胎儿颈项透明层厚度与胎儿染色体畸变的关联性分析

陆 屹

（无锡市第八人民医院医学影像科，江苏 无锡 214011）

胎儿在母体内的异常发育或者发育迟缓，临床上称之为发育障碍，若经确诊发育障碍的胎儿未经干预而出生，则称之为出生缺陷。目前，出生缺陷在临床上的发生率为5.6%左右，而胎儿自身的染色体核型异常是诱发出生缺陷的关键因素[1]。随着近年来优生优育理念的普及，产妇在围产期介入各项产前检查，可对胎儿的染色体情况开展遗传物质剖析，及早发现、干预染色体畸变胎儿，从而有效提高胎儿出生存活率与人口质量[2]。针对胎儿染色体畸变的检查，目前主要采取羊膜腔穿刺取样、脐带血采集、绒毛活检等方式，但此类检查措施均为创伤性操作，若操作不当，易引起胎儿死亡、流产等风险，因此不能将上述检查视为常规性检查[3]。超声检查大多是从胎儿在宫腔内的外观轮廓畸形及“软指标”作为染色体畸变的风险预测指标，可有效对胎儿染色体畸变进行筛查及预测，且由于其具有经济、便捷、无创等优点，已成为目前临床常用的胎儿畸变的筛查方式[4]。研究发现，妊娠早期阶段的颈项透明层（NT）厚度增厚，则表明胎儿的染色体可能存在结构异常的危险性，且该特异性较妊娠中期阶段的血清学筛查更具特异性[5]。基于此，本研究旨在进一步分析NT厚度增厚与胎儿染色体畸变之间的关联性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年2月至2020年10月无锡市第八人民医院接诊的106例行超声胎儿NT厚度检查的孕妇作为研究对象，对所有孕妇开展胎儿NT筛查，并通过产前诊断介入方法对胎儿染色体核型进行鉴别。孕妇年龄20～41岁，平均（36.32±1.35）岁；体质量指数（BMI）17～26 kg/m2，平均（22.14±3.85） kg/m2；检测孕周11+3～13+2周，平均（12.13±0.57）周；胎儿顶臀长44～83 mm，平均（65.36±4.89） mm。诊断标准：参照《产前遗传病诊断》[6]中妊娠的诊断标准。纳入标准：符合上述诊断标准者；NT ≥2.5 mm的孕妇；单胎妊娠者，既往未伴有不良妊娠史；在孕妇分娩前能与医务人员保持通话联系者等。排除标准：既往患有心血管疾病、肝肾功能不全等疾病；血流动力学不稳定患者；患有癫痫、中风等精神类疾病；孕妇或配偶染色体易位、倒位者等。研究经无锡市第八人民医院医学伦理委员会批准，且孕妇及其家属均自愿签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 NT筛查方法与NT增厚的评定标准 使用四维彩超机（美国通用电气公司，型号：Voluson E8）、彩色多普勒超声系统（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司，型号：Resona 7S）作为检查设备，上述设备的经腹部检测超声探头与仪器设置参数均一致，探头的频率介于2～5 MHz。根据英国胎儿医学基金会（FMF）[7]制定的胎儿NT厚度测量规范和准则进行检查：①胎儿的头臂长（RCL）介于45～84 mm；②孕妇在检查时取仰卧体位，超声所截取的胎儿图像是在胎儿自然屈曲状态下的正中矢状切面；③利用影像设备的放大功能，将胎儿头部与上胸处予以放大，使其占据整个图像的75%范围；④对胎儿的羊膜与皮肤进行辨别；⑤对胎儿颈部软组织与皮肤之间的半透膜组织的厚度进行测量；⑥在检查操作过程中，标尺的横线要与NT厚度的界限相叠加；⑦对患者展开3次检查，并选择数值最高的记录。在妊娠期11～13+6周的阶段，若胎儿NT ≥2.5mm，则判定为NT增厚；需要求孕妇予以胎儿染色体核型分析，在妊娠中期阶段再次开展超声检查，以排除胎儿存在畸形的可能。

