呼吸道腺病毒感染儿童血清PCT、SAA、25(OH)D的检测及临床意义

曾洲榆，官燕飞，倪文鹏，柯家龙，张炽伦

广东省中山市博爱医院检验科，广东中山 528403

腺病毒感染多发于儿童时期，发生率较高。呼吸道腺病毒感染易使机体发生细胞因子与淋巴细胞亚群紊乱，严重者可致全身炎症反应综合征。故寻找有效判断呼吸道腺病毒感染的血清学指标对早期诊断发现疾病具有重要价值。呼吸道病毒感染的严重程度一般不由病毒本身决定，机体对病毒产生的免疫应答才是影响感染后严重程度的主要原因。腺病毒感染后，机体体液免疫通过分泌抗体来保护组织器官，细胞免疫则作用于病毒内蛋白而使感染终止，对抗腺病毒感染具有重要作用[1-2]。降钙素原(PCT)为降钙素的前体物质，机体发生感染后在细菌内毒素诱导下，血清中PCT水平迅速上升；淀粉样蛋白A(SAA)为急性时相反应蛋白，在健康人群体内水平极低，发生感染后其水平急剧上升[3-4]。维生素D为脂溶性维生素，与机体免疫功能、炎性反应等过程有关，25羟基维生素D[25(OH)D]为评估机体维生素D营养状况的最佳指标[5]。本研究对本院呼吸道腺病毒感染患儿血清PCT、SAA、25(OH)D水平进行检测，以了解其血清水平并评估腺病毒感染特征。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年2月至2021年3月于中山市博爱医院住院患儿作为研究对象，临床表现为咳嗽发热、气促、咽痛。分别采用间接酶联免疫法及免疫荧光法检测腺病毒IgM抗体与腺病毒抗原，将二者检测结果均为阳性的110例患儿纳入腺病毒感染组，其中男61例，女49例；年龄为6个月至5岁，平均(29.57±9.12)个月。同期选取100例于本院体检的健康儿童作为对照组，其中男57例，女43例；年龄为7个月至5岁，平均(30.05±9.72)个月。两组一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2仪器与试剂 腺病毒IgM抗体来源于比尔塞有限公司；腺病毒抗原检测试剂盒购自海德诊断有限公司；Roche Cobas E601全自动电化学发光仪来源于罗氏公司；干式荧光免疫分析仪为梅里埃全自动荧光酶免疫分析仪；SAA试剂来源于广州市微米生物科技有限公司。

1.3方法 腺病毒IgM抗体检测：于清晨抽取患儿空腹静脉血，离心后取其血清冷藏备用；采用间接酶联免疫法测定血清腺病毒IgM抗体，操作参考IgM抗体检测试剂盒要求，结果呈阳性标本纳入备选。腺病毒抗原检测：取患儿鼻咽分泌物制成涂片，采用异硫氰酸荧光素标记的针对腺病毒鼠单克隆抗体检测腺病毒抗原，通过荧光显微镜观察，以观察到超过2个完整细胞有明亮黄绿色荧光作为阳性，反之为阴性[6]。PCT、SAA、25(OH)D检测：抽取患儿清晨空腹静脉血，离心后备用；采用梅里埃全自动荧光酶免疫分析仪及其配套试剂检测血清PCT；使用干式荧光免疫分析仪测定SAA水平；采用电化学发光法检测血清25(OH)D水平。

2 结 果

两组血清PCT、SAA、25(OH)D水平比较 腺病毒感染组血清PCT、SAA水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，25(OH)D水平低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组血清因子水平比较

