本，提高普查效率，还能改变传统检验中细胞形态改变、涂片太厚或背景污秽等问题，有助于进一步提高细胞学诊断准确性[3]。TCT检测可在标本取出后直接将其浸入细胞保存液中，一方面可保留取样器中的完整标本，避免有价值标本细胞死亡；另一方面也能避免普通标本制作时出现细胞过度干燥的情况，最大限度保护了细胞原有形态。TCT还能减少细菌涂抹面积，缩短临床阅片时间，进而达到提高工作效率的目的，一定程度上避免过度疲劳而出现假阳性[4]。但是TCT检查也存在一定不足，该方法主要根据细胞形态变化对病情做出病情，在痰标本中脱落癌细胞较少和细胞形态结构不典型的情况下，可影响诊断结果的准确性，容易导致疾病漏诊或误诊。

DNA定量分析是对细胞DNA实施特异染色，然后应用全自动扫描系统对玻片上细胞核进行扫描，然后根据细胞核内DNA参数进行自动分类和技术，结合细胞DI判定检测结果。采用该方法进行检测，能够使细胞学检查从传统的单一形态学检查，进一步上升至分子水平的定量分析，能够及早发现细胞内DNA含量的微小变化，从而及早预测患者癌症风险。有研究报道，DNA定量分析通过利用自动扫描系统对各细胞的细胞核进行识别，能够快速识别出标本中的癌变细胞，且能够更为客观地体现形态学特征，具有较TCT检查更高的阳性检出率，能够为临床疾病诊断与治疗提供指导[5]。目前DNA定量分析已经在各类良恶性肿瘤的鉴别诊断中应用广泛，如甲状腺肿瘤、子宫颈癌、乳腺癌等疾病诊断中均可应用该方法，但关于该方法在肺癌诊断中的应用报道相对较少。本研究显示，不论是TCT和DNA定量分析均可较好地判断患者的病理组织类型，且TCT检查与DNA定量分析联合诊断的灵敏度、准确度、阴性预测值分别达到了92.50%、93.08%、88.68%，优于单独TCT和DNA定量分析结果，说明将这两种方法充分结合可显著提升临床对肺癌的诊断效果。

总而言之，在采集痰液标本进行肺癌诊断时，采用TCT联合DNA定量分析能够充分发挥这两种检查方法的优势，减少人为干扰等因素的影响，确保检测结果更为客观和准确，具有较高的灵敏度和准确度，能够为临床肺癌诊断及预后评估提供重要依据。