甘肃地区宫颈癌患者HPV 感染的相关危险因素分析

张彩凤，陈伟伟，王小静，马娟文

(兰州市妇幼保健院，甘肃 兰州 730000)

0 引言

宫颈癌是一种起源于宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)的最常见的妇科恶性肿瘤，其发病率在全世界女性恶性肿瘤中占据第3 位[1-2]。研究发现[3-4]，人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)持续感染是宫颈癌的主要诱因。本研究通过对兰州市妇幼保健院就诊的148 例宫颈癌患者进行 HPV 检测，探讨HPV 持续感染的危险因素，为预防宫颈癌的发生提供科学依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018 年6 月至2019 年6 月兰州市妇幼保健院就诊的宫颈癌患者148 例。纳入标准：①年龄27~71 岁；②均行宫颈活检采集组织标本，且经病理学检查和宫颈TCT 检查诊断为宫颈癌患者；③均进行HPV 基因型筛查；④签订知情同意书者。其中，将HPV 基因型检测阳性者作为研究组，HPV 基因型检测阴性者作为对照组。排除标准：①妊娠期或哺乳期妇女；②生殖系统先天性缺陷、畸形或有全子宫切除手术史；③合并有心、脑、肾等重要脏器系统疾病者或精神疾病者；④临床资料不全者。

1.2 研究方法

1.2.1 宫颈细胞取样

将患者的宫颈分泌黏液拭去后采用细胞采集刷于宫颈口1.0~1.5cm 移行带区顺时针旋转3~5 圈，将采集的细胞放入装有固定液的保存管中，密封后送检。

1.2.2 宫颈脱落细胞HPV -DNA 分型检测

吸取经过充分震荡摇匀的1mL 样本，12000 rpm/min，离心10min。弃去上清后加1 mL 0.9%的生理盐水混匀，12000 rpm/min，离心10min，弃上清。沉淀中核酸提取液100 µL 充分混匀，100℃水浴10 min，12000 rpm/min，离心10min，取上清 4 µL 进行PCR 反应。PCR 反应条件如下：预变性(94℃，2 min)，变性 (94℃，2 min)，退火(93℃，10 s)，延伸 (62℃，31 s)，共40 个循环。结果判定按照高危型 HPV 核酸分型测定试剂盒(荧光 PCR 法)说明书严格执行。

1.2.3 填写调查问卷表

对来我院经过病理学检查和宫颈TCT 检查确诊为宫颈癌的148 例患者，在研究人员指导下完成《宫颈癌相关危险因素调查表》的填写，本研究采用调查者与宫颈癌患者一对一、面对面访谈式的问卷调查法以保证患者的个人隐私及问卷结果的真实性。《宫颈癌相关危险因素调查表》的基本内容如下：(1) 患者的婚姻状况 (①未婚，②初婚，③再婚，④离异，⑤丧偶)；(2) 患者的职业(①待业/退休，②家务劳动，③农民，④工人，⑤商业服务人员，⑥公司职员，⑦公务员/ 干部，⑧教师/科教人员，⑨家政服务，⑩个体经营/私营)；(3)患者的文化程度( ①文盲/ 半文盲，②小学，③初中，④高中/中专/职高，⑤大专，⑥本科，⑦硕士及以上)；(4) 患者的家庭收入(①＜1 万元/年，②1~5 万元/年，③5~10 万元/年，④＞10 万元/年)；(5) 患者的吸烟史(①不，从不吸烟，②是，仅以前吸烟，③是，目前吸烟)；(6) 患者是否有被动吸烟史(①有，②无)；(7) 饮酒史( ①不，从不饮酒，②是，偶尔饮酒，③是，经常饮酒)；(8) 患者的初潮年龄( ①11~14 岁，②15~19岁，③≥20 岁)；(9) 患者的初次性生活年龄( ①15~19 岁，②20~24 岁，③≥25 岁)；(10) 患者的性伴侣数( ①1 人，②≥2 人)；(11) 配偶是否与其他女性有过性关系(①是，②否)；(12) 患者的性生活习惯(①双方性生活之前均清洗，②不规则清洗，③双方性生活之前均无清洗)；(13) 患者目前的避孕方式( ①未避孕，②安全期，③体外排精，④避孕药，⑤避孕套，⑥宫内节育环，⑦其他)；(14) 患者使用避孕套的时间 ( ①＜1 年，②1~5 年，③6~9 年，④≥10 年)；(15) 患 者使用避孕药的时间( ①＜1 年，②1~5 年，③6~9 年，④≥10年)；(16) 患者受孕史(①是，②否)；(17) 患者的第一次分娩年龄(①17~24 岁，②≥25 年)；(18) 患者目前的怀孕情况(①孕1，②≥孕2)；(19) 患者是否绝经( ①是，②否)；(20) 患者的妇科症状表现(①外阴瘙痒，②白带异常，③白带异味，④其他)；(21) 患者是否有宫颈癌家族史(①有，②无)；(22) 配偶的疾病史(①前列腺疾患，②鼻咽癌，③不清楚)；(23) 患者的妇科疾病史(①子宫肌瘤，②卵巢囊肿，③卵巢癌，④产褥感染，⑤手术宫颈损伤)；(24) 子宫是否做过治疗(①否，②电灼，③激光，④冷冻，⑤Leep 刀电凝)。

