微小RNA- 365 在高血压心肌肥厚患者中的表达及其与血压、左心室质量指数的相关性

周序锋 邹良英 黄 鹤 钟文婷 王 碑

1.赣南医学院第一附属医院心内科，江西赣州 341000；2.赣南医学院第一附属医院超声医学科，江西赣州 341000

心肌肥厚是多种心血管疾病共有的病理特征之一，源于长期机械刺激、内分泌因子改变或机体代谢紊乱，促使心脏超负荷工作而发生的损伤性反应[1-4]。有研究显示[5-6]，病理性心肌肥厚是心血管疾病发生及死亡的独立危险因素，其病情严重程度对进行性心脏疾病具有重要预测作用。临床已发现许多重要参与调控心肌肥厚发生、发展的信号通路，但其发生的分子机制还有待深入研究，因此探索新的心肌肥厚调控基因，为心肌肥厚治疗寻找新的靶标，对防治心脏疾病有重要意义。微小RNA（microRNA，miRNA）是一类长度为19~23 nt 的内源性单链非编码微小RNA 分子，其表达或功能异常可介导病理性心肌肥厚的观点已得到普遍认同[7-8]。 有研究表明[9]，miRNA-365 在病理性心肌肥厚进展过程中也发挥着重要作用， 但目前miRNA-365 的表达及功能研究多集中在动物模型上，较少在临床患者中研究。 前期动物预实验已明确miRNA-365 对于心肌肥厚的作用机制，基于此，本研究进一步探究心肌肥厚患者中miRNA-365 表达水平与临床心肌肥厚的相关性，旨在为临床治疗心肌肥厚寻找新的诊断及治疗靶点。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020 年6 月至2021 年2 月赣南医学院第一附属医院收治的100 例高血压患者为研究对象，其中高血压合并左心室肥厚的患者分为观察组（50 例），单纯高血压患者分为对照2 组（50 例），另选取同期进行体检的健康者50 名为对照1 组。 观察组中，男26 例，女 24 例；年龄 43~61 岁，平均（50.06±5.46）岁；平均受教育年限（9.4±3.4）年；平均病程时间（4.5±1.3）年。 对照 2 组中，男 24 例，女 26 例；年龄 42~60岁，平均（50.10±5.50）岁；平均受教育年数（8.6±2.8）年；平均病程时间（4.8±1.5）年。 对照 1 组中，男 25 例，女 25例；年龄 41~62 岁，平均（51.00±5.50）岁；平均受教育年数（8.5±2.7）年。 三组的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。 本研究获取医院医学伦理委员会审查批准。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准：①符合《中国高血压防治指南》[10]中相关诊断标准； ②左心室质量指数， 男性＞115 g/m2，女性＞95 g/m2；③所有研究对象自愿签署知情同意书。

排除标准：①肥厚型、限制型心肌病或继发性高血压者；②合并中重度瓣膜病、甲状腺功能异常者；③合并恶性心律失常、先天性心脏病者。

1.3 方法

受试者均进行动态血压、诊室血压检测及心脏彩超检查，记录相关参数数据。采集受试者外周静脉血，采用RT-PCR 法检测 miRNA-365 表达。 依据 Trizol试剂盒（上海酶联生物科技有限公司）说明书提取细胞总RNA，逆转录总RNA 至cDNA，之后行RT-PCR（SYBR Green 法），以 U6 为内参。 miRNA-365 正向引物序列：5′-TAATGCCCCTAAAAATCCTTAT-3′；反向引物序列：5′-CACTTCCTCAGCACTTGTTGGTAT-3′。

诊室血压检测采用听诊法用水银柱血压计测得血压读数， 动态血压采用动态血压测量仪进行测量，设置定时测量，白天每15~30 分钟1 次，夜间睡眠，每30~60 分钟1 次；日间有效血压测量次数至少为14次，夜间7 次。 左心室质量指数为左心室质量除以体表面积。

1.4 观察指标

①记录并比较三组的动态血压、日间血压、诊室血压及左心室质量指数。 ②比较三组的miRNA-365表达情况。 ③分析miRNA-365 表达与血压参数及左心室质量指数的相关性。

1.5 统计学分析

采用SPSS 24.0 统计学软件进行数据分析， 计量资料用均数±标准差（）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK-q 检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验；相关性分析采用Pearson 检验。 以 P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组动态血压、日间血压、诊室血压及左心室质量指数的比较

观察组动态血压（24 h 平均收缩压、舒张压、脉压）、日间血压（白天收缩压、舒张压、脉压）、诊室血压（诊室收缩压、舒张压、脉压）及左心室质量指数均高于对照1 组、对照 2 组，差异有统计学意义（P＜0.05），对照 2组动态血压、日间血压、诊室血压及左心室质量指数均高于对照 1 组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1~4）。

表1 三组动态血压的比较（mmHg，）

表1 三组动态血压的比较（mmHg，）

与对照 1 组比较，aP＜0.05；与对照 2 组比较，bP＜0.05

组别 24 h 平均收缩压 24 h 平均舒张压 24 h 平均脉压对照 1 组（n=50）对照 2 组（n=50）观察组（n=50）F 值P 值119.21±10.01 152.17±11.37a 158.29±10.30ab 197.506<0.001 80.16±6.37 86.27±8.06a 89.90±8.51ab 20.423<0.001 93.17±8.19 108.24±9.71a 111.36±9.40ab 56.835<0.001

