创口分泌物念珠菌的分布及其耐药性分析

李强 郭健莲 肖斌龙

(1.福建医科大学附属漳州市医院病理科，漳州 363000；2.解放军第909医院 厦门大学附属东南医院检验科，漳州 363000)

引 言

创伤外科患者伤口容易感染，主要是由于患者皮肤表层的保护屏障受到破坏，为病原菌入侵提供一个良好的入口，若病房未及时通风，伤口长期暴露于空气中，加上患者自身免疫功能低下，伤口极易感染恶化，导致创面难以愈合[1-2]。近年来许多研究表明，条件致病性念珠菌感染是医院内感染的重要病原菌之一[3-4]，因此本文通过分析创口分泌物念珠菌的分布及抗真菌药物的耐药情况，希望能为临床选择合适的抗真菌药物和院感监测提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 标本来源

2016年1月至2018年12月，我院创伤外科送检的伤口分泌物标本共4 541例，标本主要来自于烧伤、外伤和手术切口的引流液、伤口拭子、脓液、坏死和溃烂的皮肤组织等，共分离出的132株念珠菌，同一患者多次分离的菌株不重复计算。

1.2 方法

真菌培养 按照《全国临床检验操作规程》进行，将伤口分泌物接种于科玛嘉显色培养基(自配，郑州博赛科技有限公司)，28℃生化培养箱培养24～72 h，结果判断：白念珠菌呈绿色或翠绿色；光滑念珠菌呈紫色；克柔念珠菌呈粉红色；热带念珠菌呈蓝灰色或铁蓝色；结合科马嘉培养基显色和API 20CAUX 鉴定系统进行念珠菌鉴定。

药敏试验 使用ATBFUNGUS 3真菌药敏试条，以微量稀释法( MIC) 检测念珠菌对氟康唑(FCA)、伊曲康唑(ITR)、伏立康唑(VRC)、5-氟胞嘧啶(5-FC)及两性霉素(AMB)的敏感性，药敏试验判断、结果解释参照CLSI标准进行。

统计方法 采用WHONET5.6和SPSS20.0软件进行统计学分析，计数资料用百分率(%)表示。

2 结 果

2.1 患者的基本资料

132例患者中以年龄超过60岁最多，61例(46.21%)，住院时间≥7 d 97例，占73.48%，手术切口感染的92例，占69.70%，合并糖尿病的61例(46.21%)，合并冠心病43例(32.58%)，具体见表1。

表1 患者一般资料例数Tab.1 Clinical data of patients

2.2 念珠菌分布

伤口分泌物分离最多的是白念珠菌69株(52.27%)，其他依次分别是：热带念珠菌24株(18.18%)、克柔念珠菌18株(13.64%)、光滑念珠菌10株(7.58%)，其他念珠菌11株(8.33%)，具体详见表2。

表2 念珠菌的分布Tab.2 Distribution of Candida strains

2.3 念珠菌耐药情况分析

132株伤口分泌物分离的念珠菌对FCA、ITR、VRC、5-FC及AMB 5种常用抗真菌药物的药敏结果分析如表3所示：5种抗真菌药物的敏感性分别为78.79%、77.27%、95.45%、85.61%和97.73%；其中白念珠菌对5种抗真菌药物的均敏感；克柔念珠菌对ITR和5-FC为敏感性均为0。

表3 5种抗真菌药物的敏感性Tab.3 Sensitivity of 5 antifungal agents to Candida strains n(%)

3 讨 论

有研究表明，近年来烧伤和创伤患者创口念珠菌感染的发生率呈上升趋势，念珠菌已成为重要的院内感染病原体[5-7]，它能导致伤口经久不愈，甚至手术失败，无形中增加患者的生理和经济负担。因此预防伤口感染成为医院感染控制的重点[8]。

本研究结果显示，从4 541例伤口分泌物标本中共分离出132株念珠菌，分离率为2.90%，其中白念珠菌最多69株(52.27%)，分布上和Erum等[9]的报道相似均以白念珠菌为主。白念珠菌主要存在于健康人的口腔、泌尿生殖道和胃肠道中[10]，但近年来发现其在创伤外科和烧伤科创口感染的比例大幅度增加，成为患者医院内真菌感染最主要的条件致病真菌，这与其能够在组织细胞表面形成强黏附性的生物膜以及产磷脂酶和蛋白酶有关[9,11]。而Krumkamp等[12]发现慢性感染伤口最常见的念珠菌为热带念珠菌，可见创口念珠菌的分布具有地区差异性。因此，创口分泌物念珠菌检测在日常监测中不容忽视，应引起临床重视。

欧洲、南美洲和美国的几项研究表明，2005年前念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的耐药率非常低[13]，但近年却对唑类药物和棘白菌素的耐药率逐渐增加[14]。随着念珠菌对抗真菌药物耐药性的增加，对念珠菌感染患者进行抗真菌药物敏感试验具有十分重要的意义。不同的念珠菌对抗真菌药物的耐药性不一致[15-16]，本文通过对常见抗真菌药物的药敏分析结果显示：念珠菌对VRC、5-FC和AMB的敏感率较好，分别为95.45%、85.61%和97.73%；VRC具有毒副作用小、对多种真菌有效等优点，因此能够在临床上得以广泛应用[17]，AMB属于多烯类杀菌剂，是治疗念珠菌感染的黄金药物，但是对肝肾的毒性较大，5-FC虽然体外试验敏感率很高，但易产生耐药性[18-19]，因此临床上常采用5-FC与AMB联合用药的方法，不仅降低AMB对人体的毒副作用，还可减缓5-FC产生耐药性，能够取得理想的治疗效果；白念珠菌对5种抗真菌药物均具有较高的敏感性，与文献报道一致[9,19]，因此治疗白念珠菌临床可首选价格低廉的氟康唑；光滑念珠菌对FCA和ITR的敏感性较低，克柔念珠菌对FCA、ITR和5-FC全部耐药，临床上不建议使用。

通过分析患者一般资料发现，随着患者年龄的增长和住院时间的延长，感染念珠菌的概率不断上升，手术患者和合并糖尿病和冠心病患者更易感染念珠菌，可见年龄、住院时间、手术以及合并基础病均为创伤患者念珠菌感染的危险因素。

综上所述，对伤口分离的念珠菌进行药敏试验十分重要，尤其是对急危重症患者、自身免疫力低、创面大且需要长期使用抗菌药物的患者，应有针对性地采取预防措施，合理使用抗真菌药物，降低病死率，提高患者的生存率[20]。