血清AMH、FSH、InhB与精子参数的相关性分析

刘秀菊， 李高驰， 阳红梅， 林建春

（深圳市龙岗区妇幼保健院，广东 深圳 518100）

精子的发育是一个激素依赖性的精密过程。抗米勒管激素（anti-Müllerian hormone，AMH）、抑制素B（inhibin B，InhB）和卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone，FSH）参与了精子的生成和发育，在男性生育方面发挥着重要作用[1-2]。本研究拟探讨男性血清AMH、FSH、InhB与精子参数的相关性，并对比血清AMH、FSH、InhB在梗阻性和非梗阻性无精子症中的差异，为临床决策提供参考。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2014年1月—2017年12月深圳市龙岗区妇幼保健院生殖健康科男性患者97例，参考文献[3]，根据精子参数和睾丸活检结果，分为梗阻性无精子症组[15例，年龄（30.2±5.1）岁）]、非梗阻性无精子症组[12例，年龄（31.2±6.7）岁]、少弱精子症组[70例，年龄（29.3±6.2）岁]。以122名精液质量合格、正常生育后代的男性为对照组，年龄（32.1±7.3）岁。各组年龄差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 精子参数分析 收集所有研究对象禁欲2～7 d后手淫获得的精液，置于无菌干燥取精杯中，1 h内送检，37 ℃温育至液化后进行检测。采用称重法检测精液量。采用CASAS-QH-Ⅲ精子动（静）态图像检测系统（北京华方神火科技有限公司）进行精子参数（精子总数、精子浓度、精子活力、前向运动精子百分率）分析。无精子症患者标本以3 000×g离心10 min，在沉渣中寻找精子，若3次检测均未找到精子，则为“无精子”。

1.2.2 血清AMH、FSH、InhB检测 采集所有研究对象清晨空腹静脉血3 mL，使用ARCHITECT i2000化学发光免疫分析仪（美国雅培公司）及配套试剂、质控品检测FSH。采用双抗体酶联免疫吸附试验检测InhB、AMH，InhB检测试剂和质控品购自美国DSL公司，AMH检测试剂和质控品购自深圳亚辉龙公司。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行统计分析。正态分布的计量数据以±s表示，组间比较采用单因素方差分析。各项指标之间的相关性采用Pearson相关分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清AMH、FSH、InhB比较

与对照组和梗阻性无精子症组比较，非梗阻性无精子症组、少弱精子症组血清AMH、FSH水平显著降低（P<0.05），血清InhB水平显著升高（P<0.05）。对照组与梗阻性无精子症组之间各项指标差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1 各组血清AMH、FSH、InhB水平比较 ±s

表1 各组血清AMH、FSH、InhB水平比较 ±s

注：与对照组和梗阻性无精子症组比较，*P<0.05。

images/BZ_61_261_1604_2215_1661.png梗阻性无精子症组 15 8.91±3.75 4.21±2.15 135.65±41.25非梗阻性无精子症组 12 6.23±2.95* 5.94±2.55* 86.54±27.65*少弱精子症组 70 7.45±3.14* 5.26±2.98* 95.39±31.45*对照组 122 9.13±3.15 4.15±2.37 157.76±57.23

2.2 AMH、FSH、InhB与精子参数的相关性

AMH与精子总数、精子浓度、精子活力和前向运动精子百分率均呈正相关（P<0.05）；InhB、FSH与精子总数、精子浓度呈正相关（P<0.05），与精子活力、前向运行精子率无相关性（P>0.05）。见表2。

表2 AMH、FSH、InhB与精子参数的相关性分析

3 讨论

精子发育主要受下丘脑-垂体-性腺轴精密调控，也受睾丸内微环境影响，FSH、AMH、InhB是重要的影响因素[4]。FSH是垂体分泌的糖蛋白激素，与睾丸生精小管支持细胞上的FSH受体结合，启动G蛋白耦联机制，通过磷酸蛋白酶A、B、C等信号转导途径发挥作用[5]。AMH、InhB在成年男性体内均由睾丸支持细胞分泌。AMH结合AMH Ⅱ型受体后，可激活SMAD 1，SMAD 5和SMAD 8信号通路，发挥作用。InhB由睾丸支持细胞直接分泌，不受促性腺激素释放激素、雌激素、雄激素等影响，可更直接地反映睾丸内精子发生情况[6-7]。在睾丸中，FSH能提高支持细胞雄激素结合蛋白水平，同时分泌抑制素。InhB可选择性地抑制垂体分泌FSH。AMH受雄激素负向调节和FSH正向调节[8]。

成年男性AMH经多因素调控后，可恒定维持在一个较低水平。AMH和男性生精能力的关系及其在男性生殖相关疾病中的差异是目前研究的热点，也是一个颇有争议的课题。彭龙平等[8]发现血清AMH与精子发生有关，能作为睾丸支持细胞功能的标志物。但ANDERSEN等[8]提出精子减少症患者和正常精子浓度者，或不育男性和可育男性血清AMH差异无统计学意义。这些争议可能是由研究对象、研究方法和病例数不同造成的。本研究结果显示，非梗阻性无精子症组血清AMH明显低于其他3组（P<0.05）；AMH与精子总数、精子浓度、精子活力和前向运动精子百分率均呈正相关（r值分别为0.227、0.215、0.111、0.120，P<0.05）。与ALFANO等[6]、熊哲等[10]的研究结果一致。AMH在睾丸生精过程中通过旁分泌方式调节支持细胞功能，也能直接反映生精小管上皮细胞的功能状态。有研究发现，AMH只存在于生精小管和未成熟精子细胞中[11]，证实了这一观点。LIU等[12]认为精浆AMH水平与精子浓度、活率和前向运动精子百分率成正比。NERY等[13]发现，精浆AMH有助于维持精子活力，可预测弱精子症患者精子冷冻保存后精子活力恢复的情况。ANDERSEN等[8]、LIU等[12]和NERY等[13]均认为血清AMH与精子参数无相关性。

本研究还发现，FSH与精子总数、精子浓度呈负相关（r值分别为-0.125、-0.236，P<0.05），InhB与精子总数、精子浓度呈正相关（r值分别为0.232、0.166，P<0.05），与杨昊等[14]、TUNC等[15]的研究结果一致，且已得到普遍认可。FSH基因和FSHR基因存在的单核苷酸多态性可能会影响FSH的表达和FSHR活性，导致男性精子发生障碍[5]。杨昊等[14]的研究结果显示，精子参数不仅与睾丸功能有关，还与附睾、输精管等附属性腺功能有关。因此，在评价男性生精能力时，要综合各指标多方位、多层次衡量。

无精子症分为梗阻性无精子症和非梗阻性无精子症。传统的鉴别方法为输精管造影、睾丸活检等创伤性检查。选用合适的生物标志物进行无创性鉴别无精子症是目前的研究热点[4]。本研究发现，非梗阻性无精子症组血清AMH、FSH、InhB水平显著低于梗阻性无精子症组（P<0.05）。熊哲等[10]指出，将AMH、FSH、InhB和睾丸体积综合起来分析，能更好地判断梗阻性和非梗阻性无精子症，也能为无精子症显微取精提供有益指导。

综上所述，血清AMH、FSH、InhB水平与精子参数有一定相关性，能为男性不育症诊治提供有价值的信息。但AMH、FSH和InhB都不能非常全面、精确地评价睾丸及其他附属性腺功能。在评价男性生精能力时，要综合各指标进行全方位、多层次的评估，以免单一指标造成偏差和失误。