MMP-2、TIMP-2在足月胎膜早破发病中的作用

梁学美

泰安市中心医院产科，山东泰安271000

临产前的胎膜破裂称为胎膜早破,胎膜早破的发生与营养、羊膜腔压力增高、创伤、感染以及妊娠期糖尿病等并发症有关系[1-2]。胎膜早破是产科最常见的并发症之一，可能会引起绒毛膜感染、脐带脱垂、胎儿窘迫、羊水栓塞甚至威胁到母婴的生命安全[3]。近年来，人们普遍认为，胎膜的结构病变可能与胎膜早破有一定的关系，相关研究也显示，MMPs/TIMP与胎膜早破关系密切[4]。该研究方便选取2019年3月—2020年3月在该院住院剖宫产产妇足月胎膜早破40例为研究组，足月未胎膜早破者40例为对照组，用免疫组化法分别检测胎膜中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）分布,并进一步明确其在足月胎膜早破中的作用，从而达到预防与治疗胎膜早破的目的。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取该院住院产妇分成两组，研究组为胎膜早破足月剖宫产的产妇40例，对照组为未胎膜早破足月剖宫产的产妇40例。所有患者自然受孕，单胎，宫颈扩张＜3 cm，胎膜早破＜12 h。对照组年龄25～39岁，平均(30.5±3.20)岁；孕周37～41周，平均(38.85±1.93)周。研究组年龄23～40岁，平均(29.05±4.07)岁；孕周37～41.5周，平均(39.12±1.05)周。两组孕周、年龄比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。该研究已通过泰安市中心医院伦理委员会批准，已取得孕妇及家属知情同意。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 在该院住院产妇按照以上标准分为两组，研究组为胎膜早破足月剖宫产的产妇40例，对照组为未胎膜早破足月剖宫产的产妇40例，两组产妇剖宫产术中取其近宫颈处大小约2 cm×2 cm胎膜一块，分别经过0.9%生理盐水冲洗、10%多聚甲醛固定、石蜡包埋。

1.2.2 检测 按照常规免疫组化操作，阳性对照为TIMP-2阳性的纤维母细胞切片及MMP-2阳性乳腺癌切片，磷酸盐缓冲液作为阴性对照，通过病理图象分析仪，仔细观察两组胎膜组织的染色强度。

1.3 观察指标

用光镜观察两组胎膜组织阳性细胞的百分率及染色：一个切片选取5个段面，在400×光镜下，切片中阳性物质的相对含量通过5个断面中的阳性物质的平均值表示，半定量分析参考Fromowitz综合记分法。根据阳性细胞的百分率及显色深浅评分，阳性细胞的百分率：0为无阳性细胞；1为阳性细胞<25%；2为25%～50%；3为>50%；显色：0为未显色或显色不清楚；1为浅黄色；2为棕黄色；3为深褐色。两项之和累积：0～1分表示阴性(-)；2～3分表示弱阳性(+)；4～5分表示中度阳性(++)；6分为表示强阳性(+++)，阳性率为每组（+)~(+++）阳性总例数与每组总例数比值的百分比，从而检测胎膜中MMP-2及TIMP-2的分布及阳性率的表达。

1.4 统计方法

采用SPSS 18.0统计学软件分析数据，计数资料采用频数或率（%）表示，比较采用χ2检验，等级资料采用秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组产妇胎膜组织中MMP-2阳性率比较

MMP-2在研究组的阳性表达率85.0%,高于对照组的65.0%，差异有统计学意义（χ2=4.267，P=0.039），通过Mann-Whitney检验Z=-3.258，渐进显著性（0.001）。见表1。

表1 两组产妇胎膜组织中MMP-2阳性率比较

2.2 两组产妇胎膜组织中TIMP-2阳性率比较

TIMP-2在研究组中阳性表达率52.5%,低于对照组的70.0%，但差异无统计学意义（χ2=2.581，P=0.108），通过Mann-Whitney检验Z=-1.693，渐进显著性（0.090）。见表2。

