实时荧光定量PCR 检测妊娠晚期孕妇B 族链球菌感染的临床价值分析

马倩

B 族链球菌是孕晚期孕妇生殖系统感染常见病原微生物类型,常规情况下此类微生物主要存在于人体下消化道及泌尿生殖系统内,感染发生率较低,但在妊娠期间受女性自身激素分泌水平影响时,可在局部微生态环境变化后导致感染的发生。此类感染多发生于孕晚期阶段,可导致早产、胎膜早破、宫内感染等不良妊娠结局的发生,且可由垂直传播导致新生儿感染性疾病的发生,威胁新生儿生命安全［1］。现阶段对孕晚期孕妇B 族链球菌感染的筛查主要采取微生物培养检查方式,但此类检验技术用时较长,且极易受检验操作影响,导致检验结果误差,需在现有检验技术基础上合理选择新型检验技术,提升临床检验效果［2,3］。因此,为分析实时荧光定量PCR 检测妊娠晚期孕妇B 族链球菌感染的临床价值,特进行本次研究,详情报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019 年7 月～2021 年4 月本院3721例接受B 族链球菌感染检测的孕晚期孕妇作为研究对象,年龄19～40 岁,平均年龄(29.54±3.95)岁；孕周34～39 周,平均孕周(36.54±1.71)周；其中初产妇2548例,经产妇1173例。纳入标准：①单胎妊娠者；②经明确研究细节后自愿加入研究者。排除标准：①已明确不良妊娠类型者；②明确妊娠期并发症者。

1.2 方法 经采集孕妇阴道分泌物及直肠分泌物后均接受常规细菌培养检验及实时荧光定量PCR 检测。

1.2.1 样本采集 ①阴道分泌物：将无菌拭子置入阴道下段1/3 处,旋转1 周后采集阴道分泌物,共采集两份样本,样本采集后分别放置于不同无菌套管内密封保存。②直肠分泌物：经无菌拭子置入肛门括约肌上方2～3 cm 处,旋转1 周后采集直肠分泌物,共采集2 份样本,样本采集后分别放置于不同无菌套管内密封保存。

1.2.2 细菌培养检测 取阴道分泌物、直肠分泌物样本各1 份,接种于血琼脂平皿后,在35℃、5%～10%二氧化碳(CO2)环境中培养24～48 h 后,选取含B 族链球菌菌落琼脂行CAMP 试验,后进行微生物鉴定检查。

1.2.3 实时荧光PCR 检测 将无菌套管中阴道分泌物、直肠分泌物样本进行严格实验室处理后,采集部分样本放入PCR 管内,取PCR 扩增试剂盒及全自动生化分析仪器实施扩增处理后检验。

1.3 观察指标 对比细菌培养与实时荧光定量PCR检测结果；对比不同年龄段(≤20 岁、21～30 岁、31～34 岁、≥35 岁)孕妇B 族链球菌阳性检出率；对比B 族链球菌阴性、阳性孕妇妊娠结局(早产、胎膜早破、宫内感染、胎儿窘迫及新生儿感染)。

1.4 统计学方法 采用SPSS22.0 统计学软件进行数据统计分析。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 细菌培养与实时荧光定量PCR 检测结果对比实时荧光定量PCR 检测阴道分泌物、直肠分泌物阳性检出率分别为9.00%、9.16%,均高于细菌培养检测的7.28%、7.77%,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 细菌培养与实时荧光定量PCR 检测结果对比［n(%),n=3721］

2.2 不同年龄段孕妇B 族链球菌阳性检出率对比≤20 岁孕妇B 族链球菌阳性检出率为5.58%,21～30 岁孕妇B 族链球菌阳性检出率为7.19%,31～34 岁孕妇B 族链球菌阳性检出率为10.02%,≥35 岁孕妇B 族链球菌阳性检出率为12.16%；B 族链球菌感染发生率随孕妇年龄增加上升,不同年龄段孕妇B 族链球菌阳性检出率对比差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 不同年龄段孕妇B 族链球菌阳性检出率对比(%)

2.3 B 族链球菌阴性、阳性孕妇妊娠结局对比 依据孕妇治疗意愿予以B 族链球菌感染孕妇治疗,B 族链球菌阳性孕妇早产、胎膜早破、宫内感染、胎儿窘迫及新生儿感染发生率均高于B 族链球菌阴性孕妇,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3 B 族链球菌阴性、阳性孕妇妊娠结局对比［n(%)］

3 讨论

正常情况下女性生殖系统及直肠环境内微生态系统及环境均处于平衡状态,单一菌种感染性疾病发生率较低,但在妊娠期间受女性自身雌激素及孕激素分泌水平变化影响,阴道内微生态环境可在局部免疫功能下降后出现失衡情况,从而诱发感染性疾病。B 族链球菌作为生殖系统内常见微生物类型,是妊娠晚期生殖系统感染主要病原微生物类型,且可在生殖系统感染进展后发生直肠内感染,临床发病率受孕妇年龄影响［4］。

流行病学研究［5,6］指出,相较非孕期患者,妊娠期孕妇B 族链球菌发病后所致临床风险性更为明显,发病期间或可由B 族链球菌感染上行导致子宫、胎膜感染的发生,增加妊娠晚期流产、胎膜早破、早产等不良妊娠结局的发生,且在分娩期间或可由垂直感染导致新生儿感染的发生,诱发临床感染性疾病,威胁新生儿健康安全。故在孕期检查中针对孕晚期孕妇积极开展B 族链球菌感染检测对控制B 族链球菌感染所致不良妊娠结局风险具有积极意义。

本次研究结果显示,实时荧光定量PCR 检测阴道分泌物、直肠分泌物阳性检出率均高于细菌培养检测,差异具有统计学意义(P＜0.05)。实时荧光定量PCR 检测B 族链球菌感染发生率随孕妇年龄增加上升。B 族链球菌阳性孕妇早产、胎膜早破、宫内感染、胎儿窘迫及新生儿感染发生率均高于B 族链球菌阴性孕妇,差异有统计学意义(P＜0.05)。现阶段,孕期检验中对于B 族链球菌感染的检测主要采取细菌培养方式实施检验,即在采集受检孕妇阴道分泌物及直肠分泌物样本,经特定环境条件内血琼脂培养后对所得菌群进行针对性研究,分析受检者B 族链球菌感染情况,但在此类检验实施中样本采集、培养等实验室操作的开展均存在质量影响因素,导致检验结果发生误差,影响实际检验效果,应用局限性明显［7-9］。在实时荧光定量PCR 检测中,受检验技术特性影响,整体检验操作可在4 h 内完成,快速完成检验,且对于已死亡B 族链球菌同样具有显著检验效果,且检验操作自动化程度高,使得人工检验操作所致检验结果差异性风险明显下降,检验结果真实性确切。且在本次研究中发现,部分B 族链球菌感染孕妇或仅存在阴道分泌物或直肠分泌物单一检验结果阳性情况,故对两类样本进行同时检验或可积极发挥妊娠晚期B 族链球菌感染筛查效果［10-13］。

综上所述,实时荧光定量PCR 检测妊娠晚期孕妇B 族链球菌感染具有显著应用价值,需在年龄较大孕妇中加强检测力度,且需在确认检验结果后及时予以干预,降低不良妊娠结局风险,保障母婴安全。