○潘忠斌
我国是世界茶叶生产大国,茶叶加工中获得的茶多酚具有抗氧化、抗细菌感染、抵抗辐射、提高机体免疫力的功效。适量的茶多酚可以有效的促进草鱼生长,提高机体免疫力。本试验通过对草鱼饲喂含茶多酚的饲料,了解添加茶多酚对草鱼免疫指标的影响、最合适添加浓度及人工感染嗜水气单胞菌的成活率。
本试验选用正大草鱼鱼苗专用饲料F3,产品成分表如表1。将选用的饲料进行破碎后按照试验要求添加茶多酚,配制成5种含量不同的饲料,并将破碎后的饲料制为2-3mm的颗粒。
表1 选用饲料成分表
试验用的草鱼幼鱼选择平均体重为(16.33±0.11)g的草鱼鱼苗450尾,鱼苗健壮,随机将草鱼的幼鱼分为5组,每个试验组90尾,3个重复,每个网箱饲养30尾,饲养于15个网箱内。试验前将草鱼停食48小时,然后按照试验分组投喂含量茶多酚不同的饲料,每日饲喂两次,保证在20分钟内吃完且无残留饵料。饲喂60天后接种嗜水气单胞菌,继续饲喂15天。试验用的鱼按照分组饲养在不同的网箱内,水温在18-24℃左右,pH值6.8-7.5,溶氧保持在5mg/L以上,水池内配备过滤以及增氧设备。
试验结束后,停食24小时,在每个网箱中随机选3尾,采集尾静脉血,将采集的试验组草鱼静脉血液进行3000r/分钟离心,离心10分钟后缓慢吸取上清液,放置于-20℃冰箱内尽快进行检测。
本实验检测的血清指标为:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)三种项目,试剂采购自某生物工程研究所。
采集血清后,将每组随机选取草鱼20尾,设置3个重复,将试验草鱼每尾注射0.2mL浓度为1.6×108cfu/mL的嗜水气单胞菌,观察15天内的死亡情况,每天均进行详细的记录。
表2 结果显示,在草鱼饲料中添加茶多酚后超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)这三个检测项目的活性均高于未添加茶多酚的对照组,且当饲料中添加的茶多酚含量为500mg/kg和700mg/kg的三个检测项目的数值明显高于其他组(P<0.05),但700mg/kg数据有所下降,说明饲料中添加茶多酚量为500mg/kg可以显著提高SOD、CAT、ASP的活性。
表2 试验组饲料不同茶多酚含量的血清免疫指标
将一定浓度的嗜水气单胞菌注射于草鱼体内发生感染,各组草鱼的存活率如图1,在感染后的15天中,5个试验组的存活率均在下降,但是相比较而言,饲喂含茶多酚饲料的草鱼存活率高于对照组,尤其是试验组的茶多酚含量为500mg/kg、700mg/kg与其他组差异显著(P<0.05)
图1 试验组饲喂茶多酚感染嗜水气单胞菌存活率
茶多酚作为一种在茶中提取的物质,具有抗氧化功能,降脂功能以及抗菌抗病毒的功能。目前茶多酚在畜禽养殖业、水产养殖业等均有一定的应用并获得了较好的效果。2012年刘振东对茶多酚对罗非鱼生长情况等免疫指标进行研究,结果显示饲喂饲料茶多酚含量为133mg/kg时的罗非鱼生长状态、增重情况、非特异性免疫情况优于其他实验组。2017年崔光等研究了饲粮中添加茶多酚对于育成前期水貂的生长以及营养情况的影响,结果显示在日粮中添加0.05%的茶多酚可以有效的提高水貂钙磷比例的消化,更有意义生长。2020年陈明等研究了茶多酚对苏姜育肥猪的肉品质以及生长性能进行了研究,结果显示使用含量为300mg/kg时的饲料效果最佳。2021年蒋磊等研究了茶多酚对于肉鸡生长性能以及肉品质的影响,结果显示添加量为0.04%更有益于蛋鸡的生长和产出更高品质的肉。本试验通过对草鱼饲喂含不同浓度茶多酚的饲料,了解喂食60天后血清学免疫指标,免疫指标显示在饲喂含量为500mg/kg时指标数值最佳,且在后续的攻毒试验组中,饲喂含茶多酚500mg/kg、700mg/kg的草鱼生存率最高。
机体抗氧化能力的三种指标在饲喂含有不同浓度的茶多酚均有所提高,说明了饲喂茶多酚可以有效的提高草鱼机体的抵抗力。嗜水气单胞菌是一种主要通过肠道感染的致病菌,在接种病菌后会引起草鱼出现全身症状,当机体的免疫力得到有效的提高后可以防止该种细菌的感染,本试验采用的不同浓度茶多酚饲料均起到了提高血清免疫指标的作用,血清检测指标随着浓度的升高而升高,在饲喂浓度为700mg/kg的试验组中检测指标有所下降,主要原因是茶多酚浓度较高不能完全吸收起到了抑制的作用。机体抗病能力的提高有效的提高了草鱼感染嗜水气单胞菌后的生存率。在水产养殖中,通过饲喂饲料添加剂,提高抗病水平,可以有效的提高抗病力,为水产养殖业带来更好的效益。
茶多酚作为茶叶中提取的一种可以有效增加机体免疫力,抑制病菌生长的物质,应用于草鱼的养殖中会起到一定的积极作用,有效的提高养殖户的经济效益,本研究通过对草鱼的血清学免疫指标进行检测,感染试验组草鱼嗜水气单胞菌的生存率的实验结果显示,草鱼饲料中添加含量为500mg/kg的茶多酚更有益于提高草鱼的免疫力。
(通联:231300,安徽六安舒城县水产发展中心,18056479107)