表2 三组日间血压的比较（mmHg，）

表2 三组日间血压的比较（mmHg，）

与对照 1 组比较，aP＜0.05；与对照 2 组比较，bP＜0.05；1 mmHg=0.133 kPa

组别 白天收缩压 白天舒张压 白天脉压对照 1 组（n=50）对照 2 组（n=50）观察组（n=50）F 值P 值121.26±10.13 154.27±11.56a 159.76±10.51ab 187.624<0.001 82.40±5.20 90.16±8.14a 93.17±8.90ab 26.849<0.001 95.35±7.66 111.53±9.85a 115.37±9.70ab 67.791<0.001

表3 三组诊室血压的比较（mmHg，）

表3 三组诊室血压的比较（mmHg，）

与对照 1 组比较，aP＜0.05；与对照 2 组比较，bP＜0.05；1 mmHg=0.133 kPa

组别 诊室收缩压 诊室舒张压 诊室脉压对照 1 组（n=50）对照 2 组（n=50）观察组（n=50）F 值P 值123.34±9.34 155.29±11.59a 158.36±10.07ab 174.679<0.001 83.20±6.08 90.27±8.02a 94.29±9.01ab 25.913<0.001 96.58±7.71 111.94±9.80a 115.65±9.54ab 62.208<0.001

表4 三组左心室质量指数的比较（）

表4 三组左心室质量指数的比较（）

与对照 1 组比较，aP＜0.05；与对照 2 组比较，bP＜0.05

组别 例数 左心室质量指数对照1 组对照2 组观察组F 值P 值50 50 50 97.84±5.27 104.24±4.21a 123.28±5.06ab 369.433＜0.001

2.2 三组miRNA-365 表达情况的比较

观察组miRNA-365 表达水平高于对照1 组、对照2 组，对照2 组miRNA-365 表达水平高于对照1组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表 5）。

表5 三组 miRNA-365 表达情况的比较（）

表5 三组 miRNA-365 表达情况的比较（）

与对照 1 组比较，aP＜0.05；与对照 2 组比较，bP＜0.05

组别 例数 miRNA-365 表达对照1 组对照2 组观察组F 值P 值50 50 50 0.84±0.16 1.02±0.27a 1.22±0.31ab 27.852＜0.001

2.3 miRNA-365 表达与血压参数及左心室质量指数的相关性

miRNA-365 表达与观察组动态血压、 左心室质量指数均呈正相关（P＜0.05），与日间血压、诊室血压均无明显相关性（P＞0.05）（表 6）。

表6 miRNA-365 表达与观察组血压参数及左心室质量指数的相关性

3 讨论

心肌肥厚是一种基因异常而导致的心肌病理性增厚，可发生于各个年龄段，人群发生率约为0.2%，临床有胸闷、头晕、心前区不适等症状，部分患者出现心力衰竭、房颤等严重并发症，更有甚者出现心源性猝死，不利于个体生命健康[11-12]。 研究显示[13]，心肌肥厚严重程度对于进行性心脏病具有重要预测作用，且病理性心肌肥厚最终发展为心力衰竭是导致心肌肥厚患者死亡的重要原因。目前临床对心肌肥厚病理机制尚未完全明确，为心肌肥厚诊治寻找新的靶点仍是临床试验重点研究方向。

研究证实[14]，心肌细胞自噬与心肌肥厚密切相关， 临床可通过调控自噬相关miRNA 表达影响心肌肥厚。 miRNA 通过与相关下游靶基因结合，调控细胞基因转录后水平，参与细胞增殖、分化等生理过程，其表达或功能异常可介导病理性心肌肥厚的观点已得到普遍认同。 miRNA-365 是miRNA 的重要成员之一，既往多被认为参与恶性肿瘤发生及发展。 新近研究表明[15]，miRNA-365 可能在病理性心肌肥厚进展中发挥重要作用。 前期动物预实验已明确miRNA-365对于心肌肥厚的作用机制，此次在前期动物实验的基础上，进一步去探究在临床心肌肥厚患者中miRNA-365 的表达水平与心肌肥厚的相关性， 结果显示，miRNA-365 表达与高血压合并心肌肥厚患者动态血压、左心室质量指数均呈正相关，表明miRNA-365 表达在高血压心肌肥厚病理机制中有重要作用，猜测源于miRNA-365 在RNA 聚合酶作用下形成较长的茎环结构，在相关复合体作用下形成含有核苷酸的发夹状RNA，经复合物作用被转运出胞核，作为转录因子中重要的靶分子在细胞功能调控中发挥核心作用，进而影响疾病进展。

综上所述，动态血压、左心室质量指数可辅助诊断高血压心肌肥厚疾病，且高血压心肌肥厚患者机体miRNA-365 表达与动态血压、 左心室质量指数呈正相关，可为临床诊治高血压合并心肌肥厚提供新的治疗靶点。