高 宇,杨金明,毕保良,严 晖
(云南农业大学动物科学技术学院,云南省教育厅高原渔业资源保护与可持续利用重点实验室,云南 昆明 650201)
本文通过研究聚维酮碘、苯扎溴铵、硫酸铜和高锰酸钾4 种常见药物对昆明裂腹鱼稚鱼的急性毒性,探究昆明裂腹鱼稚鱼对不同药物的敏感性,为其养殖过程中的科学用药提供理论依据。
昆明裂腹鱼稚鱼为人工繁殖的鱼苗,体长(15.0±1.0)毫米,体重(18.4±1.5)毫克;身体健康,游泳活泼,无伤无畸形。
聚维酮碘(水产用,碘含量为10%)购买自山西康派伟业生物科技有限公司;苯扎溴铵(水产用,含量为45%)购买自常州市金太阳动物保健品有限公司;硫酸铜(化学纯,含量不少于99%)购买自北京化工厂;高锰酸钾晶体(化学纯,含量不少于99%)购买自重庆川东化工(集团)有限公司。
实验用水为自来水,经曝气3天后使用,水温(18±1.5)℃,pH 8.0±0.5,溶氧(7.5±0.5)毫克/升。暴露实验开始前,先在3 升的长方体聚乙烯盒中加入1升曝气水,每盒放入昆明裂腹鱼稚鱼10尾,驯养72小时,驯养期间不充氧、不喂食。
采用静水暴露实验法进行实验,预实验将药物浓度限定在一个较大的范围内,每个浓度设置两个平行,每个平行随机放入10 尾稚鱼。根据预实验的结果,分别设置聚维酮碘暴露浓度为0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 毫克/升,苯扎溴铵暴露浓度为 0、0.35、0.45、0.55、0.65、0.75 毫克/升,硫酸铜暴露浓度为0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0 毫克/升,高锰酸钾暴露浓度为0、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 毫克/升,每隔 24 小时更换1次药液,实验期间不充氧、不喂食。实验开始后8小时内连续观察各实验组稚鱼的活动状况、中毒情况和死亡情况等,记录各药物浓度组24、48、72、96 小时的死亡情况,将死亡稚鱼及时捞出。判定死亡的标准为先用玻璃棒轻轻搅动周边的水体,稚鱼无反应,再轻触其尾部无反应,最后将其捞出观察鳃盖无振动、口张开,则判定已死亡。
采用寇氏法(Karber method)进行半致死浓度(LC50)的计算,其中
式中:d为相邻两组剂量对数之差,Xm为最大剂量对数,P 为死亡率(用小数表示),Sx50为标准误,n为实验鱼数量。
安全浓度(SC):SC=LC50(96小时)×0.1
根据《化学农药环境安全评价实验准则》(GB/T 31270-2014)中规定的有毒物质对鱼类毒性等级评价标准,按96小时半致死质量浓度划分为4个等级(表1),用此标准评判实验药物对昆明裂腹鱼稚鱼的毒性等级。
表1 鱼类毒性等级评价标准
4 种药物对昆明裂腹鱼稚鱼的毒性实验结果见表2~表5。
表2 聚维酮碘对昆明裂腹鱼稚鱼的毒性实验结果
表3 苯扎溴铵对昆明裂腹鱼稚鱼的毒性实验
表4 硫酸铜对昆明裂腹鱼稚鱼的毒性实验
表5 高锰酸钾对昆明裂腹鱼稚鱼的毒性实验
实验结果表明,聚维酮碘、苯扎溴铵、硫酸铜和高锰酸钾对昆明裂腹鱼稚鱼的96小时半致死浓度分 别 为 1.39、 0.49、1.68、1.63 毫克/升,安全浓度分别为0.14、0.05、0.17、0.16 毫克/升,4 种药物对昆明裂腹鱼稚鱼的毒性大小依次为苯扎溴铵>聚维酮碘>高锰酸钾>硫酸铜。根据《化学农药环境安全评价实验准则》中相关标准,苯扎溴铵对昆明裂腹鱼稚鱼的毒性为高毒,聚维酮碘、硫酸铜以及高锰酸钾3 种药物对昆明裂腹鱼的毒性为中毒。
通常用半致死浓度和安全浓度来衡量药物的毒性强弱,以96小时半致死浓度作为急性毒性的分级标准。聚维酮碘可以在昆明裂腹鱼苗种培育阶段病害防治中使用,其安全浓度在常用剂量范围,相对比较安全。硫酸铜和高锰酸钾安全浓度低于药物推荐使用浓度,应尽量减少使用。苯扎溴铵属于高毒,使用剂量不当会造成苗种的大量死亡,因此不推荐使用苯扎溴铵作为昆明裂腹鱼病害防治的药物。