潘 辉 郭力刚 李正鹏 陆 欢*
(1贵州光明临港九道菇生物科技有限公司,贵州遵义 563000;2上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部应用真菌资源与利用重点开放实验室/国家食用菌工程技术研究中心,上海奉贤 201403)
真姬菇Hypsizygus marmoreus又名玉蕈、斑玉蕈、假松茸等,属担子菌亚门,层菌纲,伞菌目,白玉科,玉蕈属[1-2],主要分布于亚洲、北美洲和欧洲等北温带地区。真姬菇具有菇体肥厚,口感细腻,脆嫩鲜滑等特点,含有多种氨基酸(含有人体所需的8 种必需氨基酸),其中赖氨酸和精氨酸含量高于大部分食用菌,还富含多糖等活性物质。真姬菇还具有抗肿瘤、提高免疫力、抗衰老等药用价值,从子实体中提取的葡聚糖具有很高的抗肿瘤功效[3-7]。
自1972 年日本宝酒造株式会社实现了首次人工栽培真姬菇后,经过几十年发展,目前,其工厂化生产量仅次于金针菇和杏鲍菇[8-10],2017 年,我国真姬菇总产量超过了39 万t[11]。为筛选出不同真姬菇菌株适宜的栽培料配方和工厂化生产所用栽培料,笔者进行了本试验。
试验菌株为真姬菇菌株101 和201,其中101 为蟹味菇,201 为白玉菇,均由上海光明森源生物科技有限公司提供。试验主要原材料为杨树木、白枫、松树木、檫树木、株树木和泡桐树的木屑,辅料为米糠和麸皮。所有材料要求新鲜、无虫害、无霉变。
(1)母种培养基。1000 mL 培养基中含马铃薯200 g,琼脂20 g,葡萄糖20 g,用15 mm×150 mm 的试管进行分装,灭菌后备用。(2)栽培种培养基。根据真姬菇生长特性和营养需求,共设6 个培养料配方,配方1为杨木屑60%;配方2为白枫木屑60%;配方3 为松木屑60%;配方4 为檫木屑60%;配方5 为株木屑60%;配方6 为泡桐木屑60%。以上配方均添加米糠30%,麸皮10%。料含水量为62%。
按1.2 配方配制栽培种培养基,搅拌均匀后装入大试管内(30 mm×200 mm),装满试管后压料至试管中部,料重约90 g,再灭菌、接种。接种后将大试管置温度22~25 ℃,空气相对湿度75% 左右的培养房内,避光培养。试验重复3 次,每次20 支。pH 能影响食用菌菌丝生长,过高过低都不利于菌丝生长,因此试验测定不同真姬菇配方料灭菌前后pH。
按1.2 配方称料,将培养料搅均匀,采用850 mL的塑料瓶装料550 g(湿重),高温高压灭菌2 h。在无菌条件下接入等量真姬菇栽培种,置温度22~25 ℃下培养,待菌丝长满搔菌后移入菇房,进行控温控湿的常规出菇管理。出菇期间温度为14~16 ℃,空气相对湿度为95%~100%,现蕾后辅助强光刺激。试验重复3次,每次50瓶。
菌丝平均生长速度测定:当菌丝铺满大试管料面,并开始向下延伸生长时,开始观察记录菌丝长势、色泽;培养第8 天第一次划线,培养第15 天第二次划线,培养第22 天第三次划线,取平均值。记录菌丝长势、色泽,栽培瓶内生育周期和平均瓶产量等。采用SPSS 21.0软件对数据统计分析。
由表1 可知,6 个配方料灭菌后pH 均比灭菌前下降,其中配方1、配方2、配方4 和配方6 下降较明显,配方3 和配方5 下降幅度较小。原因可能是配方1、配方2、配方4和配方6所用木屑在高温高压灭菌时木质纤维素、纤维素和蛋白质等大分子降解为有机物,以及微生物作用,料酸败严重。
表1 供试配方料灭菌前后pH
由表2可知,真姬菇101和201菌株在不同配方料中菌丝生长速度和菌丝长势有差异,色泽差异不明显。其中,101菌株在配方1和配方5的菌丝平均长速最快,其次为配方2,配方1和配方2菌丝较浓白健壮,配方5菌丝颜色偏淡;配方3和配方6的菌丝生长稍慢,两者差异不显著;配方4菌丝平均长速最慢,与其他配方差异较显著,但菌丝浓白,整齐。配方1(杨木屑)101菌株菌丝生长浓白整齐,且生长快,可能是101菌株较容易分解利用杨木屑中的纤维。
表2 供试配方真姬菇菌丝生长情况
图1 培养22 d后的真姬菇菌丝体生长情况
真姬菇201 菌株在配方2 和配方5 料中菌丝平均长速最快,但配方5菌丝色泽要稍淡;配方3、配方6、配方1 的菌丝平均长速次之;配方4 菌丝平均长速最慢。由此可知,配方2(白枫木屑)适合201菌株菌丝生长,与101菌株有差异。
真姬菇101和201菌株在配方4(檫木屑)上菌丝生长最差,可能与檫木屑含黄樟油素等物质有关。
由表3可知,供试配方栽培真姬菇101和201菌株,平均瓶产量、生育周期和菇品质有差异。其中,101 菌株配方1 的平均产量最高,其次为配方2;配方1—配方5的生育周期都在22~24 d,菇品质较好;而配方6 与其他5 个配方相比,平均产量最低,生育周期达26 d,菇品质较差。
表3 供试配方真姬菇产量及品质
真姬菇201 菌株配方2 的平均瓶产量最高,其次为配方1,配方3、配方4、配方5 的平均产量无显著差异,且生育周期都为23 d,菇品质好;而配方6的平均产量最低,生育周期为27 d,菇品质较差。表明枫木屑和白杨木屑是最适合用于栽培真姬菇101和201 菌株,而泡桐木屑栽培真姬菇对其产量和品质都有较大影响,不适合作为栽培真姬菇原料。
真姬菇栽培的主要原材料是木屑,近年来食用菌工厂化生产迅速发展,严格森林保护政策,导致真姬菇栽培中常用的杨木木屑和枫木木屑等原材料采购成本越来越高。因此,找寻成本低、易采购、可替代的原材料,对整个真姬菇产业发展具有重要意义。
试验结果表明,在相同培养环境下,供试配方的真姬菇菌丝生长和菌丝形态不同。在6 个配方中,配方1 更有利于真姬菇101 菌株菌丝生长,配方2更有利于201菌株菌丝生长;高压灭菌后pH降低,大分子物质易降解为有机物,有利于菌丝吸收。配方1 和配方2 栽培真姬菇101 和201 菌株,生长周期短,产量高,菇品质较好。笔者还对不同封口方式进行了比较,发现用棉塞封口的试管,料面菌丝易干,相较于橡胶塞更容易被污染,因此,不建议使用棉塞封口。