血清T淋巴细胞亚群检测在肝硬化合并真菌性血流感染中的诊断价值

郭武辉，张 华

(1.榆林市第二医院医学检验科，陕西 榆林 719000；2.西安市儿童医院儿童重症监护科，陕西 西安 710002)

每年死于乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染引发的肝衰竭、肝硬化后肝癌病例数可达80万人，位居各类致死性疾病的第15位，提示HBV感染已成为全球性的公共卫生问题[1-3]。临床实践发现，个体感染HBV后，病毒会对机体造成持续而慢性的损伤，晚期患者可出现肝功能失代偿、肝硬化或肝细胞癌等多种并发症，因而临床上建议及早对HBV感染患者开展干预[4-5]。血流感染是感染性疾病中的严重表现之一，此类患者血液中存在大量HBV，会产生毒素和代谢产物，引起严重毒血症，常常会危及患者生命[6]。血流感染可区分为细菌性和真菌性两大类，近些年随着中心静脉导管、胃肠外导管给药以及内镜技术的不断发展，加之抗生素的滥用，局部真菌感染发生率明显升高，相应地影响了真菌性血流感染的发生率。有报道[7-8]显示，真菌性血流感染的病死率已达到35%左右。肝硬化患者长期处于免疫功能不全状态，发生真菌感染的概率较常人更高。T淋巴细胞亚群测定是检测机体细胞免疫功能的重要指标，对分析某些疾病发病机制、辅助诊断、观察疗效及监测预后有重要意义。因此，本研究探究血清T淋巴细胞亚群(CD4+、CD3+及CD4+/CD8+)检测对肝硬化合并真菌性血流感染的诊断价值，以期为改善此类患者预后提供临床参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2018年1月至2021年5月于我院接受治疗的肝硬化合并真菌性血液感染患儿60例为研究组；选择同期于我院接受治疗的肝硬化患儿50例为病例对照组；选择健康儿童50例为对照组。三组儿童性别、年龄、平均动脉压(MAP)比较，差异无统计学意义(均P>0.05)，见表1。病例纳入标准：①均符合《慢性乙型肝炎防治指南》[9]中关于乙肝肝硬化诊断标准且出现相应临床症状；②意识清晰，能够配合开展研究；③一般资料齐全。排除标准：①合并精神疾患；②近1个月内服用抗菌药物；③合并恶性肿瘤；④合并其他病毒感染；⑤合并自身免疫系统疾患；⑥酒精性肝硬化；⑦合并其他肝脏疾病。本研究经医院伦理学会批准实施。患者及其家属对本次调研过程、方法、原理清楚并签署知情同意书。

表1 三组儿童一般资料比较

1.2 研究方法 采集三组儿童清晨空腹肘静脉血样3 ml，应用乙二胺四乙酸二钾抗凝，然后采用流式细胞仪(贝克曼CYTOMICS FC 500)检测血样CD4+、CD3+淋巴细胞及CD4+/CD8+；采用Sysmex XN-9000检测白细胞(WBC)及中性粒细胞(NE)水平。同时，采集肝素钠抗凝血4 ml，采用电化学发光法检测血清降钙素原(PCT)水平。

1.3 观察指标 比较三组儿童T淋巴细胞亚群以及炎症指标(PCT、WBC、NE)水平，分析T淋巴细胞亚群对肝硬化合并真菌性血流感染的诊断价值。

2 结 果

2.1 三组儿童T淋巴细胞亚群比较 见表2。研究组和病例对照组患儿CD4+、CD3+及CD4+/CD8+水平均显著低于对照组，且研究组患儿CD4+、CD3+及CD4+/CD8+明显低于病例对照组(均P<0.05)。

表2 三组儿童T淋巴细胞亚群比较

2.2 三组儿童PCT、WBC、NE水平比较 见表3。研究组和病例对照组患儿PCT、WBC以及NE水平均明显高于对照组，且研究组患儿上述指标水平明显高于病例对照组(均P<0.05)。

