卡式微柱凝胶试验在临床输血检验中的应用

吕腾腾

芮城县人民医院，山西 运城 044600

输血是指将一个人身上抽取的血液输入需要的患者体内的过程，其不仅关系到患者生命安全，与其预后同样密切相关。为确保输血成功，捐赠者与接收者的血型必须相容，否则接收者血液内原本存在的抗体会攻击外来血细胞，进而出现血凝块，严重威胁到患者的生命安全，故输血前开展检验有着非常重要的意义［1］。传统的输血检验方法包括酶法、盐水介质法等，上述方式虽然可达到检验效果，但容易受到外界因素干扰，降低检验准确率，并且较复杂的操作过程会错过最佳治疗时间，不利于患者转归。随着医疗技术的发展进步，操作简单、灵敏度高的卡式微柱凝胶试验被逐渐用于输血检验中。本次研究就该试验的实际效果展开探究，现报告如下。

1 仪器样本准备

1.1 仪器和检测卡

本次试验所用抗人球蛋白卡为长春博研生物技术有限责任公司生产，该检测卡系在聚丙烯塑料透明卡上的六支微柱形管中填充葡萄糖凝胶和抗人球蛋白（多抗），凝胶微管分为反应腔和凝胶分离柱。上腔部分或封口处有气泡或滴液的卡，必须在使用前离心。本次试验所用不规则抗体检测试剂为长春博讯生物技术有限责任公司，该套试剂由3人份（单人份/瓶）直接抗人球蛋白试验阴性的O型健康成人红细胞组成，红细胞上含有能引起输血性溶血反应的抗原，抗原谱至少包括Rh系统的D、C、E、c、e抗原，Kidd系统的Jka、Jkb抗原，MNS系统的M、N、s抗原，Kell系统的K抗原，Duffy系统的Fya、Fyb抗原，Lewis系统的Lea、Leb抗原，P系统的P1抗原。每套试剂红细胞中至少有2人份红细胞含有D、C、c、e、s、Fya、K抗原，至少1人份红细胞含有E、Jka、Jkb、M、N、Fyb、Lea、Leb、P1抗原。本次试验所用仪器是长春博研科学仪器有限责任公司生产的TD-A型医用离心机、FYQ型试剂卡孵育器。

1.2 样本要求

红细胞样本：用紫色帽含EDTA抗凝剂的血常规管采集被检对象静脉血，该标本不能放入4℃～10℃冰箱保存，以避免红细胞在患者体外致敏所致假阳性反应，红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血液做本试验。如不得不用过夜血或者陈旧血，则必须首先用该标本做阴性试验对照，以确定该标本是否可以完成本次试验。溶血、严重脂血、或被污染的样本不得用于此次试验。将标本配置成红细胞低离子溶液悬液，红细胞最终浓度为0.5%～0.8%。浓度过高或过低的红细胞悬液会引起异常结果。

血清样本：采集被检对象静脉血，注入无抗凝剂试管中，4℃放置12小时，或者37℃放置2小时候后离心，2 000 rpm，10分钟，取上清，该上清不得有絮状物或者沉淀。血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中析出的或者红细胞悬液中残留纤维蛋白可阻碍红细胞沉降，使非凝集细胞离心后在胶体表面形成一条红线，呈假阳性反应。

2 资料与方法

2.1 一般资料

采取随机数表法将在医院需接受输血治疗的126例患者分为两组，每组各63例，一组为应用盐水凝集法检测血型抗原的对照组，另一组采取卡式微柱凝胶试验检测血型抗原，设为的研究组，患者资料整理时间为2019年12月—2020年12月。对照组男、女分别为33例、30例，年龄20～74岁，平均年龄（46.82±5.37）岁；研究组男、女分别为31例、32例，年龄21～75岁，平均年龄（46.76±5.44）岁。纳入标准：（1）经体检满足输血要求者；（2）非稀有血型患者；（3）签署知情同意书者。排除标准：（1）认知障碍患者；（2）血液系统异常患者；（3）各系统肿瘤或癌症患者（4）妊娠期或哺乳期妇女。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性。