1.2.2 产前诊断介入方法 根据孕妇的生理状况选择如下几类方法进行介入诊断。①穿刺取绒毛组织：在妊娠期11～14周，经超声引导行腹部穿刺取胎儿绒毛组织予以送检。②穿刺取羊水：在妊娠期18～24周，经腹部超声引导穿刺羊膜腔取20 mL羊水予以送检。③穿刺取脐带血：在妊娠期24～32周，在腹部超声引导下穿刺脐带取2 mL脐带血予以送检。

1.2.3 胎儿染色体核型分析方法 采取G显带320条带染色和荧光原位杂交（FISH）方法对胎儿染色体核型展开分析。FISH方法：取5 mL羊水进行FISH分析，常规样本玻片制备，经过预处理、变性、探针变形及杂交、玻片洗涤、复染后，暗处放置20 min后，在Olympus BX-51正置荧光显微镜下观察，通过FITC/TRITC/DEAC三色滤光片观察不同颜色的荧光信号。GLP探针：同时出现2绿2红信号为13及21二倍体；GSP探针：若同时出现2蓝1绿1红记为18二倍体和XY，若同时出现2蓝2绿为18二倍体和XX。羊水细胞核型分析方法：首先进行羊水细胞培养，然后制备染色体，G显带，并根据人类细胞遗传学国际命名体制（ISCN）2009版标准进行核型分析和描述[8]。

1.3 观察指标 ①统计各孕妇NT厚度，并统计胎儿染色体核型异常者的异常类型。②统计并比较不同NT厚度孕妇的胎儿染色体核型异常率。③对胎儿的染色体核型异常情况与NT厚度、孕妇年龄、胎儿畸形发生率、胎儿性别等因素展开关联性分析。

1.4 统计学方法 采用SPSS 22.0统计软件进行数据处理，计数资料用[ 例(%)]表示，两组间比较采用χ2检验；多组间比较采用χ2趋势检验；计量资料用(±s)表示，采用t检验。以P＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 NT厚度与染色体核型分析结果 106例孕妇经介入性产前诊断检查以及胎儿染色体核型分析，其中19例胎儿（NT ≥3.0 mm）出现染色体核型异常，染色体核型异常检出率为17.92%（19/106）。染色体核型异常分别为：13三体2例（10.53%）、18三体1例（5.26%）、21三体 10例（52.63%）、45，X 1例（5.26%）、47，XXX 5例（26.32%），见表1。

表1 19例染色体核型异常胎儿NT厚度与染色体核型分析结果

2.2 NT厚度与胎儿染色体核型异常的关联性分析 随着NT厚度的增加，染色体核型异常率也逐渐升高，差异有统计学意义（P＜ 0.05），见表2。

表2 NT厚度与胎儿染色体核型异常检的关联性分析

2.3 胎儿染色体核型异常与NT厚度、孕妇年龄、胎儿畸形及胎儿性别的关系 正常染色体核型组的NT厚度低于异常染色体核型组，且分娩年龄＜35岁、胎儿性别为男性、胎儿无畸形的占比均高于异常染色体核型组，差异均有统计学意义（均P＜ 0.05），见表3。

表3 胎儿染色体核型与NT厚度、孕妇年龄、胎儿畸形及胎儿性别的关系[ 例(%)]

