不同品种百合炮制品总皂苷含量比较

李辰钰 李佳琪 颜瑞辰 李晨光

（吉林农业科技学院中药学院，吉林 吉林 132101）

百合作为一种药食两用植物，应用历史超过2 000年，其主要来源为百合科植物卷丹（Lilium lancifoliumThumb.）、百合（Lilium browniiF.E.Brown var.viridulumBaker）或细叶百合（Lilium pumilumDC.）的干燥肉质鳞叶［1］。卷丹是百合科百合属多年生草本球根植物，其因火红的花色反卷的花瓣而享有卷丹的美名，被称为“百合之冠”。细叶百合为百合科百合属多年生草本植物，花色美丽娇艳具有观赏价值，是抗旱性优良的育种品种。百合中含有薯蓣皂苷、多糖类、生物碱等多种生物活性成分，具有宁心安神，促进血液循环，美容养颜等功效［2］。百合皂苷类型多为甾体皂苷［3］，具有抗抑郁，镇静催眠，抑制人前列腺癌细胞增殖和侵袭、抗炎抑菌等作用［4］。

百合炮制方法有炙制、熬制、蜜制、炒制和蒸制。百合主要分布于湖南、四川、河南、江苏和浙江等省，野生资源较少。周秀玲等运用分光光度法，用浓硫酸作为显色剂测定不同品种百合中多糖和皂苷的含量，结果表明，卷丹中皂苷含量最高［5］。傅春燕等人采用香草醛-高氯酸显色测定10个批次龙牙百合中总皂苷含量，结果表明，该方法准确、可靠、稳定性好，可作为龙牙百合皂苷定量分析的有效方法［6］。高彦宁等以高氯酸作为显色剂在408 nm处测定皂苷含量，来源不同的百合总皂苷含量有所差异，但江苏南通卷丹中总皂苷含量最高［7］。贺晓龙等对药用植物百合传统与现代的提取方法进行概述并进行细致的比较，结果发现，传统提取方法研究得更加透彻，提取率更高，其中是会浪费许多化学试剂而污染空气环境，而新方法污染更少、省时省力，但提取率低一些［8］。张璐等运用超声波法与酶解法相结合提取百合总皂苷并确定了最佳提取工艺，果胶酶的合理使用对百合中不溶解物质淀粉和蛋白质有一定水解作用，提高了提取物得率，超声波的强烈振荡有助于百合有效成分溶出，酶解法对温度有一定的要求，在低温度下进行操作节省溶剂的同时节省能源［9］。何郁菲等对比水浴回流法和超声波辅助回流法提取百合总皂苷，结果表明，超声波辅助回流提取法明显优于水浴回流提取法，超声波辅助回流提取法用时较短，避免药材因过长时间加热对有效药用成分的不良影响，同时杂质的溶解量降低，更有益于人体健康［10］。罗林明等对3种药用植物百合进行化学成分及药理作用方面的概括总结，百合主要含有甾体皂苷、甾醇、酚酸甘油酯、黄酮、苯丙素、生物碱和多糖等化学成分［11］。目前，对百合不同炮制品总皂苷含量的研究罕有报道。鉴于此，笔者使用香草醛-高氯酸法测定薯蓣皂苷含量，超声波辅助提取不同品种百合炮制品中的总皂苷，通过统计分析百合不同品种及其各炮制品中总皂苷的含量差异，为百合的栽培、育种及开发利用提供相应的理论指导［12］。

1 材料与方法

1.1 试验材料

龙牙百合（Lilium browniivar.viridulum）购于湖南邵阳，兰州百合（Lilium davidiivar.willmottiaeE.H.Wilson Raffil）购于甘肃兰州，卷丹（Lilium lancifoliumThumb.）和细叶百合（Lilium pumilumDC.）采自吉林省吉林市左家镇，经中药学院马尧教授鉴定确认（样品见图1）。

图1 百合样品

薯蓣皂苷标准品购置于成都瑞芬思生物科技有限公司，其余试剂乙醇、香草醛、醋酸、高氯酸均为分析纯。

1.2 试验仪器

试验所需仪器有上海精科可见分光光度计721G-100、日本岛津电子天平AUW120D、宁波新艺SB-5200DT超声波清洗机。

1.3 试验方法

1.3.1 标准溶液制备。精密称定薯蓣皂苷标准品5.2 mg，置于25 mL容量瓶中，加80%乙醇定容，摇匀，既得0.208 mg/mL标准品溶液。

1.3.2 标准曲线测定。分别精密吸取标准品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL和3.0 mL置于25 mL具塞试管中，挥干溶剂，加入2.5%香草醛-冰乙酸2 mL、高氯酸5 mL，摇匀，在80℃恒温水浴中显色25 min后取出，放入常温水浴中停止反应，再加入5 mL冰乙酸混匀。将2.5%香草醛-冰乙酸7 mL和高氯酸5 mL作为空白对照，使用分光光度计在460 nm波长处测定吸光度值，进行线性回归，得到回归方程［13］。

