一例维氏气单胞菌引起罗非鱼病的诊治

梁前才

(茂名市农业科技推广中心，广东 茂名 525000)

2020年6月，茂名市电白区一个养殖户报告罗非鱼发病死亡，每天死亡达50～400尾。现将该罗非鱼发病的诊治情况介绍如下，供从业人员参考。

一、发病情况

发病池塘面积31 亩，平均水深约3.5 米，有猪粪直排入塘，属当地典型罗非鱼养殖模式。6月2日把罗非鱼苗种移到成鱼塘，苗种规格约130克/尾，共放养8.6 万尾。同时过塘大规格鲢鳙苗种，过塘后罗非鱼从开始每天死亡400多尾到后期每天死亡50 多尾。病鱼的上下颌、口腔、鳃盖、眼睛、鳍基及鱼体两侧轻度充血，解剖发现肠内有少量食物，有典型的淡水鱼出血病症状。症状严重的罗非鱼体表严重充血，眼眶周围也充血，眼球突出，肛门红肿，腹部膨大，腹腔内积有淡黄色透明腹水或红色浑浊腹水。同塘配养的鲢鳙鱼没有发生病害。

二、病害诊断

根据病鱼的症状对罗非鱼的体表和鳃采样镜检，没有发现寄生虫。由于有部分病鱼出现罗非鱼链球菌病突眼的症状，在有典型症状的罗非鱼脑、肾、肝的部位采样，按照罗非鱼链球菌PCR检测方法进行检测，结果不是罗非鱼链球菌引起的病害。对罗非鱼病灶部位进行采样，用MRS肉汤平皿培养基接种培养，培养后有典型细菌菌落，用TSA培养基进行纯化培养后送检，用细菌16S rDNA基因扩增测序法进行检测，对检测结果比对后确定细菌是维氏气单胞菌，因此确定是由维氏气单胞菌引发的罗非鱼病。

三、治疗过程与药敏试验

1.没有确诊前的治疗措施 在养殖场进行病害检测采样时，没有确诊罗非鱼病因，笔者根据发病鱼的症状，并结合多年罗非鱼病害处理的经验，初步确定该罗非鱼病是由细菌引起。当地养殖的罗非鱼主要用于加工出口，不能用磺胺类药物。为了减少罗非鱼发病死亡数量，当时指导养殖户用氟苯尼考(5%)拌料投喂罗非鱼，每天1 次，每千克鱼用药量30 毫克/天，共用药4 天；用聚维酮碘全池泼洒1 次，到第4 天罗非鱼死亡得到了控制。

2.药敏试验 笔者用硫酸新霉素、盐酸土霉素、甲砜霉素、氟苯尼考、磺胺嘧啶、磺胺甲唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、氨苄西林钠、硫氰酸红霉素、强力霉素、交沙霉素和盐酸环丙沙星共14 种商用药敏纸片，对菌株进行了简单的药敏试验。由于是对养殖户生产中病害防控的药敏试验，未测定菌株最小抑菌浓度与试验菌株液的浓度。

药敏试验平皿培养基为MHA培养基，挑选发病鱼接种培育后典型的菌株在液体MRS培育基上培育24小时后，用针管吸取1毫升菌株液放在药敏试验平皿上，用涂布棒在培育基上均匀涂布，每个试验平皿放4 个不同的药敏纸片，设3 个平行试验。药敏试验平皿经过24 小时的培养，按照药敏纸对菌株抑制圈的大小分为极敏感、敏感、无明显效果3个等级(非NCCLS标准和CLSI标准)。试验结果表明，发病菌株对甲砜霉素、盐酸环丙沙星、强力霉素、盐酸土霉素、交沙霉素、氟苯尼考、磺胺二甲嘧啶7种抗菌药物的敏感性最强，其余7种抗菌药物无明显抑菌圈产生。其中对氟苯尼考、磺胺二甲嘧啶为极敏感，对甲砜霉素、盐酸环丙沙星、强力霉素、盐酸土霉素、交沙霉素为敏感，对其他7种药物无明显效果。

四、分析与小结

维氏气单胞菌是一种条件致病菌，其感染水产动物引起的疾病有腐皮病、败血症等。据相关文献，该细菌感染鱼后可导致35%～90%的发病率，发病后也具有一定的死亡率。此次维氏气单胞菌引发罗非鱼病的原因如下。

1.环境与气候因素 该养殖户的养殖模式当地称为立体养殖模式，即池塘旁边养猪，利用猪粪育肥水质或者充当鱼的饵料的养殖模式。该模式使养殖水体有机质增多，存在引起罗非鱼病害的有害菌群。当地6月已属高温季节，气温在25～34℃，表层水温在25～30℃，适合维氏气单胞菌引发水产养殖病害。

2.品种与养殖操作因素 罗非鱼相对耐低氧，对水质要求不高，病害不多，但特定条件下对真菌、细菌病的抵抗力不强，容易发生病害。笔者根据多年的水产技术服务经验认为，水温低于16℃、罗非鱼体表损伤的情况下极易发生水霉病，水温高于30℃时容易发生罗非鱼链球菌病。此次由维氏气单胞菌引发的病害与罗非鱼品种有关，同时与养殖操作有关。过塘前苗种停料1 天，但苗种是捕捞后直接称重、干法搬运过塘，搬运距离有200 多米。搬运过程造成罗非鱼体表受伤、鳞片脱落，受伤罗非鱼受细菌感染引发了病害。

近年来，罗非鱼养殖病害多，如罗非鱼链球菌病，每年都造成茂名地区罗非鱼养殖产业较大的损失，但维氏气单胞菌引发罗非鱼病相对较少。养殖管理过程中要尽可能减少鱼体受伤，减少维氏气单胞菌病发生的条件。发病后用磺胺二甲嘧啶拌料投喂可获得较好的效果，但以出口欧美为目的养殖池塘要使用氟苯尼考治疗，保证符合出口地区的食品质量安全要求。另外，水产技术推广技术人员根据经验，在病原检测确诊前要尽快采用合理治疗措施，以减少病害造成的损失。