3 讨 论

腺病毒为双链DNA无包膜病毒，首先从人腺样组织培养物中分离出，分为6个亚群，共47个血清型。呼吸道感染为哮喘的主要诱因，病毒感染与哮喘发生密切相关。儿童由于呼吸系统生理与解剖结构未发育成熟而较易发生呼吸道感染，腺病毒感染患儿病死率高且后遗症程度重，对儿童健康成长有严重影响，及时掌握呼吸道腺病毒感染特点及血清学变化和早期诊断并采取及时有效的治疗方式对儿童成长具有重要价值[7-8]。呼吸道腺病毒感染易导致机体出现细胞因子与淋巴细胞亚群紊乱，严重时可导致全身炎症反应综合征。机体细胞免疫功能严重下降时，相关细胞因子瀑布效应出现及伴随趋化因子参与，可导致整个免疫应答网络失控，加重全身炎症反应综合征，发生脓毒血症，病情恶化，引起多脏器功能不全综合征。人体感染腺病毒后可通过体液免疫分泌出抗体以保护气管等组织器官，还能通过细胞免疫作用于病毒内部蛋白以抵御病毒感染。及时治疗可促使患儿自身免疫调控恢复，促进免疫应答平衡，进而治愈腺病毒感染。故研究腺病毒感染患儿免疫应答变化情况对阐明腺病毒感染致病机制及腺病毒感染患儿治疗具有重要作用[9]。

PCT是由116个氨基酸组成的糖蛋白属于降钙素前体，细菌脂多糖短期内可诱导PCT大量生成，支原体与病毒感染后分泌的白细胞介素对PCT分泌具有阻断作用，可导致其分泌量下降。PCT水平变化与细菌感染密切相关，对细菌感染性疾病诊断与治疗具有一定价值，全身感染4 h后在促炎因子及内毒素作用下PCT水平可逐渐上升，在6～24 h内稳定在高水平，不受激素与药物影响，早期PCT水平上升后经抗感染治疗能降低其水平，故PCT为临床中诊断感染性疾病的有效指标[9-10]。早期健康人体中含有极低量的PCT，不受恶性肿瘤本身影响，当发生细菌感染后2～3 h体内PCT水平逐渐升高，与感染程度呈正相关，而在病毒感染时不升高。

SAA是由104个氨基酸组成的多肽，主要产生于肝脏，为敏感性较高的急性反应蛋白，可反映机体炎症程度，通过降低巨噬细胞与T淋巴细胞水平以减轻组织器官炎症损伤。健康患儿体内SAA水平极低，当受到支原体、细菌等侵袭后，肝细胞产生大量SAA[11-12]。有研究显示，研究组PCT、SAA水平明显高于对照组，提示血清PCT与SAA可作为感染性疾病诊断参考指标[13]。维生素D为机体内重要类固醇激素，在肺组织中能被激活，也能调节免疫功能，且可加速诱导肺部免疫应答机制，减轻炎性反应。机体正常免疫调节需通过淋巴亚群维持，维生素D能刺激中性粒细胞、呼吸道上皮细胞等表达以预防呼吸道感染[14]。25(OH)D3为体内维生素D活性代谢产物，具有稳定的结构，能促进骨代谢并维持钙平衡，且能参与机体免疫调节。25(OH)D为反映机体维生素D储备的存在形式，主要有25(OH)D2与25(OH)D3两种亚型，多数研究以25(OH)D3水平表示机体内维生素D水平。25(OH)D3可减轻肺泡嗜酸性粒细胞浸润程度并降低气道高反应性，当25(OH)D3呈低表达状态可导致肺抗感染能力下降，进而诱导哮喘等疾病发生、发展。本研究中，腺病毒感染组血清25(OH)D水平低于对照组，说明患儿体内维生素D水平较低时，外周免疫球蛋白水平较低，呼吸道抵抗力下降，呼吸道感染可能增加。当体内维生素D水平上升时机体自身免疫力提高，这有助于腺病毒感染好转，提示维生素D水平对腺病毒感染预测具有一定价值[15]。

综上所述，与健康儿童相比，呼吸道腺病毒感染患儿血清PCT、SAA水平上升，25(OH)D水平下降，早期检测对及早诊断和及时治疗具有积极意义。