2.2 方法

2.2.1 保证试验采集的血清标本均无不规则抗体 本次试

验在采集126例标本前均对患者血清做了不规则抗体筛查试验。详细如下：（1）将抗人球蛋白检测卡做好患者的名字，编号标记。（2）将4%不规则抗体检测试剂（人血红细胞）用LISS溶液稀释到浓度0.8%，将50 ul（1滴）0.8%I、II、III型检测红细胞分别加入对应的微管中。（3）将50 ul（1滴）患者的血清分别加入标记I、II、III的微管中。（4）将加好红细胞和血清的检测卡放置到FYQ型孵育器中37℃孵育15分钟。（5）孵育完成后用卡式法专用离心机离心机（TD-A型医用离心机）离心。（6）肉眼观察检测卡的结果。本次不规则抗体筛查试验结果：对于本次试验的126份标本，肉眼观察到的红细胞与血清结合物（抗原抗体复合物）均无有效形成，红细胞全部明显沉于微管底部，说明本次126份患者血清标本均无不规则抗体。

2.2.2 对照组采取盐水凝集法检测血型抗原 应用玻片法或试管法促进细胞凝集。研究组行卡式微柱凝胶试验，详细如下：应用凝聚胺试剂进行配血操作，仪器选择卡式微柱凝胶免疫卡、红细胞血型免疫试剂及谱细胞等，机体存在可与试剂中Fc反应的指示性红细胞，若被检测的血清中存在抗血小板抗体，则会有新的复合物产生，此时添加有着聚集作用的交联试剂可形成网状结构。而卡式微柱凝胶系统柱子有离心力，形成的网状复合物在与凝胶表层产生作用后可与红细胞分离。由于不同血液标本结合情况不一样，也会表现出差异性的阳性凝聚情况［2］。严格依照规范流程展开相关操作，在试管内加入0.6%氯化钠溶液进行正定型、反定型检验。在卡式微柱凝胶管上做标记并配置红细胞悬浮液，在A、B两管中加入50μl配置好的红细胞悬浮液，取两管中20μl溶液加入到已标记的式微柱凝胶管中，并取50μl待检血清及抗D血清加入到D试管中，在A1管中加入A、B型红细胞悬液各50μl，在B1管中加入待测样品。在37℃下孵育10 min，将50μl混合血小板的O型血加入凝胶管中并在900～1 000 r/min下离心，得到最终检验结果［3］。

2.3 观察指标

（1）检验符合率，包括正定型及反定型。正定型：研究组显示柱内凝胶与部分或全部红细胞结合；对照组显示红细胞发生凝集。反定型：研究组表现为管内红细胞完全沉淀到柱子底部；对照组显示红细胞表现为游离状态。（2）不良反应情况，包括乏力、头晕、胸闷等。

2.4 统计学方法

采用SPSS 21.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 检验符合率

与对照组比较，研究组正定型及反定型符合率均更高（P＜0.05），见表1。

表1 检验符合率比较 例（%）

3.2 不良反应

与对照组比较，研究组不良反应发生率更低（P＜0.05），见表2。

表2 不良反应发生率比较 例（%）

4 讨论

在输血治疗前，血型检验可避免溶血、血栓等抗凝反应发生，确保输血安全性。同时，临床也要保障输血的及时性，若无法及时纠正血容量不足情况，也会导致较高的致残率和死亡率。但传统的盐水法在检验时容易受到外界因素影响，难以保障检验准确性，同时其自动化程度较低，操作过程复杂，人工因素影响较大，不利于在最佳救治时间窗内完成输血治疗［4］。传统的盐水法只能检测出血清里的完全抗体IgM，不能检测出患者血清中存在的不完全抗体IgG。作为一种新型的输血检验方法，卡式微柱凝胶试验能借助微小凝胶颗粒构成的滤网及离心操作来分离血液中的红细胞及非凝聚红细胞，随后利用计算机显示不同红细胞图谱，在严格比对后可实现标准化解读，快速准确的完成血清配对。与传统方法相比，卡式微柱凝胶试验自动化程度高、检验准确率高，可检测出患者血清中的完全抗体IgM和不完全抗体IgG，可有效提升输血安全性。本次研究中，两组分别采取盐水凝集法及卡式微柱凝胶试验进行检验后，研究组正定型、反定型符合率更高，输血不良反应发生率更低。

综上所述，在输血检验中，卡式微柱凝胶试验具有操作简单，准确率高，检测影响因素少，特异性强，敏感性高，易于观察等特点，可有效提升输血安全性，可作为血型鉴定和交叉配血的首选方法，因此更值得推广。