肾移植术后淋巴细胞亚群变化在评价肾功能中的临床价值*

高云龙，郭小军，李泉源，瞿丛新，武伦，魏涧

（1.锦州医科大学国药东风总医院 研究生培养基地，湖北 十堰 442000；2.湖北医药学院附属国药东风总医院 普外科，湖北 十堰 442000）

肾移植术是目前器官移植方面最易被患者接受的，也是治疗终末期肾脏病的最佳方法。术后常规使用三联免疫抑制剂（他克莫司、吗替麦考酚酯、激素）影响患者的免疫应答和免疫调节，目前淋巴细胞亚群的测定是免疫状态最为客观的指标。免疫抑制剂的大量使用，患者出现肺部细菌、病毒感染的并发症，甚至更严重的后果；免疫抑制剂的剂量不足导致移植物宿主排斥或移植物失功，导致患者需要再次透析治疗。有报道显示机体出现感染或排斥时淋巴细胞亚群会发生相应的变化，因此研究肾移植术后患者淋巴细胞亚群的变化与肾功能之间的相关性极其重要。收集肾移植术后淋巴细胞亚群绝对计数及比值，分析与肾功能间的相关性，为临床医师更进一步明确诊断，为患者打造个体化治疗方案提供有力的理论依据。

1 资料与方法

1.1 相关标准

1.1.1 纳入标准 ①顺利完成肾移植患者；②住院期间均明确诊断，未发生移植物功能延迟恢复、感染、排斥反应、移植肾功能不全、术后移植肾功能丧失等；③术后群体反应性抗体（PRA）阴性。

1.1.2 排除标准 ①受者在术前出现明显的肝功能不全；②病历资料不全者；③合并传染性疾病。

1.2 研究对象

收集2019 年7 月到2020 年11 月湖北医药学院附属国药东风总医院收治的首次肾移植患者39 例。其中男31 例，女8 例；年龄（43.21±9.48）岁。肾移植受者淋巴细胞亚群绝对计数及比值、肾功能、他克莫司浓度均由锦州医科大学国药东风总医院测定，住院系统查询获得，肾小球滤过率为ECT 检测获得，淋巴细胞亚群绝对计数及百分比由流式细胞仪测得。肾移植受者术前均进行诱导治疗，术后口服他克莫司、吗替麦考酚酯、激素组成主要抗排斥治疗方案。本研究得到医院伦理委员会的批准。

1.3 研究方法

研究肾移植受者手术前后尿素氮、肌酐、补体C1q、胱抑素C、肾小球滤过率（GFR）动态变化，分析淋巴细胞亚群绝对数值及百分比与肾功能、他克莫司浓度相关性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 23.0 软件进行统计学分析。符合或近似正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，组内不同时间点相同指标比较采用配对样本t检验；计数资料以百分率（%）表示，采用Pearson 相关性分析。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 受者住院期间肾功能动态变化

分析受者手术前后不同时间点肾功能变化，尿素氮、肌酐、胱抑素C 及补体C1q 水平均逐渐降低，差异有统计学意义（P<0.05）；GFR 逐渐升高，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 受者手术前后肾功相关指标变化（）

表1 受者手术前后肾功相关指标变化（）

2.2 受者住院期间淋巴细胞亚群动态变化

受者住院期间125 次淋巴细胞亚群绝对计数及比值淋巴细胞亚群动态变化数值见表2。

表2 受者住院期间淋巴细胞亚群动态变化（）

表2 受者住院期间淋巴细胞亚群动态变化（）

2.3 淋巴细胞亚群绝对值计数与肾功能的相关分析

分析我院淋巴细胞亚群绝对值计数与肌酐、尿素、胱抑素C、GFR、补体C1q 之间的相关性，具体情况见表3。淋巴细胞亚群绝对计数肾功能相关性分析如图1。

图1 淋巴细胞数、总T 淋巴细胞数与胱抑素C 相关性

表3 淋巴细胞亚群绝对值计数与肾功能的相关分析

2.4 淋巴细胞亚群百分比与肾功能的相关分析

分析我院淋巴细胞亚群百分比与肌酐、尿素、胱抑素C、GFR、补体C1q 之间的相关性，具体情况见表4。淋巴细胞亚群百分比与肾功能相关性分析如图2。

图2 淋巴细胞百分比、总T 淋巴细胞百分比与胱抑素C 相关性

表4 淋巴细胞亚群百分比与肾功能的相关分析

2.5 淋巴细胞亚群与他克莫司浓度相关分析

研究发现淋巴细胞数百分比与他克莫司浓度成负相关（r=-0.20,P=0.029），B 淋巴细胞百分比与他克莫司浓度正相关（r=0.24,P=0.007），其余淋巴细胞亚群与他克莫司浓度没有发现相关性。

