生长停滞特异性蛋白6与hs-CRP、cTnI对急性心肌梗死的诊断价值

刘铁红，董琳琳，高阿妮，胡国玲

（大连大学附属中山医院老年科，辽宁 大连 116001）

急性心肌梗死（AMI）是临床常见危重症，以急性循环功能障碍、持续胸痛、休克、心肌酶谱及心电图异常等主要改变[1]。目前，临床多采用心电图、实验室指标结合临床表现对AMI进行诊断，但仍缺乏早期判断AMI发生的敏感指标。生长停滞特异性蛋白6（GAS6）属于维生素K依赖蛋白家族成员之一，与受体酪氨酸激酶家族成员结合后发挥调节细胞增殖、凋亡及炎性反应等多种生物学作用[2]。有研究表明，GAS6可通过调控Toll样受体及其细胞因子的分泌，参与动脉粥样硬化炎症反应过程[3]。另有研究显示，GAS6在冠心病患者血清中表达异常升高[4]。超敏C反应蛋白（hs-CRP）、心肌肌钙蛋白（cTnI）是临床评估AMI的常用实验室指标[5]。为此，本研究以AMI、稳定心绞痛患者及健康受试者为研究对象，分析导致AMI发生的危险因素，重点探讨GAS6与hs-CRP、cTnI的相关性。

1 对象和方法

1.1 研究对象样本含量计算公式：n=Ψ2（Σsi2）/［Σ（-xi--x）2/（k-1）］，其中k为研究组数，-xi、si分别为各组均数、标准差估计值，-x=Σ-xi/k，确定AMI患者、稳定心绞痛患者及健康志愿者分别为99例、94例、54例，按照退出/失访率10%计算后，3组最终纳入110例、105例、60例，以保证样本量充足。选择2020年1月—2021年2月大连大学附属中山医院老年科收治的110例AMI患者和105例稳定心绞痛患者为研究对象，分别设为AMI组、稳定心绞痛组。AMI组男性79例，女性31例，平均年龄（59.71±6.38）岁；稳定心绞痛组男性71例，女性34例，平均年龄（60.35±9.57）岁；选择同期我院体检中心健康志愿者60例对照组，男性39例，女性21例，平均年龄（61.25±10.60）岁。纳入标准：AMI组、稳定心绞痛组患者分别符合中华医学会制定的《急性冠脉综合征急诊快速诊疗指南》[6]和《稳定性冠心病诊断与治疗指南》[7]中的相应诊断标准；AMI患者发病2 h内入院；所有受试者对研究知情并签署知情同意书。排除标准：接受经皮冠状动脉介入治疗者；溶栓治疗者；罹患恶性肿瘤者；合并急慢性炎症性疾病；近1个月服用抗炎药物者；合并严重肝肾功能不全者；伴有心脏瓣膜病、心力衰竭或其他心脏疾病者；精神病史者；哺乳期或妊娠期女性；参与其他研究者。本研究获得医院伦理委员会审批通过。

1.2 标本采集AMI患者入院24 h内采集空腹血5 mL，稳定心绞痛患者及健康志愿者采集清晨空腹血5 mL，室温静置30 min后，离心（3 500 r/min，离心半径12 cm，8 min）收集上层血清，6 h内检测。

1.3 血清GAS6、hs-CRP、cTnI水平检测取待测血清样品，采用GAS6酶联免疫吸附测定试剂盒（双抗体一步夹心法）、hs-CRP测定试剂盒（免疫比浊法），严格按照说明书步骤操作，检测血清GAS6、hs-CRP水平，试剂盒均购自南京卡米洛生物工程有限公司。采用mini-VIDAS全自动免疫荧光酶标仪（法国，梅里埃）及其配套试剂盒检测血清中cTnI含量。

1.4 基线资料收集采用查阅病历或问卷方式收集受试者临床资料，包括性别、年龄、体质指数（BMI）、吸烟及饮酒史、合并症，冠脉Gensini评分[8]。实验室检测指标包括高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）、白细胞计数（WBC）、血肌酐（Cr）、心肌肌钙蛋白（cTnI，参考范围0~0.3 μg/L）、脑钠肽（BNP）等。参照冠脉Gensini评分标准[8]对研究对象的冠状动脉病变进行评分，Gensini评分=狭窄率评分×病变部位系数，狭窄率和病变部位系数评估见表1。

表1 冠脉Gensini评分

1.5 统计学分析采用SPSS23.0统计软件分析数据，不符合正态分布的计量资料用M（P25，P75）表示，并采用Mann-Whitney U非参数检验；符合正态分布的计量资料均以均数±标准差（±s）表示，多样本比较采用单因素方差分析，两组比较采用SNK-q检验；计数资料以例数或百分比表示，多组间比较采用整体χ2检验，进一步两两比较采用χ2分割检验；采用Logistic回归分析法分析影响AMI发生的危险因素；采用受试者工作特征曲线（ROC）分析GAS6对AMI的诊断价值，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 3组基础资料的比较对照组、稳定心绞痛和AMI组LDL-C、WBC、cTnI、BNP、GAS6、hs-CRP水平比较，差异有统计学意义（P<0.05）；AMI组LDL-C、WBC、cTnI、BNP、GAS6、hs-CRP水平高于稳定心绞痛组和对照组，Gensini评分高于稳定心绞痛组，差异均有统计学意义（P<0.05）；稳定心绞痛组WBC、cTnI、BNP、GAS6、hs-CRP水平高于对照组（P<0.05），而稳定心绞痛组与对照组LDL-C水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 AMI组、稳定心绞痛组、对照组临床资料的比较

