南充地区牛病毒性腹泻病的分子流行病学调查及防控措施

王怀禹，刘强，李彩虹，龙冬梅，魏玲

摘要：为了解四川南充地区养殖场牛病毒性腹泻病的感染情况，通过随机采集来自8个县（市、区）的不同规模养殖场、不同用途、不同饲养方式等牛的血清共计1，000份，进行牛病毒性腹泻抗体水平检测。结果显示，牛血清抗体平均阳性率为18.53%，证实南充地区调查牛场牛群普遍存在牛病毒性腹泻病感染。由此初步了解了本地区牛病毒性腹泻病感染和流行病学特点，为该病防控提供理论依据，逐步实现该疫病净化的目的。

关键词：牛病毒性腹泻;分子流行病学;调查;防控措施

牛病毒性腹泻病（bovine viral diamhe，BVD）是牛场一种最为常见的传染病，临床上该病病原是牛病毒性腹泻病毒（bovine viral diamhe virus，BVDV），BVDV能够感染牛羊、猪、骆驼、鹿等多种动物，但临床上牛最为易感[1]。BVDV属黄病毒科瘟病毒属，可进行母婴传播等垂直传播，也可进行水平传播如飞沫传播等，牛感染后多为隐性感染，主要表现为犊牛腹泻、急慢性膜病、母畜流产、产死胎或畸形胎等[2]。临床上该病常持续感染和混合感染，引发机体免疫耐受、免疫抑制，给养殖业带来严重危害。当前BVD在全世界尤其是畜牧业相对发达地区广泛流行及传播，是危害全球养牛业的重大经济性疾病和免疫抑制性疾病。BVD被世界卫生组织定为B类传染病，我国在进出口检疫中将其定为二类传染病[3]。我国自1980年首次分离出BVDV以来，该病在我国养殖场普遍存在，并且阳性率逐渐呈递增趋势。根据已报道的BVDV流行病学调查发现，新疆北疆部分集约化奶牛场、福建省部分规模牛场、黑龙江省部分奶牛场等20多个省市自治区牛群存在BVDV感染，且感染率居高不下，研究发现BVDV可通过持续感染的胎牛进而造成永久性传播，BVD是危害牛群健康的重要传染病之一，严重制约着养牛业的健康发展[4]。本研究基于牛病毒性腹泻病的流行现状和危害，且BDV流行病学调查西南区域研究极少的现状，通过检测当地部分养牛场部分牛群血清样本，分析BVDV的感染情况，初步了解南充地区牛BVD的流行情况和流行病学特点。根据检验结果，建议相关养殖场采取及时淘汰阳性感染的牛只，同时加强免疫保护牛群，降低感染风险，有助于在当地控制及净化牛病毒性腹泻病。

1材料与方法

1.1材料

1）被检血清来源

2020—2021年，通过尾静脉采血随机采集到四川省南充地区8县（市、区）牛血液样本共计1，000份，分离血清后待用。采集血清样本中，规模养殖场血清份数一共700份，分别来源于高坪区、顺庆区、营山县、蓬安县、阆中市及南部县各100份，西充县50份，仪陇县50份;散养户牛血清数共计300份，分别来源于高坪区、顺庆区、营山县、蓬安县、阆中市及南部县各40份，西充县30份，仪陇县30份。

2）检测试剂

牛病毒性腹泻病毒抗体（BVDV-Ab）检测试剂盒由北京爱德士元享生物科技有限公司研发生产。

1.2 方法

1）血清分离

采集的牛血用小型离心机 5，000 r/min 离心10 min，逐一收集血清并认真编号，明确样品来源信息，4℃保存待用。

2）试剂盒检验

操作和结果判定均按照试剂盒说明书进行，牛病毒性腹泻抗体检测实验原理为酶联免疫方法。

2 结果与分析

2.1不同地域牛血清样品中BVDV抗体检测结果

對1，000份牛血清样品进行了牛病毒性腹泻抗体检测，发现8个县区抗体阳性率有所差异，详见表1。由表1可见8个县区样品均有不同程度的BVDV感染情况，所采集群体阳性率为100%，其中嘉陵区阳性率31.4%最高，阆中市阳性率7.1%最低。

2.2 不同来源牛血清样品中BVDV抗体检测结果

1，000份牛血清样品中，规模养殖场血清共700份，散养户牛血清共计300份，通过检测发现，规模化养牛场和散养户BVDV抗体阳性率也有所不同，详见表2。由表2可见无论是规模化养殖场还是散养户都应加强BVDV的防控和净化工作，总体来看规模化养殖场血清抗体阳性率11.3%，显著低于散养户平均阳性率35.3%（P<0.01），规模化养殖场在BVDV防控工作做得要强于散养户。

2.3 不同用途牛血清样品中BVDV抗体检测结果

1，000份牛血清样品中，包括奶牛500份，肉牛300份，种牛200份，经检测乳用牛、肉用牛和种用牛BVDV抗体阳性率差别也较大，详见表3。由表3可知，乳用牛和肉用牛BVDV抗体阳性率差异不显著（P>0.05）。但两者与种用牛BVDV抗体阳性率差异显著（P<0.01）。种用牛BVDV净化水平更好。

2.4 不同饲养方式下牛血清样品中BVDV抗体检测结果

将采集的牛血清按照饲养方式的不同进行分类，舍饲、半舍饲及放牧三种饲养方式抗体阳性率差别较大，详见表4。由表可见放牧饲养牛群的抗体阳性率最低为6.5%，舍饲和半舍饲牛血清BVDV抗体阳性率差异不显著（P>0.05）。

