多囊蛋白和纤维囊蛋白在肺癌组织中的定位分布

赖 群，杨慧欣，郝书弘，胡春梅，居欣月，唐 艳*

(吉林大学第二医院 1.肿瘤血液科；2.乳腺外科，吉林 长春130041)

多囊蛋白-1(PC1)是一种受体样膜蛋白，含有4302个氨基酸(aa)，一个大的细胞外N末端，11个跨膜结构域和一个细胞内C末端;多囊蛋白-2(PC2)是一种由968 个aa组成的阳离子通道，含六个跨膜结构和细胞内N-和C-末端，并能与PC1形成通道复合体和流量传感器[1]。常染色体隐性多囊肾病(ARPKD)是由多囊肾肝病1(PKHD1)基因突变引起的，PKHD1编码纤维囊蛋白(fibrocystin)，它也是一种大蛋白(4074 aa)，具有一个长的细胞外N-末端、一个跨膜结构域和一个细胞质C-末端[2]。除了肾，多囊蛋白在其他非肾脏组织也广泛表达[3],Hu等在大鼠细支气管纤毛中也检测到多囊蛋白和纤维囊蛋白表达[4]。本文探讨PC1、PC2和fibrocystin在正常肺组织、肺癌组织中的定位分布，报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料在知情同意的原则下，本实验所采用的肺癌(腺癌)及癌旁肺组织石蜡包埋标本从吉林大学第二医院病理科获得并经病理诊断证实。

1.2 方法羊抗PC1(SC-130554)、羊抗PC2(SC-10377)均购自Santa Cruz Biotechnology公司；Fibrocytin单克隆抗体来自Xing-Zhen Chen实验室保存[4]；二抗系Chemicon International公司产品。ABC免疫组化检测试剂盒购自Vector Laboratories，对二甲胺基偶氮苯(DAB)显色试剂、苏木素等均为Abcam公司产品。采用免疫组织化学ABC法，按试剂盒说明书指导步骤进行操作。

2 结果

2.1 PC1、PC2、fibrocystin蛋白在癌旁正常肺组织的表达

通过对癌旁支气管上皮组织中PC1、PC2、fibrocystin蛋白免疫组化染色检查，结果显示：PC1在支气管浅层上皮细胞的游离面(腔面)着色呈深染，伴胞浆少量着色，提示PC1主要表达于支气管表浅上皮的游离面胞膜。PC2主要着色于支气管浅层上皮细胞的胞浆，提示PC2主要表达于支气管浅层上皮的胞质。Fibrocystin蛋白在支气管浅层上皮细胞的游离面或纤毛侧呈深染，且在基底面和侧面也有表达，并伴胞浆着色，表明它在胞膜及胞质均有表达(图1)。

图1 癌旁支气管上皮组织中多囊蛋白和fibrocystin蛋白的表达定位(×400)

2.2 PC1、PC2、fibrocystin蛋白在肺癌的表达

在肺癌组织，PC1、PC2、fibrocystin蛋白免疫组化染色结果显示：PC1在肺癌细胞的胞膜及胞浆均着色，胞膜呈深染，提示PC1主要表达于肺癌细胞的胞膜。PC2主要着色于肺癌细胞的胞浆，少量胞膜着色且色浅，提示PC2主要表达于肺癌细胞的胞质。Fibrocystin蛋白在胞膜及胞浆均着色，提示它在肺癌细胞胞膜和胞质均存在(图2)。

图2 肺癌组织中多囊蛋白和fibrocystin蛋白的表达定位(×400)

3 讨论

到目前为止，对多囊蛋白PC1、PC2和fibrocytin的研究主要是在多囊肾病(PKD)的背景下进行的。Guillaume等发现在胎儿和刚出生阶段，PC1在肺中的表达高于肾；而成人阶段在肺中的表达低于肾[5]。PC1、PC2和fibrocystin都定位于肾上皮的初级纤毛，而PC1定位于细胞膜(质膜)，PC2则位于内质网膜，fibrocystin定位肾初级纤毛的基底体、质膜和细胞质中[6]。三种囊蛋白在大鼠支气管纤毛表达，存在于支气管管腔侧上皮，即运动纤毛细胞，PC1在细胞膜上表达，PC2定位于静息细胞的内质网(胞质)，而有丝分裂细胞的纺锤体和中间体上均可检测到多囊蛋白，并且fibrocystin在整个细胞周期的中心体上均有表达[4]。本研究结果显示：在成人肺支气管上皮浅层细胞，PC1主要位于游离面胞膜，PC2主要胞质表达，fibrocystin既表达于游离面胞膜，又在基底面和胞浆等表达。

Gargalionis等描述了结直肠腺癌及癌旁组织的多囊蛋白定位特点：在正常肠黏膜上皮，PC1主要表达在表皮细胞，而在癌细胞则主要是胞浆着色；PC2在浅层和隐匿的正常上皮细胞和肿瘤细胞中仅为胞质表达[7]。本研究在肺癌旁组织支气管上皮的结果与上述正常肠黏膜上皮的表达相似，组织标本来自肺腺癌，肺癌组织定位结果显示PC1为胞膜和胞浆表达，PC2主要胞浆着色，也与上述结直肠腺癌组织的结果基本符合。在肺癌组织中，PC1、PC2和fibrocystin均阳性表达，且明显大于其在正常组织的着色强度和着色范围，考虑可能与这些多囊蛋白参与肿瘤形成机制相关[7]。