佛山地区输血患者红细胞血型不规则抗体分布特点及分析

吴敏华，蔡 葵，朱琳睿，黎裕元

佛山市第一人民医院输血科，广东 佛山 528000

输血前检测是保证临床用血安全的重要手段，随着输血技术的不断完善和发展，输血前ABO血型鉴定已避免了极大一部分的输血不良反应的发生，现随着不规则抗体筛查的普及，使由于不规则抗体引起的临床输血不良反应逐渐得到重视［1］。血型不规则抗体是指ABO血型系统以外的其他血型系统抗体，如Rh、MNS、Lewis等血型系统的抗体，是引起免疫性溶血性输血反应、新生儿溶血病、血型鉴定以及交叉配血困难的主要因素之一［2］，把不规则抗体筛查作为拟输血患者输血前检测的常规项目，进一步保障临床用血安全。由于抗体分布有地域差异，收治不同患者不同医院存在差异［3-4］，特别是综合性医院和专科。佛山市第一人民医院属于南方综合性三甲医院，人群分布会导致抗体分布有所不同，故现对本地区人群不规则抗体的分布特征和频率进行调查分析，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

从临床输血安全与血液管理软件（广州创惠信息科技有限公司，2.0版）选择2020年1月—11月佛山市第一人民医院拟进行输血患者的不规则抗体检查结果共10 423例，阳性结果共112例。（1）阳性纳入标准：①不同方法学复查确定阳性标本者；②谱细胞鉴定阳性标本者。（2）排除标准：①复查后阴性标本者；②谱细胞无法鉴定标本者；③使用抗CD38等用药干扰实验结果标本者。（3）符合纳入/排除标准112名患者入组研究对象，年龄1天～78岁，其中男性40名、女性72名，见表1。

表1 红细胞不规则抗体阳性结果比较 例

1.2 设备与仪器

不规则抗体检测红细胞试剂盒[奥森多医疗器械贸易（中国）有限公司、上海血液生物医药有限责任公司]；抗人球蛋白试剂卡[奥森多医疗器械贸易（中国）有限公司、达亚美有限责任公司]、AUTOVUE innova全自动血型配血分析仪[奥森多医疗器械贸易（中国）有限公司]；抗体鉴定谱细胞（Reagens公司）；孵育器；离心机。以上所有试剂均在有效期内使用。

1.3 实验方法

（1）收集患者静脉血2～5 ml于EDTA-K2抗凝管中，离心后利用全自动血型分析仪进行不规则抗体筛查，具体操作按照科室SOP文件进行，质控在控。结果由系统自动判读，以任何一系或多系细胞出现凝集在凝胶上层或中间为抗体阳性。（2）对抗体筛查初步阳性患者标本进行复检：采用不同试剂、不同试剂卡、试管法进行复查，复查结果仍为阳性的标本进一步用抗体鉴定谱细胞进行抗体特异性鉴定。（3）血型不规则抗体特异性鉴定：采用谱细胞使用微住凝胶法进行进一步鉴定，同时加做自身对照试验，根据反应格局明确抗体性质。当受检血浆与所有谱细胞以及自身细胞的凝集强度一致时判断为非特异性自身抗体；对存在同种抗体的患者血清分别采用盐水法、不同标准红细胞的微住凝胶法检测后对照标准细胞谱采用阴性排除法判断抗体类型。

1.4 统计学方法

使用IBM SPSSStatistics V22.0.0软件对数据做统计学分析，计数资料以例数和百分比（%）表示，采用χ2检验，纳入标准和剔除标准分别为0.05和0.10；以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 红细胞血型不规则抗体分布特点

10 423例检测不规则抗体的患者中共鉴定出特异性抗体112例，总体检出率1.07%，男性患者不规则抗体检出率为0.73%，女性患者不规则抗体检出率为1.47%，男性显著低于女性（P＜0.001）；此外有输血史患者阳性检出率为1.47%，明显高于无输血史患者的0.85%（P＜0.005）；72例不规则抗体阳性女性患者中有61例有妊娠史，其阳性率明显高于无妊娠史患者（P＜0.001），见表1。

2.2 112例不规则抗体阳性患者鉴定

112例不规则抗体阳性患者鉴定出107例，占87.70%（107/112），主要为Rh血型系统60例，占56.07%，其中以抗-E抗体检出率最高，占35.51%；其次为MNS血型系统26例，占24.30%，其中以抗-M检出率最高，占19.63%；P血型抗体检出2例、Lewis 9例、Kidd血型5例、Duffy血型1例、Diego血型1例，混合抗体3例，见表2。

表2 红细胞血型特异性抗体分布

3 讨论

本研究对10 423例预输血患者进行了抗体筛查试验，共检出不规则抗体阳性112例，阳性检出率为1.07%，我国拟输血患者中不规则抗体阳性检出率不同地区不同种族之间存在较大区别，大概在0.3%～2.0%之间，与研究的实验结果接近［5-7］。不规则抗体是免疫血液学中被广泛熟知的红细胞抗体，目前已发现其能与ABO以外的32种血液系统的红细胞抗原发生反应，可能导致机体出现红细胞输注无效、新生儿溶血病、免疫性溶血性输血反应、自身免疫性溶血反应等输血不良反应，极大地危害患者生命安全［8］。因此，输血前进行红细胞血型不规则抗体的检查对于确保输血安全十分重要。