3 讨论与小结

牛病毒性腹泻病是威胁全球畜牧业的危害巨大的重要疫病之一，每年因BVD的流行造成了严重的经济损失，极大阻碍了养牛业的快速健康发展。当前我国规模化牛养殖业的迅速发展，规模化养殖水平不断提高，尤其是四川地区作为传统的重要牛养殖基地，及时了解、掌握当地BVDV的流行情况非常必要。本研究采集四川南充地区8个县（市、区） 1，000份牛血清样品，应用牛病毒性腹泻病抗体检测试剂盒对血清样品进行了BVDV的抗体检测，由此获得了不同地域、不同来源、不同用途及不同饲养方式下牛BVDV抗体阳性率，实验数据显示调查牛群中BVDV感染情况普遍存在，整体阳性率略低于其他地区研究报告值。相关养殖单位应通过加强管理进行科学防范，逐步降低牛场感染率。感染率相对较低的单位及时淘汰清除阳性牛，能够达到快速净化的目的;感染率相对较高的单位应制定科学有效的免疫程序，加强日常饲养管理，隔离饲养治疗阳性牛，并逐渐淘汰年龄大、难治愈的持续感染牛;有条件的牛场，可在日常定期进行BVDV抗体抗原监测，及时了解牛群的感染情况，并根据监测结果及时调整养殖策略。研究结果也揭示了BVD在南充地区的流行现状，为当地BVD的防控提供了实验依据，为后续病原分离鉴定及生物特性学分析打下详实基础。

BVDV可进行垂直方向和水平方向多途径传播，同时还具有跨越物种传播能力，牛病毒性腹泻病不仅可导致牛群的繁殖和生产性能下降，还可以通过混合感染其他牛呼吸道疾病或消化道疾病，一旦牛感染BVDV后，会在机体内经过一段短暂的潜伏期，就可能发展成病毒血症，随后BVDV就会随着感染牛的分泌物如唾液、精液、乳汁等排出体外散毒，使得BVD的防控与净化难度逐渐增大。BVDV感染普遍存在的原因，主要与日常饲养中管理措施不当有很大关系，如牛场日常监测不及时，卫生清理不彻底、病牛不及时隔离及直肠检查或疫苗免疫等未严格消毒操作等为BVDV的流行埋下了隐患[5]。

BVDV在我国养殖业中的流行未得到有效控制，总体流行范围与感染数量呈现上升趋势。近年来我国牛场均普遍存在BVDV感染，陈锐等[6]调查发现我国西部地区规模化牛场BVDV阳性率高达84.1 %，其中乳用牛阳性率更是高达85.4 %，肉用牛和种用牛阳性率分别为47.7 %和48.6 %;我国东部省市牛场BVDV抗体阳性率约为77.8%[7]。目前商品化BVDV疫苗尚未研发应用，临床上也没有有效的治疗方法。BVD对养牛业的危害巨大，牛感染后会出现腹泻、黏膜糜烂坏死、白细胞数下降等临床症状，大大降低了牛的生产性能。种用牛感染BVDV后，冻精、胚胎等生物制品会被BVDV污染，该带毒的生制品会通过配种或胚胎移植，引起该病的水平传播。牛病毒性腹泻病被认为是“犊牛杀手”，就是因为犊牛发病后具有极高的发病率和死亡率，该病也是临床上导致犊牛死亡的主要原因。由此可见BVDV感染后对犊牛、育肥、产奶性能及繁殖性能有着重要的影响，进而增加经济损失。同时BVDV也为畜禽共患病或人畜共患病，患病牛或隐性感染牛向环境中释放病毒，对其他畜禽的养殖和疫病防控、畜牧从业者的生命健康、肉乳制品、公共飲水等公共卫生环境安全存在潜在的威胁。当前BVDV基因多样性也是比较突出的问题，某一地区甚至同一牛场牛群中流行着多种BVDV亚型，使得BVDV防控和净化难度增大。因此，养牛场开展BVD净化是一项紧迫、长期的工作目标，对当地养牛业的健康发展及公共卫生安全等方面具有重要意义。

参考文献：

[1] 王炜，武华.牛病毒性腹泻病毒的多型性及疫病防控[J].动物医学进展，2008（4）：96-99.

[2] 段进刚，雷程红，葛婷，等.牛病毒性腹泻病诊断技术的研究进展[J].黑龙江畜牧兽医，2018 （1）：93-96.

[3] 李宝龙，陶军，黄忠，等.某奶牛场牛病毒性腹泻的血清学调查[J].上海畜牧兽医通讯，2020（4）：40-42.

[4] 魏伟.牛病毒性腹泻病毒抗体间接 ELISA 检测方法的建立及临床血清学调查[D].东北农业大学，2009.

[5] 陈锐.中国西部四省区散养肉牛BVDV流行病学调查和一株分离毒株的全基因组测序[D].中国兽医药品监察所，2016.

[6] 陈锐，范学政.西部散养肉牛病毒性腹泻病毒流行及遗传变异[J].中国农业科学，2016，49（13）：2634-2641.

[7] 何海健，蒋春燕.浙江省猪病毒性腹泻的病原流行病学调查与综合防治方案[J].金华职业技术学院学报，2019，19（6）：81-85.