儿童室管膜瘤组织中PD-L1表达与临床病理参数及预后的关系

高璐 武斌△ 李楠

(西安市儿童医院，(1.门诊综合外科；(2.神经外科，陕西 西安 710003)

研究[1]显示，相较于成人，儿童发生室管膜瘤的概率更高，且男性发病率明显高于女性，儿童患者中约有70%的室管膜瘤出现在后颅窝，25%则发生在幕上脑室，其余发生在脊髓。临床多根据肿瘤大小、组织学分级、肿瘤TNM分期等因素，以选择室管膜瘤患儿的治疗方法。近年来有研究[2-3]指出，在幕上室管膜瘤患者患者肿瘤组织及T淋巴细胞中可见程序性死亡配体-1(PD-L1)的高表达，而针对PD-L1的免疫治疗在脑胶质瘤患者中效果良好，因此探讨室管膜瘤儿童血清中PD-L1表达水平具有重要意义。本文主要探讨儿童室管膜瘤组织中PD-L1表达与临床病理参数及预后的关系。

1 资料与方法

1.1临床资料 收集2017年4月至2020年3月期间我院收治的且行手术切除的82例室管膜瘤患儿的临床资料，纳入标准：(1)经术前影像学和术后病理学诊断为室管膜瘤者；(2)行手术治疗者；(3)病例资料完整且同意随访者。排除标准：(1)术前影像学诊断考虑为室管膜瘤，而术后病理显示非室管膜瘤者；(2)病理结果存在争议者；(3)术后30 d死亡者；(4)临床资料不完全者；(5)不能接受随访者；(6)既往存在其他颅内肿瘤病史。本次研究已获取本院医学伦理委员会审核批准，且征得患儿家属或法定监护人同意，并签署知情同意书。

1.2资料收集 通过电子病历收集患儿性别、年龄、病理分级、肿瘤大小、肿瘤位置、术前KPS评分、是否完全切除、肿瘤增殖(Ki 67)指数等资料，其中术前KPS评分分为≥80分和<80分，肿瘤位置为幕上和幕下，病理分级参照世界卫生组织制定的分级标准，分为低级别(Ⅰ级、Ⅱ级)和高级别(Ⅲ级)，全切除为显微镜下显示将肿瘤切除至水肿带或肿瘤的假包膜。

1.3方法 将准备好的病理组织切片进行脱蜡、水化，根据采购抗体的不同，采用不同的抗原修复液对组织切片按照标准步骤进行修复，修复完成后取出切片用磷酸盐缓冲液冲洗两次，每次5 min，将切片上磷酸盐缓冲液甩干后置入3%双氧水溶液中10 min，消除切片上的磷酸盐缓冲液后，采用磷酸盐缓冲液冲洗5 min，重复3次，甩干水分，再进行显色、复染、封片，采用日本OLYMPUS公司的显微镜及成像系统进行观察，免疫组化孵育盒和抗原修复盒均购自福州迈新生物科技开发有限公司，兔抗人PD-L1单克隆抗体购自美国GST公司，操作严格按照试剂盒说明书进行。免疫组化结果判断：根据九个视野中阳性细胞占全部细胞的比例和阳性细胞染色深浅进行分级评分，将染色得分和显色的阳性细胞所占百分比得分相乘得出结果。计数结果和得分由两名未参与本次研究的病理科医生进行，结果不一致时重新评估切片，直到得出一致结果。

1.4随访 所有患者进行严密的随访，术后2年内每3个月进行1次随访，随访截止时间为2021年4月2日，随访方法包括门诊复查、电话随访、微信随访等。总生存期(OS)为确诊时间至末次随访时间或因肿瘤死亡的时间间隔。

2 结 果

2.1PD-L1在室管膜瘤患儿组织中的表达 82例研究对象中，PD-L1在癌组织表达阳性患儿有40例，阳性表达率为48.78%，阴性有42例；癌旁组织中表达阳性患儿16例，阳性表达率为19.51%，阴性有68例。PD-L1在癌组织的阳性表达率明显高于癌旁组织(χ2=16.641，P<0.05)。

2.2PD-L1的表达与室管膜瘤患儿临床病理参数的关系 PD-L1的阳性表达与室管膜瘤患儿的肿瘤切除程度和Ki 67指数有关(χ2=16.641，P=0.010)，与患儿的性别、年龄、病理分级、术前KPS评分、肿瘤大小和肿瘤位置无关(P>0.05)。见表1。

表1 PD-L1的表达与室管膜瘤患儿临床病理参数的关系

2.3单因素分析 结果显示，病理分级、术前KPS评分、肿瘤大小、肿瘤切除程度、Ki 67指数、PD-L1表达是影响室管膜瘤患儿总生存率的重要因素(P<0.05)。见表2。

表2 影响室管膜瘤患儿总生存率的临床病理特征单因素分析

2.4多因素分析 将单因素分析结果中有统计学意义的变量进行Cox回归多因素分析，结果显示：病理分级是影响室管膜瘤患儿临床预后的预测因子(P<0.05)。见表3。

表3 各临床病理特征与临床预后关系多因素分析

3 讨 论

研究[4-5]指出，PD-L1表达阳性的肿瘤细胞与PD-1表达阳性的T细胞相互作用，两者结合可能会导致T细胞凋亡、衰竭，而T细胞是在胸腺中分化发育成熟后通过血液循环和淋巴进而分布到全身免疫器官组织的淋巴细胞，其产生的免疫应答对机体的抵抗力具有重要价值。研究[6-7]发现，PD-L1高表达存在于食管癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、乳腺癌等恶性肿瘤中，且高表达水平与预后不良存在密切关联。

本文结果显示，PD-L1在室管膜瘤癌组织表达阳性患儿有42例，阳性表达率为48.78%，明显高于癌旁组织的阳性表达率，且PD-L1的阳性表达与室管膜瘤患儿的肿瘤切除程度和Ki 67指数有关，与研究[8]结果相近，提示PD-L1在室管膜瘤癌组织中为高表达水平，与肿瘤切除程度和肿瘤增殖指数有关，分析原因可能是：(1)目前手术切除仍是治疗室管膜瘤的首选方法，但部分患儿由于肿瘤组织靠近脑干或与脑干粘连严重，导致在手术切除过程中容易损伤脑干，因此术中常无法做到完全切除肿瘤组织，有研究指出[9]，室管膜瘤中PD-L1表达与手术切除程度存在密切关联；(2)Ki 67是指大部分处于细胞静止期以外的肿瘤细胞占所有肿瘤细胞的百分比，其值越高，则组织分化越差，是反映癌症患者预后情况的重要指标之一。有研究[10]发现，PD-L1高表达与高Ki-67值存在相关性，与本研究结果相近。同时本研究中，PD-L1表达水平与室管膜瘤患儿的预后未存在明显相关性，可能是本研究随访时时间较短、纳入样本量较小等有关。

综上所述，PD-L1在室管膜瘤癌组织中为高表达水平，与肿瘤切除程度和肿瘤增殖指数有关，对患儿的预后没有明显意义，而病理分级是影响室管膜瘤患儿临床预后的预测因子，未来需要联合多中心进行更大样本的探究。