用TOSOH HLC-723 G8型糖化血红蛋白仪检测糖化血红蛋白的精密度及正确度

郭胜利，郭丽丽，李守霞

(1. 邯郸邯钢医院检验科，河北 邯郸 056001 ；2. 邯郸市中心医院检验科，河北 邯郸 056001)

近年来，糖化血红蛋白检测在诊治糖尿病中得到了广泛的应用。准确地检测糖化血红蛋白对检测仪器分析性能的要求较高。在本研究中，笔者参照美国临床和实验室标准协会制定的相关标准、WS/T 492-2016、WS/T 420-2013、WS/T 402-2012、YY/T 1246-2014 等中国行业标准中的相关方法对用TOSOH HLC-723 G8 型糖化血红蛋白仪（采用高效液相色谱法）检测糖化血红蛋白的精密度及正确度进行了评价。

1 材料与方法

1.1 标本来源

在我院就诊糖尿病患者的乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）抗凝全血；卫生部临床检验中心提供的具有互换性的有证参考物质。

1.2 仪器和试剂

TOSOH HLC-723 G8 型糖化血红蛋白仪及其原装配套试剂、校准品、质控品。

1.3 验证方案

1.3.1 精密度验证实验 选择两个糖化血红蛋白浓度水平（5.0%、9.9%）的EDTA 抗凝全血，进行室内质控，每天每个浓度检测1 个批次，每批次重复测定3 次，连续测定5 d，每个浓度水平累计检测15 个结果，统计计算得出批内不精密度和总不精密度。糖化血红蛋白的允许总误差（allowable total error，TEa）为8.0%，实验室允许批内不精密度≤2.0%（1/4 TEa），实验室允许总不精密度≤2.67%（1/3 TEa）。

1.3.2 正确度验证实验 选择卫生部临床检验中心提供的具有互换性的有证参考物质，包括低〔（5.02±0.15）%〕、 中〔（6.86±0.15）%〕、 高〔（9.34±0.21）%〕三个糖化血红蛋白浓度水平的EDTA 抗凝全血各100 μL。按糖化血红蛋白检测标准中的相关操作规程进行检测样本的前处理及测定，进行室内质控，每天每个浓度检测1 个批次，每批次重复测定2 次，连续测定5 d，每个浓度水平累计检测10 个结果，计算验证区间（VI），参考物质的赋值在VI 范围内，表示正确度验证通过。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 软件对研究数据进行统计学处理。计量资料用均数± 标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ² 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 糖化血红蛋白检测精密度验证结果

在TOSOH HLC-723 G8 型糖化血红蛋白仪上检测糖化血红蛋白的结果显示，低（5.0%）、高（9.947%）两个糖化血红蛋白浓度水平血样的实测批内不精密度分别为0.73%、0.519%，总不精密度分别为0.76%、0.779%，均在实验室允许范围（批内不精密度＜ 2.0%，总不精密度＜2.667%）内，检测精密度验证通过。详见表1。

2.2 用参考物质进行糖化血红蛋白检测正确度验证的结果

低〔（5.02±0.15）%〕、中〔（6.86±0.15）%〕、高〔（9.34±0.21）%〕 三 个 糖 化 血 红 蛋白浓度水平参考物质的赋值分别落在VI 4.8 8 5% ～ 5.1 2 9%、6.7 2 8% ～ 7.1 9 4%、9.266% ～9.622% 范围内，检测正确度验证通过。详见表2。

表2 用参考物质进行糖化血红蛋白检测正确度验证的结果（%）

3 讨论

1968 年，Ranbar 等[1-2]在糖尿病患者体内的红细胞中发现了异常血红蛋白。此后，临床上开始逐步了解了血红蛋白与糖尿病的关系。现如今，糖化血红蛋白已成为临床上诊断、治疗、监测糖尿病的重要指标。糖化血红蛋白的稳定性较强，不会受到一过性血糖升高/ 降低的影响[3-4]。美国临床化学协会糖化血红蛋白标准化委员会和国际临床化学与检验医学联合会糖化血红蛋白标准化工作组均建议将高效液相色谱法作为检测糖化血红蛋白的金标准[5]。有研究指出，离子交换高效液相色谱法具有高效、高灵敏度、高准确度、操作简便快捷等优点。精密度和正确度是检测系统重要的性能指标。据统计，2000 ～2010年，临床上检测4% ～6% 浓度水平糖化血红蛋白血样的变异系数由7.0% 降至4.0%，检测6% ～10% 浓度水平糖化血红蛋白血样的变异系数由5.0% ～5.5% 降至4.0%[6]。美国病理学家协会建议所有糖化血红蛋白检测方法的目标变异系数均应≤3.5%。其中，多数方法的目标变异系数应≤3.0%，少数方法的目标变异系数应≤2.0%。本研究的结果显示，低（5.0%）、高（9.947%）两个糖化血红蛋白浓度水平血样的实测批内不精密度分别为0.73%、0.519%，总不精密度分别为0.76%、0.779%，均在实验室允许范围（批内不精密度＜ 2.0%，总不精密度＜ 2.667%）内，检测精密度验证通过。通过检测具互换性有证参考物质进行检测正确度验证的结果显示，低〔（5.02±0.15）%〕、 中〔（6.86±0.15）%〕、 高〔（9.34±0.21）%〕三个糖化血红蛋白浓度水平参考物质的赋值分别落在VI 4.885% ～5.129%、6.728% ～7.194%、9.266% ～9.622% 范围内，检测正确度验证通过。

综上所述，用TOSOH HLC-723 G8 型糖化血红蛋白仪检测糖化血红蛋白的精密度及正确度均符合相关要求。