1.3.3 不同百合炮制品制备。①净百合：新鲜百合掰瓣洗净，筛去杂质，放入烤箱中60℃烘至脆硬状态。②蜜百合：取净百合置于热锅中，文火翻炒至表面微微泛黄，喷淋用热水化开的炼蜜，继续翻炒至干燥不黏手即可出锅。每100 kg百合使用炼蜜20 kg［14］。③蒸百合：生百合洗净分瓣置于笼屉中，大火烧水烧开后将笼屉架于水上，转小火，保持水微沸状态，蒸至百合内里熟透［15］，掰开后呈磨砂质感，冷却后放入烘箱，烘干至脆硬状态。

1.3.4 百合总皂苷提取。①浸提法：称取兰州百合净制品粉末（过0.28 mm筛，60℃烘干）5 g，在25 mL的80%乙醇中浸泡12 h，滤过粉末定容至25 mL容量瓶中（见图2）。

图2 浸提操作示意图

②超声法：称取兰州百合净制品粉末（过0.28 mm筛，60℃烘干）5 g，使用80%乙醇25 mL在55℃条件下超声提取30 min，取出后过滤到25 mL容量瓶中并定容。

1.3.5 总皂苷含量测定。向具塞试管加入3 mL待测液，挥干溶剂，再加入2.5%香草醛-冰乙酸2 mL、高氯酸5 mL，摇匀，在80℃恒温水中显色25 min后取出放入常温水浴中停止反应，再加入冰乙酸5 mL混匀。以2.5%香草醛-冰乙酸7 mL、高氯酸5 mL作为空白对照，使用分光光度计在460 nm波长处测定吸光度值，以回归方程计算待测液浓度。

2 结果与分析

2.1 标准曲线绘制

以吸光度为横坐标、百合总皂苷浓度为纵坐标，回归处理后得到回归方程Y=1.431X-0.017 1，R2=0.999 2（见图3），表明线性关系良好。

图3 百合总皂苷标准曲线

2.2 不同提取方法对百合总皂苷含量的影响

取兰州百合净制品粉末（60℃烘干，过0.28 mm筛）5 g，根据1.3.4试验方法分别检测各个样品，按照回归方程计算结果，如表1所示。结果表明，采用浸提法提取兰州百合平均总皂苷含量为0.20 mg/g，超声辅助提取兰州百合平均总皂苷含量为1.10 mg/g，后者明显高于前者，表明超声法提取效果明显优于浸提法，后续试验采用超声辅助法提取不同炮制品百合总皂苷。

2.3 不同品种百合炮制品的总皂苷含量差异

采用超声法对百合样品进行处理，并使用1.3.2中的显色条件分别对样品进行显色处理。按照回归方程进行计算，得到样品总皂苷含量，测定结果见表2。就净制品而言，不同品种百合中卷丹的总皂苷含量为3.19 mg/g，明显高于其他品种，龙牙百合为2.96 mg/g，细叶百合为1.69 mg/g，兰州百合为1.48 mg/g。生产上卷丹种植面积较广，临床入药较为普遍。兰州百合的皂苷含量较低，日常生活中多制作药膳食用或作为保健品使用，不适宜入药。同种百合不同种炮制品的总皂苷含量存在差异，蜜制品总皂苷含量最高，平均值为2.40 mg/g，其次是净制品，平均值为2.33 mg/g，蒸制百合的总皂苷含量最低，平均值为1.90 mg/g。蜜制百合总皂苷含量明显高于其他2种，蒸制品总皂苷含量相较于净制品略有流失，原因可能是由于蒸制品加工过程中总皂苷部分溶解于水蒸气而损失，而蜜制加工能有效减少百合中总皂苷的流失，炼蜜中糖与皂苷元结合，从而使总皂苷含量上升。

表2 百合不同炮制方法的总皂苷含量比较 mg/g

3 讨论

不同品种百合的不同炮制方法之间的总皂苷含量存在差异，以蜜制卷丹的总皂苷含量最高，蒸制兰州百合的总皂苷含量最低；蜜制品的总皂苷含量明显高于蒸制品和净制品，卷丹的总皂苷含量明显高于细叶百合、龙牙百合和兰州百合。

试验结果表明，传统方法蜜制百合对于增加总皂苷含量有着明显的效果；在日常应用中，卷丹适合作为中药材使用，细叶百合和龙牙百合适合作为药食同源或者保健品等对药用成分要求较低的原材料，而兰州百合口感鲜甜，不似其他品种药材味道苦涩，更适用于制作药膳、保健品或者单纯作为蔬菜使用。

目前市场上以卷丹和兰州百合的销售量最高，其中卷丹药用效果最佳，兰州百合口感最佳，而细叶百合和龙牙百合由于药效和口感都较次而没有太大的市场，且在未来的市场中这一现象还会持续出现。