血清DKK1、TK1水平预测老年胸段食管癌患者根治术后复发、转移的研究*

陈 婷，秦永辉，刘 凯

新疆医科大学附属肿瘤医院，新疆乌鲁木齐 830011

胸段食管癌作为常见胃肠道恶性肿瘤之一，因早期无明显表现，且病情进展缓慢，患者易错失最佳治疗时机，部分患者，特别是老年患者在确诊时已进展至中晚期，不仅增加手术难度，且在术后仍伴较高的复发、转移风险，预后较差。因此，早期准确预测胸段食管癌患者根治术后复发、转移风险非常重要，这可以指导早期治疗。既往研究证实，血管内皮生长因子、皮层肌动蛋白均可用于预测食管鳞癌患者病理分期及淋巴结转移风险[1]。但需要注意的是，该研究在分析时并未纳入其他关键性指标进行综合性分析，二者对患者预后的影响是否受其他因素干扰尚不可知，应用价值不明确。除上述研究提及的指标外，癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌抗原(SCC)等肿瘤标志物也被临床用于预测和评估食管癌的复发风险，但上述指标在检测时易受肿瘤生物学行为影响，应用仍有局限[2]。因此，寻找更可靠且更敏感的指标较为迫切。分泌型蛋白Dikkopf1(DKK1)已被研究证实在乳腺癌、非小细胞肺癌等多种恶性肿瘤细胞中呈过表达，与肿瘤细胞的转化、生长及侵袭密切相关[3]。细胞质胸苷激酶1(TK1)作为DNA合成及修复过程中的关键酶之一，被证实与细胞增殖密切相关[4]。结合上述DKK1、TK1在肿瘤中的表达特点，笔者推测血清DKK1、TK1异常表达可能与老年胸段食管癌根治术患者预后有关，但相关研究较少。基于此，本研究将重点分析血清DKK1、TK1水平与老年胸段食管癌患者根治术后复发、转移的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年6月至2018年6月于本院接受根治术治疗的63例老年胸段食管癌患者为研究对象。(1)纳入标准：①经病理确诊为胸段食管癌；②预计生存时间>12个月；③年龄≥60岁；④接受根治术治疗。(2)排除标准：①合并心功能、肾功能、肝功能不全或衰竭的患者；②合并其他恶性肿瘤的患者；③合并免疫性疾病的患者；④合并严重感染性疾病或传染性疾病的患者；⑤随访期间病死的患者；⑥全身状况恶化无法耐受手术的患者；⑦局部浸润过于广泛无法切除肿瘤的患者；⑧伴严重低蛋白血症和贫血、营养不良无法耐受手术的患者。63例老年胸段食管癌患者中男37例，女26例；年龄61～77岁，中位年龄69.00岁；有吸烟史29例。

1.2方法

1.2.1复发、转移评估及分组方法 对全部老年胸段食管癌患者根治术后进行为期3年的随访，以复发(癌细胞在原来脏器再次产生)、转移(癌细胞转移到其他位置)作为终点事件，患者分别于术后3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36个月到院复查，观察并记录患者随访期间复发及转移发生情况，包括局部复发及局部复发并远处转移。先经影像学及生化检查，对有异常情况的患者经穿刺活检确诊，以复发、转移为终点事件。将发生复发、转移的患者纳入发生组，剩余患者纳入未发生组。

1.2.2一般资料收集 使用医院自制的一般资料调查表调查两组患者一般资料，问卷的Cronbach′s α系数为0.86，重测效度为0.88，内容包括年龄、性别(男、女)、吸烟史(吸烟指数≥400，吸烟指数=每天吸烟支数×吸烟年数)、分化程度(未-低分化、中-高分化)、肿瘤分期(Ⅰ+Ⅱ期、Ⅲ+Ⅳ期)、浸润深度(黏膜或黏膜下层、肌层或食管外膜)、肿瘤部位(胸上段、胸中段、胸下段)、术后放化疗(是、否)。

1.2.3实验室指标检测 分别于老年胸段食管癌患者接受根治术治疗当天早晨，抽取患者空腹外周静脉血5 mL，使用智能型高效离心机(贝克曼库尔特商贸，Avanti JXN-30/26型)离心。CEA、SCC的检测：以1 500 r/min的速度离心10 min后取血清，经电化学发光法检测，试剂盒由赛默飞世尔科技有限公司提供。DKK1、TK1的检测：经酶联免疫吸附试验检测，试剂盒由合肥莱尔生物科技有限公司提供。

2 结 果

2.1术后复发、转移发生情况 全部63例接受根治术治疗的老年胸段食管癌患者，术后经为期3年的随访，以术后复发、转移作为终点事件，全部患者随访时间为3～36个月，平均随访(18.51±8.90)个月，发生复发、转移的患者有26例，发生率为41.27%(26/63)。

2.2发生组与未发生组的一般资料、实验室指标比较 两组年龄、性别、吸烟史、分化程度、肿瘤分期、浸润深度、肿瘤部位、术后放化疗情况比较，差异无统计学意义(P>0.05)；发生组血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平高于未发生组(P<0.05)。见表1。

表1 发生组与未发生组一般资料、实验室指标比较

2.3老年胸段食管癌患者血清CEA、SCC、DKK1及TK1之间的相关性分析 采用双变量Spearman相关进行分析，结果显示，老年胸段食管癌患者血清CEA、SCC、DKK1及TK1之间呈正相关(r=0.287～0.508,P<0.05)。见表2。