本研究检出的112例不规则抗体阳性患者中，男性患者的阳性率为0.73%，明显低于女性患者的阳性率1.47%；有输血史患者阳性率为1.47%，明显高于无输血史患者的阳性率0.85%；有妊娠史患者阳性率4.97%，明显高于无妊娠史患者的0.30%；输血和妊娠两者差异均具有统计学意义。输血和妊娠是导致患者产生不规则抗体的主要原因［9-10］，而女性同时存在输血和妊娠双重免疫机会，这使女性获得不规则抗体几率比男性更大，这与本次研究的结果相符合。这也提示我们输血医务工作人员要严格遵循《临床输血技术规范》的规定，对有输血史、妊娠史或短期内需要输血者必须做抗体筛查试验和抗体鉴定试验，对抗体阳性者要选择适当的方法对不规则抗体进行鉴定。有报道显示，每输注1 U血液制品产生不规则抗体的概率为1.0%～1.6%，多次输血则红细胞致敏风险高达15%～20%［11］，说明多次输血患者做抗体筛查试验意义十分重大。此外这也提示有输血史或妊娠史的孕妇及其丈夫进行产前抗体筛查试验，以减少新生儿溶血病的发生率。

112例不规则抗体阳性患者中共鉴定出了107例不规则抗体，检出率87.70%。分布结果表示，Rh血型系统占大部分，其次是MNS血型系统和P血型系统。这提示Rh血型系统可能是造成迟发性溶血反应的重要原因之一，大多数Rh血型抗体为免疫性IgG抗体，此类抗体可结合输入患者体内的或表面具有此相应抗原的红细胞，进而破坏红细胞缩短红细胞的寿命，引起溶血性输血不良反应。如果母婴Rh血型不合，母亲体内可能会产生相应不规则抗体进入胎儿血液循环，导致严重的新生儿溶血病［12］。本次研究中Rh血型系统中又以抗-E抗体分布为主，这可能的原因如下：E抗原在我国汉族人群中分布频率为47%［5］，研究表明，抗原阳性与阴性百分率越接近，产生的抗体机会也越多。并且由于临床输血中，对患者E抗原的检测普及程度较低，故E抗原阴性的患者基本上是随机输血，患者通过输血获得E抗原刺激产生抗-E抗体的概率明显增加［13-14］。对比之下，抗-D抗体虽是Rh血型系统中免疫原性最强的抗原，且我国汉族人群D抗原分布频率高达99.6%，但本次研究产生的抗-D抗体仅2例，这与目前国内普遍开展了D抗原检测有关，对RhD阴性的患者确保尽量输注RhD阴性血制品。此外，本研究发现抗-M抗体与抗-Lea抗体也是临床相对较常见的抗体，多为IgM类抗体。由于抗-M抗体容易造成新生儿溶血病，对于抗-M为阳性的孕妇或者儿童，输血时应特别注意预防溶血反应的发生，有条件的可采取输注相应抗原阴性的红细胞。

本研究检出Kidd血型系统抗体共4例，其中抗-Jka抗体3例，抗-Jkb抗体1例，抗体产生率为0.047%，构成比为4.67%，比例高于其他同类型的研究［15］，可能与Kidd血型系统的抗体产生快，消失快，没有免疫刺激，抗体强度迅速下降至检测阈值以下的特点，以及本研究单位属于三甲医院，重症患者，反复输血患者较多，因此抗体检出相对较容易等原因有关。Kidd血型系统抗体不容易检出，却容易导致严重的迟发性溶血性输血反应，因此对于一旦产生这类型抗体的患者，后期无论抗体是否减弱至无法检出，都要尽量选择抗原阴性的红细胞为其进行交叉配血，避免因为免疫回忆反应，导致溶血［16］。

在本研究中，还发现一例罕见的抗-Fya抗体。由于国内Fya抗原属于高频抗原，在我国抗原频率达到99.85%［17］，在佛山地区的献血员中，找到Fya抗原阴性的个体极其困难。因此本院通过在患者家系中寻找，以及求助稀有血型库等方法，为该患者选择合适的献血者。这要求我们在应对高频抗原抗体时，要有更广阔的思路。各地区的输血医学医务工作者也应通力合作，尽快建立针对不同抗原的稀有血型库。

由于本单位在抗体鉴定谱细胞（Reagens公司）、抗体筛查细胞（美国强生公司奥森多公司、上海血液生物医药责任有限公司）所有批次的细胞中，均没有标注是否包含Mur抗原。而Mur抗原在我国南方地区抗原频率相当高，广州地区无偿献血者中Mur抗原阳性的频率为6.59%，番禺地区为7.16%，香港地区为6.28%，台湾地区平均频率高达7.3%。香港地区的研究更显示，抗-Mur在患者和孕妇中出现的频率分别为0.34%和0.46%，是该地区最常见的同种不规则抗体［18-19］。因此不排除本研究有漏检抗-Mur抗体的可能性，这为本次研究的局限性。在后续研究中，应针对本地区抗原分布的特点，在抗体筛查细胞中，增加具有Mur表型的红细胞，使本研究中抗体分布的数据，更加真实客观，也更能保障患者输血的安全。

综上所述，临床对于拟输血的患者进行红细胞不规则抗体的筛查和鉴定具有重要临床意义，选择输注对应抗原阴性的血液制品能够有效减少输血反应的发生，提高临床输血安全性和有效性。对此输血科于2020年开始对拟输血患者普及了Rh血型鉴定，给与输血患者输注相应抗原阴性的血液制品，减少输血不良反应的发生，保证医疗安全、保障患者利益。同时应加强不规则抗体记录管理，一旦患者检出不规则抗体阳性，应提前备血，避免患者需急用输血时无法提供合适血制品；并及时记录避免随时间推移患者体内抗体滴度减弱至无法检测而导致记忆性免疫反应。本研究的局限性在于只是针对一家医院一段时间的红细胞不规则抗体筛查病例所作的回顾性分析，是否能代表该地区的红细胞不规则抗体的现状，尚需更大范围、更长时间以及更多的病例数，对红细胞不规则抗体阳性患者进行抗体鉴定并输注对应抗体阴性血液具有重要临床意义。