2.2 AMI的危险因素分析根据单因素分析结果，以 可能导致AMI发生的因素为自变量进行赋值，包括Gensini评 分、LDL-C、WBC、cTnI、BNP、GAS6、hs-CRP，均赋值为连续变量，以是否发生AMI为因变量（发生=1，未发生=0），进行Logistic回归分析。结果显示，Gensini评 分[OR=2.119(1.186~3.785)]、cTnI[OR=2.264(1.267~4.043)]、BNP[OR=2.248(1.137~5.463)]、GAS6[OR=2.351(1.316~4.200)]、hs-CRP[OR=4.465(2.380~6.401)]均是导致AMI发生的独立危险因素。见表3。

表3 AMI的危险因素分析

2.3 GAS6、hs-CRP、cTnI对AMI的诊断价值分析ROC分析结果显示，GAS6、hs-CRP、cTnI诊断AMI最佳截断点分别为15.75 μg/L、13.74 mg/L、1.29 μg/L，ROC曲线下面积（AUC）分别为0.878(0.827~0.919)、0.863(0.810~0.906)、0.931(0.889~0.961)，GAS6与cTnI、hs-CRP比较，差异无统计学意义（Z=1.675，P=0.094；Z=0.551，P=0.582）；hs-CRP与cTnI比较，差异有统计学意义（Z=2.732，P=0.006）。见表4和图1。

图3 GAS6与hs-CRP、cTnI诊断AMI的ROC曲线

表4 GAS6与hs-CRP、cTnI对AMI的诊断价值

3 讨论

AMI已成为危害人们生命健康的主要心血管疾病之一，其发病机制复杂，涉及冠状动脉粥样硬化、炎性反应、氧化应激等多种机制，各机制相互作用，促进疾病的发生和发展[9-10]。AMI表现为急性闭塞性血流中断、心肌局部持续缺血，心肌细胞损伤，细胞膜通透性改变，细胞内代谢产物释放至外周循环血[11]。AMI病情危重、死亡风险高，因此，寻找外周循环血中可反映病情发生和发展的血清标志物，对临床AMI的诊治十分重要[12]。

GAS6主要分布于血管内皮细胞、平滑肌细胞等细胞中，参与细胞中多种信号转导通路，在细胞增殖、机体炎症反应等多种生物学过程中发挥重要调控作用[13]。GAS6属于分泌型蛋白，在细胞周期的生长停滞期高表达，G0期表达量升高约30倍[14]。有研究发现，GAS6可通过自分泌和旁分泌方式参与缺氧缺血性心脏病大鼠心肌细胞凋亡过程[15]。Caldentey等[16]研究发现，ST段抬高心肌梗死患者血清GAS6水平异常升高，且参与左心室重构的发生发展过程。Holden等[17]对接受冠状动脉造影的门诊患者研究发现，糖尿病、肥胖等具有不良心血管风险特征的患者血清GAS6水平更高，且GAS6与动脉斑块高度和斑块总面积相关，提示GAS6在动脉粥样硬化形成过程中发挥重要调控作用。本研究发现，AMI组cTnI、BNP、GAS6、hs-CRP水平及Gensini评分均高于稳定心绞痛组，提示GAS6在AMI患者血清中高表达。上述研究与本研究结果均提示，AMI发病导致心肌细胞损伤，心肌细胞凋亡率升高，使GAS6大量释放进行外周血液循环，说明GAS6可能参与心室重构、动脉粥样硬化形成等过程。

为排除混杂因素的影响，本研究经Logistic回归分析，Gensini评分、cTnI、BNP、GAS6、hs-CRP均是导致AMI发生的独立危险因素。GAS6可促进血管平滑肌细胞分泌促生长因子，从而利于血管平滑肌细胞增殖，参与动脉粥样硬化形成及血管狭窄的发生。Chen等[18]动物实验发现，GAS6基因敲除小鼠模型较野生型小鼠细胞衰老加快，血管重塑加快，提示GAS6与血管僵硬有关。血管损伤后，血管平滑肌细胞增殖、聚集于血管结缔组织是引起血管重塑的主要原因，也是导致AMI发生的主要原因[19]。因此，AMI患者血清GAS6表达上调，增加了AMI发生风险。hs-CRP属于急性时相反应蛋白，cTnI是反应心肌损伤的特异性指标，AMI发病后异常升高，参与病情进展，hs-CRP和cTnI均是评估心肌损伤的重要指标，同时也是传统诊断AMI的实验室血清指标。此外，本研究提示，GAS6与cTnI对AMI的诊断效能相当，且优于hs-CRP。本研究中cTnI、hs-CRP对AMI的诊断效能与既往报道相近[20]。说明临床中可结合GAS6评估患者病情，为AMI的临床诊治提供参考。

综上所述，GAS6在AMI患者中异常高表达，且是AMI发生的独立危险因素，与AMI患者病情发展密切相关，可为临床AMI的诊断及治疗提供参考价值。