表2 两组产妇胎膜组织中TIMP-2阳性率比较

2.3 TIMP-2及MMP-2在两组胎膜中表达的相关性

TIMP-2和MMP-2在两组产妇胎膜组织中表达的阳性率呈负相关（RSquare=0.761,P＜0.05）。

3 讨论

胎膜含有较多的胶原，胶原本身的结构状态决定胎膜的强度[5]，胎膜早破可能会引起脐带脱垂、感染、胎儿窘迫等,因此严重威胁母儿的生命安全[6]。因此，用比较准确的指标对胎膜早破及时进行预测，对孕妇的治疗有很大地帮助，可以尽量减少母婴并发症的发生[7]。

基质金属蛋白酶共有26个成员,根据不同的底物和结构特异性，分为基质溶素、胶原酶、膜型基质金属蛋白酶、溶基质素、明胶酶和其他六大类[8]。 除膜型直接以酶的形式发挥作用外，其他均以酶原形式分泌，被激活剂激活后才具有酶活性[9]。基质金属蛋白酶可以介导细胞外基质的释放，并激活可溶性因子,如细胞因子和生长因子等[10]。MMP-2主要分布在羊膜上皮细胞上，具有降解细胞外基质蛋白的功能[11]。MMP-2可以降解Ⅰ型和Ⅲ型胶原,在胎膜早破孕妇较未胎膜早破的孕妇羊水中的浓度偏高[12]。胎膜未破时，血清中MMP-2在血清中含量较少，但在某些因素刺激下，可能增加MMP-2的水平，使胎膜中的ECM的降解增加，胶原分解也增加，导致发生胎膜早破[13-14]。胎膜早破患者胎盘中的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激HMGB1受体,导致MMP-2水平升高,进一步调节胎膜中外基质蛋白的分解代谢,MMP-2在胎膜早破患者胎膜、胎盘及血清中均出现升高现象[15]。基质蛋白酶具有降解胶原的作用，胎膜组织中含量升高可引起局部胎膜的薄弱[16]。崔世红等[17]研究中，对比胎膜早破病例及同孕期健康孕妇各30名,基质金属蛋白酶-2在胎膜早破组胎膜中的表达阳性23例(77%),在正常对照组胎膜中的表达阳性15例(50%)(P＜0.05)，从而得出胎膜中基质金属蛋白酶-2蛋白的高表达可能参与胎膜早破的发病过程。 在该次研究中，MMP-2在研究组的阳性表达率85.0%,高于对照组的65.0%(P=0.039)，与前人的研究结果一致，随着MMP-2水平增加，胎膜中的ECM的降解增加，胶原分解也增加，容易发生胎膜早破。

TIMP-2为MMP-2的特异性组织抑制剂，其合成与降解水平与胎膜早破有关[18]。张莉等[19]研究胎膜早破及正常剖宫产产妇各30例，结果MMP-2在胎膜早破组表达（100.00%）明显高于正常剖宫产组(46.67%）(P＜0.05),TIMP-2在胎膜早破组表达（40.00%）低于正常剖宫产组(60.0%)(P=0.091),得出MMP-2和TIMP-2失调可能是诱发胎膜早破 的原因之一。在该次研究中，TIMP-2在研究组中阳性表达率52.5%,低于对照组的70.0%,但差异无统计学意义(χ2=2.581，P=0.108)，该文结果与以上研究基本一致，虽然TIMPS阳性表达率优于对照组，但不能否认胎膜早破中TIMP-2所起的作用，可以在以后对TIMP-2与胎膜破裂的关系做进一步探讨。

从研究中可以看出,研究组中羊膜MMP-2的阳性表达率高于对照组,TIMP-2的阳性表达率低于对照组，且它们的表达呈负相关（R Square=0.761,P＜0.05），当胎膜组织中的MMP-2含量明显增多，而TIMP-2含量减少,MMP-2/TIMP-2比例失去平衡时，导致胎膜中胶原出现大量降解，胎膜强度减小,使局部胎膜发生破裂。可见足月胎膜早破的原因之一可能是MMP-2/TIMP-2比例失衡，MMP-2、TIMP-2在一定程度上共同参与足月胎膜早破的发生。