3 讨论

肾移植术后免疫抑制剂的治疗导致肾功能及机体免疫状态发生动态变化，用药剂量过大易导致患者出现感染、长期移植失败、恶性肿瘤［1］，甚至死亡［2-3］，不足易致肾功能丧失［4］。相关报道［5］显示患者术后感染或排斥反应T 淋巴细胞亚群表现不同，甚至有报道淋巴细胞亚群的数量可能与移植开始人类白细胞抗原（HLA）抗体的发生和同种异体移植肾发生排斥相关［6-7］。因此，迫切需要找到一个平衡点对肾功能进行早期的评估及干预。目前淋巴细胞表现是反映免疫功能的重要策略之一。

有报道［8］发生感染的患者CD4+，CD8+T 细胞或NK 细胞数量和功能不同程度降低，经抗感染治疗后CD4+、CD8+T 细胞和NK 细胞的数量和功能恢复到感染前水平。在没有发现其他更好的肾功能评估方法之前，淋巴细胞亚群在免疫检测中仍有着重要的作用。免疫抑制剂的应用对自然杀伤细胞具有明显的抑制作用，他克莫司主要是抑制T细胞的活化和增殖［9］。有学者发现CD8+T 细胞亚群可能对检测急性同种异体移植排斥有用［10］。上述研究认为肾移植术后淋巴细胞亚群在移植中有着重要作用。

目前移植中心考虑肾功能时主要观察血尿素氮、肌酐及GFR，胱抑素C 与补体C1 的报道较少，本研究发现淋巴细胞亚群不仅与血尿素、肌酐及GFR 有相关性，也发现与胱抑素C、补体C1q 也有相关性。补体C1q 促进免疫耐受、清除凋亡细胞有重要地位［11］。有两个方面解释：①补体C1q 与其受体结合促进影响树突状细胞的吞噬作用；②通过特异性细胞因子诱导TH1 细胞应答［12］。

胱抑素C 有核细胞产生，是近端肾小管损伤的标志物，通过肾小球过滤［13］，在肾小管代谢不被重复吸收，产生相对恒定，比肾小球坏死的肌酐水平接近肾小球滤过率［13-17］。肌酐是一种常见的肾功标志物，不仅反映肾功能［18］，还反映肌肉质量。而肾GFR 胱抑素C 比肌酐的评估能力更可靠［19-21］，并且不受性别年龄或肌肉质量的影响［22-23］，相关研究表明胱抑素C 比肌酐更能体现肾功能［24］。以上研究认为，肾功能的评估中血清胱抑素C 好于血清肌酐值。笔者的研究也发现淋巴细胞亚群与胱抑素C 的相关性明显优于肌酐，这可能与胱抑素C 更好的代表了肾功能相关。

在淋巴细胞亚群与他克莫司浓度研究发现，只有淋巴细胞数百分比、B 淋巴细胞百分比与他克莫司浓度发现了相关性，这一点另笔者感到意外，但在肝移植发现类似的结果，他克莫司浓度确实影响淋巴细胞亚群的变化，但药物浓度并不反映淋巴细胞亚群受影响的程度［25］。

综上所述，淋巴细胞亚群在肾移植术后呈动态变化，与肾功能有相关性。意外发现了胱抑素C与淋巴细胞亚群的相关性较好，这可能在更早地预测肾功与淋巴细胞亚群的平衡起着重要的作用。当然，由于本中心开展淋巴细胞测定及收集到资料有限，随访时间较短，其结论仍然需要更大样本及多中心进行研究论证。本研究论证了淋巴细胞亚群与肾功能、他克莫司浓度的关系。因此，淋巴细胞亚群检测可以为术后肾移植患者管理及治疗提供理论依据。