ABO-HDN患儿输血前采用微柱凝胶技术检验的临床价值

徐晓玲,殷明刚,刘智勇（.四川省自贡市第三人民医院,四川 自贡 64020;2.四川省自贡市第一人民医院,四川 自贡 64000;.四川省攀枝花市中心医院,四川 攀枝花 67067）

新生儿溶血病（HDN）主要是母婴间血型不合所致同族血型免疫反应，胎儿遗传母体缺少的红细胞血型抗原，抗原经胎盘侵入母体，刺激母体出现免疫抗体，抗体经胎盘绒毛进入胎儿血循环，可导致出现免疫应答反应，对红细胞造成破坏，引发溶血病[1-2]。ABO-HDN是一种常见HDN类型，通常母亲血型为O型，患儿血型为A或B型[3-4]。输血为临床常用ABO-HDN治疗方法，为防止输血时血型不恰当导致溶血反应加重，需在输血前加强交叉配血检测[5]。目前，临床常用交叉配血方法包括MPT、MGT，但临床就其在ABO-HDN患儿输血前交叉配血中作用研究仍较少。本研究选择156例ABO-HDN患儿，重点分析输血前采用MPT、MGT进行交叉配血的效果，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机抽样法选取2015年1月-2019年6月本院156例ABO-HDN患儿。纳入标准：①符合《新编儿科疾病临床诊疗学》[6]中ABO-HDN诊断标准，经溶血三项[改良直接抗人球蛋白试验（DAT）、游离抗体试验、抗体释放试验]检查确诊；②血清间接胆红素水平异常升高；③Rh D血型阳性；④家属知情同意。排除标准：①孕妇合并严重肝肾功能不全；②自身免疫性溶血性疾病或其他原因所致各种溶血病；③家属不愿参与本研究。本组患儿中，男90例，女66例；日龄1-5d，平均（2.69±0.79）d；体质量2.5-3.7kg，平均（3.16±0.37）kg。

1.2 方法 取患儿血样，2000r/min离心，持续10min，分离血清、红细胞。红细胞以0.9%氯化钠注射液洗涤，配制3%细胞悬液。取1mL红细胞悬液，加入等体积0.9%氯化钠注射液，水浴7min，56℃下，2000r/min离心，持续3min，收集放散液。分别采用MPT、MGT进行主侧交叉配血。MPT：取试管1只，加入血清2滴或红细胞放散液2滴，配型红细胞悬液1滴。以0.7mL低离子介质混匀，加入2滴凝聚胺溶液。专用离心机离心，持续10s，弃上清液，试管轻轻摇动，红细胞凝集后，加入2滴重悬液，混匀，观察结果。MGT：收集血样，准备微柱凝胶试剂卡，分别将血样置入凝胶试管内，专用离心机离心，900r/min，持续2min，1500r/min，持续3min，共5min。取出，观察结果。

1.3 观察指标 ①分析MPT、MGT进行交叉配血与溶血三项试验结果，计算不合格率；②分析直抗类型与血清、放散液交叉配血结果，计算MPT、MGT检测不合格率；③采用Kappa一致性检验评估血清及放散液中MPT、MGT配血结果一致性。

1.4 统计学分析 以SPSS20.0软件分析。计数资料以“n，%”表示，以χ2检验。计量资料以（±s）表示。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清、放散液交叉配血与溶血三项试验结果 本组采用MPT、MGT进行主侧游离血清及红细胞放散液交叉配血次数为480次。MGT检测不合格率为70.83%（340/480），高于MPT的11.25%（54/480），差异有统计学意义（χ2=352.119，P=0.000）。见表1。

表1 血清交叉配血与溶血三项试验结果对比（n）

2.2 直抗类型与血清交叉配血结果 直抗阳性患儿MGT检测不合格率为59.82%（134/224），高于MPT的19.20%（43/224），差异有统计学意义（χ2=77.342，P=0.000）；直抗阴性患儿M G T检测不合格率为4 6.0 9%（1 1 8/2 5 6），高于M P T的3.91%（10/256），差异有统计学意义（χ2=121.500，P=0.000）。见表2。