1.3 统计学方法

采用 SPSS 21.0 软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示，比较用采用 χ2检验和Logistics 回归模型分析。P＜0.05为差异有统计学意义，OR＞1 为危险因素，OR＜1 为保护因素。

2 结果

2.1 HPV 基因型型别分布

HPV 基因型检测结果显示：兰州市妇幼保健院就诊的148 例宫颈癌患者中，HPV 检测结果阳性的病例为74 例，出现 的 基 因 型 分 别 为68 型、66 型、61 型、59 型、58 型、55 型、53 型、52 型、45 型、40 型、33 型、31 型、18 型 和16 型。单 一感染HPV 62 例 (83.8%)，依次为16 型33 例(44.6%)，58 型9例(12.2%)，18 型7 例(9.5%)，52 型和31 型各4 例(各5.4%)，55 型和33 型各2 例(各2.7%)，66 型 1 例(1.4%)；混合感染12 例(16.2%)，其中高危型多重感染4 例 (33.3%)，高危型和低危型混合感染8 例(66.7%)。

2.2 宫颈癌HPV 感染相关因素的单因素分析

通过对《宫颈癌相关危险因素调查表》中设计的24 个调查因素进行χ2检验分析，结果发现，与患者的职业、文化程度、收入、被动吸烟、性伴侣数、性生活习惯、避孕方式、目前的怀孕情况和妇科疾病是HPV 检测阳性的宫颈癌患者的高危因素，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 宫颈癌HPV 感染的相关因素分析(n/%)

2.3 宫颈癌HPV 感染多因素非条件Logistic 回归分析

将上述χ2检验检测所得的P＜0.05 的指标：患者的职业、患者的文化程度、患者的收入、患者的被动吸烟史、患者的性伴侣数、患者的性生活习惯、患者的避孕方式、患者目前的怀孕情况和患者的妇科疾病史等9 个危险因素作为自变量，HPV 感染作为因变量进行二分类 Logistic 回归分析。结果发现，患者的伴伴侣数、性生活习惯、避孕方式和妇科疾病这 4个因素是 HPV 检测阳性宫颈癌患者的危险因素。见表2。

表2 宫颈癌HPV 感染的相关因素的 Logistic 回归分析

续表1

3 讨论

宫颈癌是由于癌基因被激活、病变自低度向高度进展而最终恶化形成的一类鳞状上皮内瘤，是女性生殖器官最常见的恶性肿瘤[5]。有研究发现[6]，持续的HPV 感染是宫颈癌发病的主要诱因，并已经证实HPV 感染率与病变程度呈正相关性。HPV 是一种具有种属特异性为的双链闭环球形DNA 病毒，目前在120 种被确认HPV 的基因型中，与生殖道感染、内皮病变密切相关的HPV 基因型达到30 多种，并将这30 多种HPV 基因型根据与疾病的关系又分为高危型和低危型。国际癌症组织研究证明[7]，中国宫颈癌患者以HPV16、18、31、52、58 基因型最为常见。我国相关研究发现，与宫颈癌密切相关的HPV 基因型HPV16、18、58、31、45 等[8-9]，并且其宫颈癌HPV 的感染性存在明显的地区差异性[10]。本研究对兰州市妇幼保健院就诊的148 例宫颈癌患者进行了HPV 筛查，其检测结果阳性的病例为74 例，出现的HPV 基因型分别为HPV68、66、61、59、58、55、53、52、45、40、33、31、18 和16，其中以HPV16、58、18、52 和31 为主，本研究结果与国际癌症组织研究的文献报道是一致的，与有些文献研究存在一定的差异，再次说明宫颈癌HPV 的感染性存在区域差异。

虽然已经明确HPV 感染与宫颈癌的发生是密切相关的。但是，在HPV 引发宫颈癌的发生、发展中，需要许多其他因素协同[11-12]。有研究报道，HPV 感染率与首次性生活年龄小、多个性伴侣、人工流产及孕次等有相关性，并证实这些危险因素也存在地区差异。本研究宫颈癌HPV 感染相关因素的单因素分析结果发现，患者的职业、文化程度、收入、被动吸烟、性伴侣数、性生活习惯、避孕方式、目前的怀孕情况和妇科疾病是HPV 检测阳性的宫颈癌患者的高危因素；宫颈癌HPV感染多因素非条件Logistic 回归分析结果进一步发现，患者的性伴侣数、性生活习惯、避孕方式和妇科疾病这 4 个因素是HPV 检测阳性宫颈癌患者的危险因素，与有些文献研究报道略有差异。

综上所述，性伴侣数、性生活习惯、避孕方式和妇科疾病有可能是HPV 感染发生并持续存在的关键危险因素，也有可能是造成宫颈癌患者生殖器局部免疫力低下的主要原因。宫颈癌患者生殖器局部免疫力低下又进一步极大地减弱了机体对HPV 病毒感染的抗感染能力，使HPV 感染的风险大大增加。因此，倡导健康的性生活方式，减少性伴侣数，尽量避免或远离HPV 感染相关危险因素是减少宫颈癌发生的关键举措。