表3 三组儿童PCT、WBC、NE水平比较

2.3 T淋巴细胞亚群对肝硬化合并真菌性血流感染的诊断价值分析 见表4。ROC曲线分析显示，CD4+、CD3+、CD4+/CD8+单项、两项联合以及三项联合均对肝硬化合并真菌性血流感染具有较高的诊断价值，尤其是三项联合最高，曲线下面积(AUC)为0.951。

表4 T淋巴细胞亚群对肝硬化合并真菌性血流感染的诊断价值

3 讨 论

肝硬化是慢性肝病进展迁延的中间阶段，其典型病变特点为肝细胞结节性再生、结缔组织增生、纤维间隔形成等，其病因主要包括病毒性肝炎、酒精性肝炎或自身免疫性肝炎等[10-11]。肝硬化患者早期由于肝脏代偿能力较强，临床症状并不明显，至疾病晚期可因肝脏失代偿而出现诸如肝功能损伤、门静脉高压等表现[12-13]，同时多数患者会伴有多系统症状，常出现肝性脑病、上消化道出血、自发性腹膜炎[14]等并发症，如不加以及时干预，可以发展为肝衰竭，威胁患者生命。近年受胃肠外导管给药、局部真菌感染等因素影响，真菌性血流感染的患病率及病死率呈现明显升高趋势。已有研究[15-16]指出，真菌性血流感染患者早期病情较为隐匿，不易被患者察觉，但发展至晚期病死率可高达30%，建议及早准确地实施诊断。

本研究通过设立对照分组的方式，就CD4+、CD3+及CD4+/CD8+等T淋巴细胞亚群在肝硬化合并真菌性血流感染中的诊断价值进行了分析，结果显示研究组和病例对照组患儿CD4+、CD3+以及CD4+/CD8+水平均显著低于对照组，且研究组患儿CD4+、CD3+及CD4+/CD8+明显低于病例对照组，提示随着病情的改变，患儿T淋巴细胞亚群出现了明显变化。何小庆等[17]通过对166例细菌或真菌性血流感染患者开展分析研究发现，受试者中真菌组CD4+T淋巴细胞降低较细菌组更为显著，认为CD4+T淋巴细胞水平能够较为直观地反映个体免疫功能，其水平的降低往往代表个体免疫功能的下降，本研究与其基本一致。

肝硬化的常见病因主要为病毒感染，而病毒感染导致慢性病变的主要原因即为机体免疫调节降低，尤其是细胞免疫功能下降，导致机体无法彻底清除感染病毒。在细胞免疫进程中重要的免疫调控因子即为T淋巴细胞，临床上也常将T淋巴细胞亚群作为反映机体免疫调节功能的金标准。有报道指出，在HBV感染机体的初期阶段，机体免疫系统处于被激活状态，其T淋巴细胞亚群水平会骤增，使机体产生免疫防御，而当HBV感染进入慢性感染期后，个体的T淋巴细胞亚群水平会明显降低，CD4+、CD3+T淋巴细胞数量会大量减少，从而引起机体免疫力降低，如果CD4+和CD8+细胞亚群水平同时降低，则预示着免疫功能明显减弱，肝硬化甚至肝衰竭将逐步出现[18-19]。本研究中进一步通过对比三组儿童的炎症指标验证了上述理论的真实性，相比于对照组，病例对照组PCT、WBC等指标已处于异常高表达状态，而真菌感染进一步加重了机体的炎症反应，导致大量炎性因子被释放，对肝脏形成了二次打击[20]。最后，本研究通过绘制ROC曲线图发现，CD4+、CD3+及CD4+/CD8+对肝硬化合并真菌性血流感染具有较好的诊断价值，尤其是三项联合检测的诊断价值更大，可以考虑将上述三项指标联合检测作为肝硬化合并真菌性血流感染的诊断参考。

综上所述，CD4+、CD3+及CD4+/CD8+联合检测对肝硬化合并真菌性血流感染具有较好的诊断价值，可以考虑将其作为该症的早期诊断指标。