利用LC-M S 对保健酒中七种成分的定性分析研究

王佳雯，唐 雪，李双成，张 强，邓 骏，王燕军，李冰川

（1.四川剑南春酒厂有限公司，四川 绵竹 618200；2.岛津企业管理（中国）有限公司，四川 成都 610000；3.四川省公安厅，四川 成都 610000）

保健酒已有数千年的历史，是中国医药科学的重要组成部分。中国的历代医药著作中几乎无一例外地有药酒治疾健身的记载。今天随着科学技术的进步，在中药浸酒的传统工艺的基础上已发展到利用萃取、浸提和生物工程等现代化手段，提取中药中的有效成分制成高含量的功能药酒。当人们的保健意识日趋增强，一些药物成为食用保健品时，保健酒这一新名词便开始出现。

海马酒、健身酒和神酒主要使用的药材有：人参、红花、红景天、枸杞、冬虫夏草、刺五加、红参、海马、鹿茸等。为了确认保健酒中是否有益于人体的功效成分存在，通过对中国药典查找，了解到海马酒、健身酒和神酒这3 种保健酒中可能含有红景天苷、鲁斯可皂苷元、人参皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷、羟基红花黄色素和山奈素这7 种成分。通过运用LCMS-8050 液相色谱质谱仪对这7 种成分在这3种保健酒中是否存在进行定性检测。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

酒样：神酒、海马酒、健身酒，市售。

试剂及耗材：红景天苷标准品、鲁斯可皂苷元标准品、人参皂苷Rb1 标准品、腺苷标准品、紫丁香苷标准品、羟基红花黄色素标准品、山奈素标准品，甲醇，纯水。

仪器设备：LCMS-8050，岛津（上海）实验器材有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 样品处理

以纯水稀释1000倍，滤膜过滤后，直接测定。

1.2.2 标准品处理

在各市局长座谈会上的讲话要点（黄志平） ...................................................................................................11-9

以甲醇为溶剂，准确称取标准品粉末，制成浓度为1 μg/L的溶液。

1.2.3 液相色谱分析条件

色谱柱：shim-pack GIST 50 mm×2.1 mm I.D.,2.0 μm P/N：227-30001-02，岛津（上海）实验器材有限公司。

流动相：A-水；B-甲醇；流速：0.4 mL/min；柱温：40 ℃；进样量：5 μL。

洗脱方式：梯度洗脱，B 相初始浓度为10%。见文末表1。

表1 梯度时间程序

1.2.4 质谱条件

离子源：ESI,正负模式同时测定；加热气流速：10.0 L/min；雾化气流速：3.0 L/min；干燥气流速：10.0 L/min；加热模块温度：400 ℃；DL 温度：250 ℃；接口温度：300 ℃。

扫描模式：多反应监测（MRM），见文末表2。

表2 MRM参数

2 结果与分析

2.1 标准品与样品MRM色谱图

图1 红景天苷

图2 鲁斯可皂苷元

图3 人参皂苷Rb1

图4 腺苷

图5 紫丁香苷

图6 羟基红花黄色素

如图1—图6 所示，通过检测，红景天苷、鲁斯可皂苷元、人参皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷、羟基红花黄色素和山奈素标准品响应良好，无杂峰干扰，溶剂空白无干扰，可以进行样品检测。

2.1.2 神酒样品MRM色谱图（图7—图13）

图7 红景天苷

图8 鲁斯可皂苷元

图9 人参皂苷Rb1

图10 腺苷

图11 紫丁香苷

图12 羟基红花黄色素

图13 山奈素

从图7—图13 可以看出，红景天苷、人参皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷和羟基红花黄色素响应良好；鲁斯可皂苷元和山奈素在神酒样品中无响应。

2.1.3 健身酒样品MRM色谱图（图14—图20）

图14 红景天苷

图15 鲁斯可皂苷元

图16 人参皂苷Rb1

图17 腺苷

图18 紫丁香苷

图19 羟基红花黄色素

图20 山奈素

从图14—图20 可以看出，红景天苷、人参皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷和羟基红花黄色素响应良好；鲁斯可皂苷元和山奈素在健身酒样品中无响应。

2.1.4 海马酒样品MRM色谱图（图21—图27）

图21 红景天苷

图22 鲁斯可皂苷元

图23 人参皂苷Rb1

图24 腺苷

图25 紫丁香苷

图26 羟基红花黄色素

图27 山奈素

从图21—图27 可以看出，红景天苷、人参皂苷Rb1、腺苷和紫丁香苷响应良好；鲁斯可皂苷元、羟基红花黄色素和山奈素在海马酒样品中无响应。

2.2 样品定性结果

由表3 可知，通过保留时间、信噪比和参比离子相对丰度进行定性识别，神酒、海马酒和健身酒中均检测出含有红景天苷。

表3 红景天苷定性结果

由表4 可知，通过保留时间、信噪比和参比离子相对丰度进行定性识别，神酒、海马酒和健身酒中均未检测出含有鲁斯可皂苷元。

表4 鲁斯可皂苷元定性结果

由表5 可知，通过保留时间、信噪比和参比离子相对丰度进行定性识别，神酒、海马酒和健身酒中均检测出含有人参皂苷Rb1。

表5 人参皂苷Rb1定性结果

由表6 可知，通过保留时间、信噪比和参比离子相对丰度进行定性识别，神酒、海马酒和健身酒中均检测出含有腺苷。

表6 腺苷定性结果

由表7 可知，通过保留时间、信噪比和参比离子相对丰度进行定性识别，神酒、海马酒和健身酒中均检测出含有紫丁香苷。

表7 紫丁香苷定性结果

由表8 可知，通过保留时间、信噪比和参比离子相对丰度进行定性识别，神酒、健身酒中均检测出含有羟基红花黄色素，而海马酒中未检测到羟基红花黄色素。

表8 羟基红花黄色素定性结果

由表9 可知，通过保留时间、信噪比和参比离子相对丰度进行定性识别，神酒、海马酒和健身酒中均未检测出含有山奈素。

表9 山奈素定性结果

2.3 定性结果汇总

由表10 可知，神酒、健身酒和海马酒中均检测出含有红景天苷；神酒、健身酒和海马酒中均未检测出含有鲁斯可皂苷元；神酒、健身酒和海马酒中均检测出含有人参皂苷Rb1；神酒、健身酒和海马酒中均检测出含有腺苷；神酒、健身酒和海马酒中均检测出含有紫丁香苷；神酒和健身酒中均检测出含有羟基红花黄色素，而海马酒中未检测出含有羟基红花黄色素；神酒、健身酒和海马酒中均未检测出含有山奈素。

表10 定性结果汇总

3 结论

建立了LCMS-8050 定性测定保健酒中7 种成分的分析方法，方法可在5 min 内完成各化合物的分离和检测。

样品用纯水稀释1000 倍后进行分析，通过对保留时间、信噪比和参比离子相对丰度比进行定性识别，得出了如下结果：神酒中检测出含有红景天苷、人参皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷和羟基红花黄色素；健身酒中检测出含有红景天苷、人参皂苷Rb1、腺苷、紫丁香苷和羟基红花黄色素；海马酒中检测出含有红景天苷、人参皂苷Rb1、腺苷和紫丁香苷。