血清Asialo-α1-酸性糖蛋白联合FXYD6 蛋白过表达对肝硬化预后的意义分析

蔡宇，邱新平

（辽宁省健康产业集团阜新矿总医院消化内科，辽宁 阜新 123000）

肝硬化是一种以弥漫性纤维化、假小叶和再生结节形成为特征的进行性发展的慢性肝病，预后不良，代偿期、失代偿期肝硬化的1 年中位生存率分别为95%、61%[1]。目前临床评估肝硬化预后最常使用的是Child—Pugh 评分模型，但易受主观和客观因素的影响，尚不能完全满足临床需求。无唾液酸α1-酸性糖蛋白（Asialo-α1-acidglycoprotein，AsAGP）是一种急性期血浆α-球蛋白糖蛋白，主要在肝脏合成并分泌进入循环，具有抗炎和免疫调节作用。有研究表明[2]，慢性肝病患者血清AsAGP 水平异常升高。FXYD6 是一种Ⅰ型单跨膜蛋白，是钠钾泵的重要调节亚基。研究表明[3]，FXYD6 与包括肝癌在内的多个恶性肿瘤相关。目前血清AsAGP 和FXYD6 与肝硬化的关系尚不明确，基于此，本研究主要分析血清AsAGP 和FXYD6 对肝硬化预后的预测价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2017 年1 月—2020 年12 月我院收治的150 例肝硬化患者临床资料，其中男90 例，女60 例，年龄41～82 岁，中位年龄61 岁；乙型肝炎肝硬化110 例，丙型肝炎肝硬化26 例，酒精性肝硬化18 例，自身免疫性肝硬化6 例；代偿期50 例，失代偿期100 例；Child-PughA 级36 例，Child-PughB 级55 例，Child-PughC 级59 例；院内并发症：感染64 例，消化道出血30 例，肝性脑病11 例。纳入标准：①经临床、影像学及实验室检查等明确诊断为肝硬化；②具有完整的临床资料；③经本院伦理委员会批准，患者对本研究知情同意。排除标准：①原发性肝癌；②合并严重的心、脑、肾、肺等其他脏器组织原发性疾病。

1.2 方法

所有数据均取患者住院后的首次检查结果，包括性别、年龄、体质量指数（BMI）、疾病类型、病程分期、Child-Pugh 分级、并发症、实验室指标[采用全自动生化分析仪（日立7600）检测丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）等肝功能指标，采用ELISE 法检测血清甲胎蛋白（AFP）、血清Ⅲ型前胶原氨基端肽（PCIII）、透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、血清AsAGP、血清FXYD6 蛋白]。根据血清AsAGP、FXYD6 蛋白水平将患者分为低水平组和高水平组。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0 统计软件分析处理数据，计量资料经正态性检验，符合正态分布用（±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验，不符合正态分布用中位数（四分位数）表示，两组间比较采用Mann-WhitneyU 检验。分类计数资料采用%表示，组间比较采用χ2检验，等级资料比较采用Ridit 法。生存分析采用Kaplan-Meier法，生存比较用Log-rank 检验。绘制受试者工作特征曲线（ROC），计算曲线下面积（AUC），评价血清AsAGP、FXYD6 蛋白水平预测肝硬化患者预后的效能。以P＜0.05 表示有统计学意义。

2 结果

2.1 血清AsAGP、FXYD6 蛋白水平与基本临床资料间的关系

患者血清AsAGP、FXYD6 蛋白水平均符合正态分布， 分别为（1.53±0.62）μg/ml、（0.74±0.39）ng/ml，中位数分别为1.51 μg/mL、0.70 ng/ml。AsAGP 高水平组感染发生率及PCIII 水平与低水平组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），而两组性别、年龄、BMI、疾病类型、病程分期、其他并发症发生率及实验室指标等比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。FXYD6 高水平组病程分期、Child-Pugh 分级、ALT、HA 与低水平组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），而两组性别、年龄、BMI、疾病类型、并发症发生率及其他实验室指标等比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），见表1、表2。

表1 不同血清AsAGP 水平表达患者基本临床资料比较[（±s），n（%）]

表1 不同血清AsAGP 水平表达患者基本临床资料比较[（±s），n（%）]

指标低水平组（n=64）高水平组（n=86）t/Z/χ2 值P 值性别男41（64.06）49（56.88）0.0030.960女23（35.94）37（43.02）年龄（岁）≤5025（39.06）38（44.19）0.3950.529＞5039（60.94）48（55.81）BMI（kg/m2）23.67±0.7423.34±0.792.5990.010疾病类型乙型肝炎肝硬化43（67.19）57（66.28）丙型肝炎肝硬化10（15.63）16（18.60）酒精性肝硬化7（10.94）11（12.79）自身免疫性肝硬化4（6.25）2（2.33）病程分期代偿期26（40.63）24（27.91）0.2410.763 2.6710.102失代偿期38（59.37）62（72.09）Child-Pugh 分级A 级19（29.69）17（20.24）B 级20（31.25）35（41.67）C 级25（39.06）34（39.53）并发症0.8360.287感染21（32.81）43（50.00）4.4310.035消化道出血13（20.31）17（19.77）0.0070.934肝性脑病4（6.25）7（8.14）0.1930.661实验室指标ALT（U/L）53.94（34.00, 121.09）52.79（32.00, 120.25）0.1520.906 AST（U/L）42.00（23.00, 74.00）40.00（26.00, 79.00）0.5280.447 AFP（ng/L）5.24（3.04, 31.07）5.41（3.07, 33.53）0.3170.642 HA（mg/L）125.83±21.96125.77±25.480.0150.988 PCIII（μg/L）129.42（67.52, 263.00）137.63（53.22, 315.63）3.7740.002 LN（μg/ml）132.49±24.03130.11±28.390.5420.589