表2 直抗类型与血清交叉配血结果分析（n）

2.3 直抗类型与放散液交叉配血结果 直抗阳性患儿MGT检测不合格率为48.21%（108/224），高于MPT的17.86%（40/224），差异有统计学意义（χ2=46.656，P=0.000）；直抗阴性患儿MGT检测不合格率为35.94%（92/256），高于MPT的2.34%（6/256），差异有统计学意义（χ2=93.334，P=0.000）。见表3。

表3 直抗类型与放散液交叉配血结果分析（n）

2.4 血清MPT、MGT配血结果 血清MPT检测阳性者MGT检测结果均为阳性，Kappa值为0.225，P＜0.05，两种技术配血结果一致性较差。见表4。

表4 血清MPT、MGT配血结果分析（n）

2.5 放散液MPT、MGT配血结果 放散液MPT检测阳性者MGT检测结果均为阳性，Kappa值为0.303，P＜0.05，两种技术配血结果一致性较差。见表5。

表5 放散液MPT、MGT配血结果分析（n）

3 讨论

ABO-HDN在临床上较为常见，病情复杂，且危险因素较多，包括孕妇妊娠次数、妊娠年龄、血型抗体效价等[7-10]。ABO-HDN可导致出现贫血、黄疸等症状，部分患儿还可继发胆红素脑病，危害性较大，需加强早期诊治[11-13]。此类患儿体内存在母源溶血性免疫球蛋白抗体，部分与红细胞结合，故临床多采用溶血三项（DAT、游离抗体试验、抗体释放试验）诊断[14-15]。输血为ABO-HDN常用治疗方法，但输血时血型不适，可影响输血效果，导致出现较多严重并发症，不利于康复，故需在输血前加强交叉配血[16-17]。既往临床多采用酶法、盐水法等传统交叉配血方法，但这些方法也存在较大局限性，影响检验准确性。近年来，随着医学技术快速发展，一些新型交叉配血检验方法在临床上得到应用，如MPT、MGT等。其中，MPT具有操作简单、方便快捷、检测迅速等特点，效果确切，但该方法应用时也存在一定不足之处，如抗体浓度偏低时易出现假阳性，影响检验准确性、有效性。

而MGT除操作简单、方便快捷等特性外，还具有所需标本少、特异性高、敏感度高等优势，在临床交叉配血中发挥越来越重要作用[18-19]。具体来说，MGT原理为将符合条件的稀释液配制为凝胶，实施微管柱灌注，以专用离心机离心，通过微柱内凝胶颗粒的分子筛，对凝集的红细胞进行截留，获得凝集反应结果[20-21]。而且，MGT具有较好重复性，检测结果较稳定，可直接观察，无需显微镜，对仪器设备要求较低，可在基层医院开展。但MGT应用也存在一定不足之处，如操作耗时较长、较难准确识别红细胞的不完全抗体等[22-24]。本研究重点分析了ABO-HDN患儿输血前MGT进行交叉配血检验的效果，并对比MPT。调查发现，MGT检测不合格率为70.83%，MPT检测不合格率11.25%，差异显著（P＜0.05）。而且，自表2、表3可以看出，直抗阳性患儿血清、放散液中MGT检测不合格率分别为59.82%、48.21%，明显高于MPT的19.20%、17.86%（P＜0.05），直抗阴性患儿血清、放散液中MGT检测不合格率分别为46.09%、35.94%，明显高于MPT的3.91%、2.34%（P＜0.05）。这说明ABO-HDN患儿输血前采用MGT进行交叉配血，可获得较MPT检验更为理想的效果，可提升不合格检出率，有效发现体内可溶性抗体。但MGT中仍存在阴性，考虑是因为患儿红细胞抗原表达强度不同，机体代谢变化存在差异，在一定程度干扰了交叉配血结果准确性。这同时也说明，ABO-HDN患儿输血方案制定中不能单一以交叉配血阴性为标准，需配合其他检查方法进行综合评估，最终确定输血方案。此外，本组患儿血清及放散液中MPT、MGT配血结果一致性较差（Kappa值分别为0.225、0.303），这说明MGT可作为ABO-HDN患儿输血前交叉配血有效手段应用于临床。

综上所述，ABO-HDN患儿输血前采用MGT进行交叉配血的效果理想，有利于提升交叉配血有效性、安全性，值得进行深入研究。