武彩红,邱树磊,刘剑华,刘 莉,袁 橙,陆 辉*,刘 浩
(1.江苏农牧科技职业学院,江苏泰州 225300;2.泰州医药高新技术产业开发区凤凰畜牧兽医站,江苏泰州 225300)
养猪业是畜禽养殖的重要组成部分,经济新常态下,我国养猪业正朝着规模化、智能化和特色化方向发展。但当前我国养猪业正面临三大瓶颈,猪只饲养效率低、免疫力低和对激素、抗生素过度依赖。自抗生素作为饲料添加剂被应用于养殖业已70多年,虽促进了养殖业的快速发展,但也带来了动物耐药、动物性食品质量安全、生态环境污染等一系列问题,严重威胁人类健康和生命(王蕾蕾和许金新,2021)。在这样的背景下,农业农村部194号公告要求,我国从2020年1月1日起退出除中药外的所有促生长类药物饲料添加剂品种。
随着饲料禁抗的推行,猪病特别是肠道疾病易发,而仔猪抵抗力低,肠道发育尚未完全,更易发生腹泻(陈维和谭涛,2021)。母猪健康状态及免疫功能是影响哺乳仔猪健康成长的重要因素(郭剑英等,2014)。因此,为维持和提高养猪生产效益,如何突破养猪业瓶颈,选择合适的替抗方案备受关注。中药作为添加剂具有独特优势,具有来源天然、功能多样、安全可靠、经济环保等特点。许多研究表明,中草药及其提取物具有抗菌、抗病毒,提高动物机体免疫力等作用(马洪第等,2011)。因此,本试验在临产母猪日粮中添加复方中药,研究其对母猪免疫力及仔猪腹泻的影响。
1.1 试验动物和分组 试验将12只健康、临产前1个月母猪随机分为4组,每组3只,1组为对照组,每天饲喂正常日粮;2~4组分别为低、中和高剂量复方中药组,在日粮中分别添加0.3、0.6和0.9 g/kg复方中药。试验期内,母猪及仔猪的日常管理均按照日常饲养管理执行。
分别在试验开始后第0、10、20和30天母猪空腹耳缘静脉采集血液,将其分为2份,一份用于分离血清,-20℃保存,用于体液免疫指标测定;另一份为EDTA抗凝血,用于细胞免疫指标测定。
1.2 复方中药组方及制备 主药博落回、泽泻、泡桐花、马齿苋、葛根、黄芪等按照一定比例混合后粉碎,然后于温箱中烘干后分装,密封、避光保存备用。
1.3 方法
1.3.1 体液免疫测定方法 按照猪IgG ELASA检测试剂盒说明书测定特异性IgG含量。
1.3.2 细胞免疫测定方法 参照武彩红等(2017)方法,抗凝血经裂解、离心和固定处理后,采用流式细胞仪测定外周血淋巴细胞亚群CD3+含量和CD4+/CD8+值。
1.3.3 仔猪腹泻评价方法 出生后14d为仔猪腹泻试验期。仔猪腹泻率为腹泻仔猪数占供试总仔猪数的百分率;腹泻指数为仔猪粪便评分与供试总仔猪数的比值。对仔猪腹泻评分参照颜诚等(2012)方法,外观条形或粒状粪便,评为0分;软粪、成形,评为1分;稠状、不成形、粪水无分离现象,评为2分;不成形、粪水分离,评为3分。
1.4 数据处理 试验数据采用SPSS统计软件中的ANOVA进行统计分析。
2.1 日粮中添加复方中药对母猪血清IgG含量的影响 由图1可见,添加复方中药后第10天,各给药组血清IgG含量与对照组无显著差异(P>0.05);至第20和30天时,所有给药组血清IgG含量均显著高于对照组(P<0.05),但在第20和30天时,低、中剂量组较高剂量组均增加明显。
图1 日粮中添加复方中药对母猪血清IgG含量的影响
2.2 日粮中添加复方中药对母猪CD3+含量和CD4+/CD8+值的影响 由图2可知,添加复方中药后第10天,各给药组血液CD3+含量与对照组无显著差异(P>0.05);至第20和30天时,所有给药组血液CD3+含量均显著高于对照组(P<0.05),但以中剂量组较低、高剂量组升高更为明显。