3 讨论

NT厚度是指胎儿颈部皮下所存在的无回声带，其位于皮肤高回声带、深部软组织高回声带的中间，NT厚度通常是妊娠早期超声影像检查的重要指标。在胎儿的正常生长发育阶段，胎儿颈部位置的颈静脉窦与颈部淋巴管在母体妊娠10～14周阶段会出现相连通的表现，颈部位置可出现少许淋巴液积蓄，胎儿可出现淋巴液与静脉血短暂性回流异常，经超声影像检查可出现短暂性颈部透明带[9-10]。若胎儿出现染色体核型异常，将影响胎儿在母体内的生长发育，颈部静脉窦与颈部淋巴管的液体流通出现延后致使颈部淋巴液无法顺利回流，使液体相对较多地积蓄在颈部，导致NT增厚[11]。有学者指出，NT数值增厚是临床上借助超声影像来评估胎儿外观体征的重要指标[12]。

有研究指出，在孕妇妊娠11～13+6周阶段，NT增厚的胎儿中，12%胎儿会出现一定程度的发育异常，包括颈部透明层增加，且随着NT数值的增加，其畸形异常度将更严重[13]。NT增厚除可作为胎儿染色体核型异常与否判断指征外，同时还具有评估胎儿是否存在解剖形态学畸形或者死胎的价值[14]。因此，在孕妇妊娠周期11～13+6周阶段，通过NT筛查能有效评判出胎儿是否存在高风险因子，以便在后续的产前疾病与胎儿畸形筛查中做出参考性诊断。目前，国外已将NT ≥3.0 mm视为胎儿染色体核型异常筛查的主要评价标准[15]，但国内尚无统一的标准。本研究对106例孕妇进行介入性产前诊断检查，并对胎儿染色体核型展开分析，其中19例胎儿（NT ≥3.0 mm）出现染色体核型异常，其中21三体染色体核型异常所占比例最高，与马莹等[16]的研究结果基本相符。本研究中，随着NT厚度的增加，胎儿出现染色体核型异常的风险概率也随之升高，表明胎儿NT厚度与染色体核型异常的风险呈正相关，NT筛查可作为孕妇妊娠早期胎儿染色体核型异常筛查的主要手段之一，同时可作为孕妇开展介入式产前筛查的主要指征。但NT厚度介于2.5～2.9 mm时胎儿未出现染色体核型异常，这可能与本研究纳入的样本量相对较少有关，因此，上述的研究数值能否作为判定处于该NT数值范围内的胎儿是否会出现染色体核型异常的标准还需进一步进行研究。

相关研究表明，高龄孕妇是出现胎儿染色体核型异常的危险群体，不仅妊娠期并发症风险较高，胎儿染色体风险也将增加，因此需重视产前筛查和诊断，但由于高龄孕妇经唐氏筛查显示假阴性的概率相对较高，因此易造成临床误诊[17]。有研究显示，若对高龄孕妇直接实施介入性产前诊断检查，可能存在一定的危险性，若由此导致产妇流产，可能对再次妊娠产生负面影响[18]。胎儿NT增厚是孕中期筛查胎儿染色体核型异常较为敏感的指标，大量研究报道，胎儿NT增厚且并发其他解剖结构畸形时，其并发染色体核型异常的危险性将有所递增[19-20]。因此，对于高龄孕妇进行超声NT筛查，是一项相对安全、可行的产前筛查方案，对胎儿NT值较高者进行胎儿染色体分析对减少缺陷新生儿的出生具有积极的临床价值，但关于女性胎儿的染色体核型异常检出率高于男性胎儿这一结果并未深入研究，未来还需进一步进行探讨。最后，及时开展介入性产前诊断予以进一步筛查，还需在孕妇妊娠20～24周阶段予以胎儿畸形B超检查，做好围产期筛查保健工作，以有效减少新生儿发育不良或新生儿缺陷事件的发生。

综上，超声检查作为胎儿NT筛查的有效手段，对高龄孕妇具有积极的产前诊断价值，对于妊娠周期介于11～13+6周，且NT ≥2.5 mm孕妇，需要求产妇接受胎儿染色体检查，以便进一步明确诊断，规避新生儿发育不良或者缺陷事件的发生。但本研究纳入的样本量相对较少，未来还需进一步进行大样本的临床研究。