表2 老年胸段食管癌患者血清CEA、SCC、DKK1及TK1之间的相关系数

2.4血清CEA、SCC、DKK1、TK1与老年胸段食管癌患者根治术后复发、转移关系的Logistic回归分析 将老年胸段食管癌患者根治术前血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平分别作为自变量，根治术后复发、转移发生情况作为因变量(1=发生，0=未发生)，Logistic回归分析结果显示，老年胸段食管癌患者根治术前血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平与术后复发、转移有关(P<0.05)，血清CEA、SCC、DKK1、TK1过表达可能是患者术后复发、转移的危险因素(OR>1，P<0.05)。见表3。

表3 各指标与老年胸段食管癌患者根治术后复发、转移关系的Logistic回归分析结果

2.5各指标预测老年胸段食管癌患者根治术后复发、转移风险的效能分析 将老年胸段食管癌患者根治术前血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平分别作为自变量，根治术后复发、转移发生情况作为状态变量(1=发生，0=未发生)，绘制ROC曲线，结果显示，根治术前血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平分别预测老年胸段食管癌患者术后复发、转移风险的AUC均>0.800，预测价值均较理想。见图1、表4。

表4 各指标预测老年胸段食管癌患者根治术后复发、转移风险的效能分析

图1 各指标预测老年胸段食管癌患者根治术后复发、转移风险的ROC曲线图

3 讨 论

有研究指出，早期胸段食管癌因缺少特异性表现及体征，易出现误诊、漏诊的情况，即便是符合根治术治疗适应证，术后患者复发、转移风险仍然较高，特别是老年患者，严重影响其晚年生存质量[5]。本研究中，63例接受根治术治疗的老年胸段食管癌患者中，术后经为期3年随访，发生复发、转移的患者有26例，发生率为41.27%，证实上述研究结论。为改善老年胸段食管癌患者的生存质量，提高患者生存率，早期预测根治术后复发、转移发生风险尤为关键。

CEA、SCC是常见的肿瘤标志物。CEA与肿瘤组织、细胞间的黏附反应的发生有关，可促进肿瘤细胞的增殖及转移[6]。SCC的表达与肿瘤病情进展密切相关，现阶段常用于肿瘤患者的病情及疗效评估[7]。但有研究指出，肿瘤标志物预测食管癌患者根治术后复发、转移风险的特异性不足，对预测患者病情转归有一定局限[8]。肿瘤细胞复发、转移的主要特征之一即细胞的形态和结构呈异型性、细胞增殖，而血清DKK1、TK1是常见的与细胞增殖密切相关的因子，且已被研究证实参与了肿瘤的进展及预后[9-10]。本研究结果显示，发生组血清CEA、SCC、DKK1、TK1水平均高于未发生组(P<0.05)，且相关性分析结果显示，老年胸段食管癌患者血清CEA、SCC、DKK1及TK1之间呈正相关(P<0.05)。以上结果表明血清DKK1、TK1水平与CEA、SCC有关，也可能是具有一定临床价值的肿瘤标志物。

作为细胞生长过程中的关键性蛋白之一，DKK1在肿瘤细胞的增殖、分裂过程中具有重要作用，能够刺激细胞由生长停滞期进入快速生长期[11]。TK1在静止期细胞或非增殖期细胞内呈低表达状态，而当细胞进入增殖期时，TK1水平可在较短时间内迅速升高[12]。本研究结果显示，发生组患者术前血清DKK1、TK1水平过表达还可能是术后复发、转移的危险因素。分析原因如下：DKK1能够结合Lrp5/6，导致Wnt卷曲蛋白无法与Lrp5/6结合，进而抑制Wnt信号转导通路，降解β-catenin蛋白质，增加肿瘤复发、转移风险[13-14]。同时，DKK1已被研究证实与肝细胞癌、食管鳞癌等多种恶性肿瘤患者预后密切相关[15-16]。TK1可产生促炎性细胞因子，使T细胞向辅助性T细胞(Th)1分化等，加速肿瘤的生长与增殖，继而导致肿瘤的不断恶化与转移[17]。此外，有研究指出，癌变组织处TK1阳性率明显高于正常组织，TK1能够加速肿瘤的生长[18-19]。因此，当老年胸段食管癌患者体内DKK1、TK1呈过表达时，可加速肿瘤细胞增殖，导致根治术后复发、转移的发生。

最后，本研究对各指标预测老年胸段食管癌患者根治术后的复发、转移风险绘制了ROC曲线，结果显示，根治术前血清DKK1、TK1水平分别预测老年胸段食管癌患者术后发生复发、转移风险的AUC均>0.800，且根治术前血清DKK1、TK1的最佳截断值分别为3.535 ng/mL、3.470 pmol/L时，预测价值最佳。上述结果证实，老年胸段食管癌患者根治术前血清DKK1、TK1异常表达不仅是术后复发、转移的危险因素，且可作为根治术前预测术后复发、转移风险的关键标志物。上述结果也表明，未来临床若早期监测老年胸段食管癌患者根治术前血清DKK1、TK1表达异常，可在治疗原发病的同时实施合理干预，如术后联合放化疗或术前联合新辅助化疗等，这可能对指导疾病早期治疗、降低术后复发及转移风险、改善患者预后有积极意义。此外，本研究发现，血清DKK1、TK1间呈正相关，说明老年胸段食管癌患者根治术前血清DKK1、TK1之间可能存在一定联系，二者可能相互影响、相互作用，共同参与了老年胸段食管癌患者术后复发、转移的发生，但尚不能根据此次研究结果推断上述指标之间在疾病中相互影响，还需要在未来增加样本量、延长观察时间并查阅大量文献加以验证。

综上所述，血清DKK1、TK1水平与老年胸段食管癌患者根治术后复发、转移有关，二者异常表达可能是患者根治术后复发、转移的危险因素，对预测患者根治术后复发、转移的风险有一定价值。