图2 日粮中添加复方中药对母猪CD3+含量的影响
由图3可知,添加复方中药后,低剂量组仅在第30天CD4+/CD8+值显著高于对照组(P< 0.05),高剂量仅在 20d时 CD4+/CD8+值显著高于对照组(P<0.05),而中剂量组在用药后各测定日龄CD4+/CD8+值均显著高于对照组(P<0.05)。
图3 日粮中添加复方中药对母猪CD4+/CD8+的影响
2.3 日粮中添加复方中药对仔猪腹泻的影响从图4可知,低剂量给药组仔猪腹泻率为12.49%,与对照组仔猪腹泻率(14.76%)无显著差异(P>0.05);中剂量组和高剂量组仔猪腹泻率分别为9.78%和11.4%,均显著低于对照组(P<0.05);给药组间相比,中剂量组仔猪腹泻率显著低于其他两组,也存在显著差异(P<0.05)。
图4 日粮中添加复方中药对仔猪腹泻率的影响
从图5可知,各组间仔猪腹泻指数均存在统计学差异(P<0.05)。低、中、高剂量组仔猪腹泻指数分别为0.30、0.19和0.26,均显著低于对照组(0.41,P<0.05)。各给药组之间仔猪腹泻指数也具有统计学差异(P<0.05)。
图5 日粮中添加复方中药对仔猪腹泻指数的影响
初生仔猪消化器官未发育完全,体温调节机能不全,免疫力低下,很容易受到致病因子侵袭,生产实践中尤以仔猪腹泻最为常见,不仅影响仔猪存活率,而且严重影响其后期的生长性能,成为制约养猪业健康发展的主要疾病之一。母猪健康状况很大程度决定了仔猪体况,因此,许多学者提出“母源疗法”(王荣梅等,2015;苏荣胜等,2014;颜诚,2012;盘春秀,2007)。本试验根据临产母猪及初始仔猪的生理特点,根据中药药性及功效,选用主药博落回、泽泻、泡桐花、马齿苋、葛根、黄芪等组成复方中药添加于临产前母猪饲料中,借此提高母猪免疫力,预防仔猪腹泻,提高生产性能。
3.1 日粮中添加复方中药对母猪免疫力的影响机体免疫反应包括细胞免疫和体液免疫。IgG反映机体全身免疫状态,是体液免疫最具代表性的指标之一。研究表明,当机体受到外界病原侵袭时,免疫球蛋白会结合抗原或病原菌对机体产生保护作用,其中IgG对机体发挥重要作用(Sheila等,2019)。细胞免疫通过T淋巴细胞介导,CD3+、CD4+、CD8+为T淋巴细胞的3个主要亚群。其中CD3+代表动物机体外周血T淋巴细胞总数(武彩红等,2017),是T淋巴细胞的特异性表面标志。CD4+细胞和CD8+细胞分泌具有抗病毒特性的细胞因子,产生抗体等多种途径为机体提供保护性免疫(屈雪琪等,2011),其二者比值反映了机体的免疫防御能力(屈雪琪等,2001)。
本试验通过给临产母猪饲喂复方中药,各给药组都在一定程度上表现为血液中IgG含量及CD3+含量增加,CD4+/CD8+值增高,说明该复方中药可有效提高母猪的免疫力。
3.2 日粮中添加复方中药对仔猪腹泻的影响仔猪腹泻容易虚脱,严重则会引发死亡,在养猪业危害中居首位。本研究基于“母源疗法”和“子病治母”理论,于临产母猪日粮中添加复方中药,以期达到“未病先防”功效。腹泻率和腹泻指数分别反映仔猪腹泻发生的比列和严重程度(颜诚等,2012),本研究将二者相结合用于评价仔猪腹泻状况。研究发现,在临产母猪日粮中添加复方中药可有效降低腹泻率和腹泻指数,且中剂量复方中药组效果更明显。说明在母猪日粮中合理添加复方中药可在一定程度上改善仔猪腹泻的发病及发病程度。