高速逆流色谱法在天然药物活性成分分离中的应用

李秋月 谢萍 申丽君 李国春

摘要：目的 研究高速逆流色谱法（HSCCC）在天然药物分离纯化领域中的应用。方法 收集和整理 CNKI 数据库中相关文献，归纳高速逆流法在分离天然药物成分中研究进展。结果 高速逆流色谱技术已初步形成一套比较完整的理论体系。结论 高速逆流色谱法在天然产物成分分离中已广泛应用，以期为我国药物制备的研究提供参考。

关键词：高速逆流色谱法;天然药物;分离;应用

【中图分类号】R97             【文献标识码】A             【文章编号】2107-2306（2021）09--01

高速逆流色谱（ high-speed countercurrent chromatography，HSCCC ）是 20 世纪 80 年代发展起来的一种连续高效的液-液分配色谱分离技术，具有样品无损失、无污染、高效、快速和大制备量分离等优点。HSCCC与传统的分离纯化方法相比具有显著优势，己被广泛应用于中药成分分离、天然产物化学等领域。本文综述了近年来高速逆流色谱在天然产物方面的应用。

1 应用于天然药物成分分离

1.1黄酮类

黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环通过三个碳原子相互连接而成的化合物。黄酮类化合物广泛分布于自然界中，利用 HSCCC 分离纯化对其活性具有重要意义。潘霞等[1]以芦荟叶为原料，经预处理得到芦荟色酮粗提物，再采用氯仿-甲醇-水和二氯甲烷-甲醇-水为分离系统，经两次 HSCCC 分离纯化，得到芦荟色酮。CAO X 等[2]采用乙酸乙酯-正丁醇-水体系，经HSCCC法一次分离纯化得到包括葛根素在内的6种相对纯净的异黄酮。

1.2生物碱

生物碱一般是指生物体中含一类含氮有机化合物，多具有生物活性和碱性。目前已有大量的研究结合了HSCCC技术进行生物碱的提取分离。Tang 等[3]利用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-HCl体系，从黄花乌头中分离出 6 种生物碱。Liu 等[4]采用正己烷-乙酸乙酯甲醇-水体系，从吴茱萸中分离出 5 种生物碱。

1.3萜类

萜类化合物在植物界中广泛存在，苏丹等[5]在山芝麻乙酸乙酯萃取部位采用二步分离法进行 HSCCC 分离，制备得到 6 个化合物。何维[6]采用正己烷乙酸乙酯-甲醇水体系，利用 HSCCC 分离技术从雷公藤粗提物中一次性得到了五种萜类化合物。

1.4苷类

苷类又称配糖体，是糖或糖的衍生物与另一种类型的非糖物质通过糖端基碳原子连接形成的化合物。张敏[7]同时结合 HSCCC 与 HPD-100 大孔吸附树脂方法分离龙胆中龙胆苦苷和当药苷。Huang 等[8]采用正己烷-正丁醇-水体系，从甜叶菊中成功分离得到 3 种甜菊甙。

1.5 其他

俞静静等[9]利用高速逆流色谱法（HSCCC 法）结合HPLC、ESI-MS等技术，以三氯甲烷-甲醇-水为溶剂系统，对何首乌粗提物中蒽醌类成分进行分离纯化并进行结构鉴定研究，分离鉴定得到了4种蒽醌类成分。

2 结论

在大量研究中发现，HSCCC 既适用于已知化学成分的定向分离，在新化合物的发现方面也有独特优势，可作为筛选新成分的方法之一。HSCCC技术如今日趋成熟，其提取分离物主要以萜类、黄酮、生物碱、皂苷多酚类和蒽醌类衍生物为主。在蛋白质等大分子的分离纯化中也有大量研究，与其他技术联用进行提取分离，进一步完善传统色谱方法的不足，使高速逆流色谱技术在标准品制备、天然产物化学成分研究、新药研发等领域得到更加广泛应用。

参考文献：

[1] 潘霞， 曹学丽， 董银卯， 等. 芦荟色酮的高速逆流色谱分离制备方法研究[J].色谱， 2005， 23（1）： 96-99.

[2] CAO X， TIAN Y， ZHANG T Y. Separation and Purification of Isoflavones from Puera ria lobata by High Speed Counter-current Chromatography[J]. Journal of Chromatography A， 1999， 55（8）： 709-713.

[3] Tang Q F， Yang C H， Ye W C， et al. Preparative isolation and purification of bioactive constituents from Aconitum coreanum by high-speed counter-current chromatography coupl ed with evaporative light scattering detection[J]. Journal of Chromatography A， 2007， 1144 （2）： 203-207.

[4] Liu R， Chu X， Sun A， et al. Preparative isolation and purification of alkaloids from the C hinese medicinal herb Evodia rutaecarpa （Juss.） Benth by high-speed countercurrent chroma tography[J]. Journal of Chromatography A， 2005， 1074（1/2）： 139-144.

[5] 蘇丹， 高玉桥， 梁耀光， 等. 高速逆流色谱法分离制备山芝麻中的三萜类成分[J]. 中药材， 2016， 39（05）： 1053-1056.

[6] 何维. 雷公藤初提物中萜类化合物分离及鉴别[J]. 儿科药学杂志， 2009， 15（5）： 48-50.

[7]张敏. 高速逆流色谱分离纯化人参、龙胆中的有效成分[D]. 长春师范学院， 2011.

[8]俞静静， 李瀚元， 楼招欢， 等. 高速逆流色谱法分离何首乌粗提物中蒽醌类化合物及组分结构鉴定[J]. 药物分析杂志， 2015， 35（11）： 1888-1892.