表2 不同血清FXYD6 蛋白水平表达患者的基本临床资料

2.2 生存分析

随访12～53 个月，平均随访36.8 个月，无失访病例，共53 例患者死亡。经Kaplan-Meier 法进行生存曲线分析，与AsAGP 低水平组相比，AsAGP 高水平组的生存时间明显缩短（P=0.001）；与FXYD6 低水平组相比，FXYD6 高水平组的生存时间明显缩短（P=0.001），见图1。

图1 不同血清AsAGP、FXYD6 蛋白水平肝硬化患者的生存曲线

2.3 血清AsAGP、FXYD6 蛋白水平预测肝硬化患者预后的效能分析

血清AsAGP、FXYD6 及AsAGP+FXYD6 预测肝硬化患者预后的AUC 分别为0.668（95%CI：0.573～0.746）、0.750（95%CI ：0.769～0.903）、0.853（95%CI ：0.712～0.947），血清AsAGP、FXYD6 联合对肝硬化预后的预测效能最佳，见图2。

图2 血清AsAGP、FXYD6 蛋白水平预测肝硬化患者预后的ROC 曲线图

3 讨论

3.1 肝硬化研究及预测现状

肝硬化是一种进行性弥漫性肝病，我国肝硬化的发病主要与乙型肝炎有关。代偿期患者基本无症状，但进入失代偿期便会导致难以逆转的多脏器损害，出现腹水、肝癌、消化道出血、肝性脑病、肝肾综合征等一系列并发症，预后不良。据报道[4]，失代偿期肝硬化患者首次上消化道出血的死亡率达到40%～70%。目前临床主要使用Child-Pugh 评分、MELD 评分、MELD-Na 评分等系统来判断肝硬化的预后，此外，一些实验室指标，如血清前白蛋白[5]、外周血红细胞分布宽度和中性粒细胞/淋巴细胞比值[6]等也可能对肝硬化预后具有预测价值，但均存在一定的局限性，无法完全满足临床需要。因此，寻找一些新的预测指标具有重要意义。

3.2 肝硬化患者AsAGP 水平与肝纤维化及预后的关系

基因突变使功能蛋白发生改变，从而生成了一系列不规则的糖链糖蛋白[7]，并参与到多种疾病的发生与发展中，如自身免疫病、急慢性炎症性疾病、恶性肿瘤等，这些疾病多存在糖蛋白的糖链组成或糖基化程度的改变。此外，临床发现在各种肝损害病理过程中，伴随着血浆糖蛋白糖基化改变，例如α-甲胎蛋白、胆碱酯酶、结合珠蛋白、AGP 等，与肝硬化、酒精性肝病、肝癌密切相关。AsAGP 是一种急性反应蛋白，为去乙酰化AGP，它在生物合成过程中可被各种低聚糖链糖基化，当它在清除率过程中被唾液酸酶水解时，唾液酸残基会从寡糖链的末端被去除。目前有关血清AsAGP 与肝硬化的研究较少。Lim DH 等[8]研究表明，肝硬化患者的血清AsAGP 水平显著高于慢性肝炎患者，且AsAGP水平与肝纤维化程度呈正相关，其是预测肝硬化的独立危险因素。本研究结果显示，肝硬化患者AsAGP 高水平组感染发生率明显高于低水平组，血清PCIII 水平明显高于低水平组（P＜0.05），提示血清AsAGP 与肝纤维化可能有关，且可评估感染风险。生存分析显示，AsAGP 高水平组的生存时间较低水平组明显缩短（P＜0.05），提示肝硬化患者血清AsAGP 水平越高，预后越差。

3.3 血清AsAGP、FXYD6 对肝硬化预后的价值

电解质紊乱是肝硬化常见并发症，以低钠血症为主，由于肝功能进行性损害，患者体内的高能磷酸键缺乏，钠泵渐趋衰竭，Na，K-ATP 酶活性降低，从而导致Na+、K+转运障碍，无法维持Na+、K+浓度梯度，最终出现细胞内离子环境紊乱。研究表明[9]，低钠血症是失代偿期肝硬化患者早期死亡的独立预测因子。FXYD 蛋白家族是一种小分子膜蛋白，共有7 个成员，均对Na，K-ATP 酶转运离子的过程具有调节作用。FXYD6 蛋白不仅具有调节钠钾泵的作用，同时也是一种肿瘤相关蛋白，与肝癌、胆管癌、胰腺癌等多种恶性肿瘤有关。体外实验表明[10]，肝癌中FXYD6 蛋白呈过度表达，并参与癌细胞的增殖与转移，其机制可能与调节钠钾泵的α1 亚基，激活下游Src-ERK 信号通路有关。本研究结果显示，肝硬化患者FXYD6高水平组的失代偿期比例较低水平高，Child-Pugh 分级更高，ALT、HA 水平明显升高，同时生存分析显示，FXYD6 高水平组的生存时间较低水平组明显缩短（P＜0.05），提示FXYD6 水平与Child-Pugh 分级具有较好的一致性，对判断肝硬化严重程度及预后可能具有价值。ROC 曲线分析显示，按AUC 从高到低排列依次为：AsAGP+FXYD6＞FXYD6＞AsAGP，提示AsAGP、FXYD6 对肝硬化预后均具有一定的预测价值，且二者联合的预测效能明显提高。

综上所述，血清AsAGP 和FXYD6 蛋白可能是预测肝硬化预后的潜在标志物，二者联合具有较好的预测效能。