ABCB1基因C3435T多态性与儿童急性淋巴细胞白血病发病情况的相关性

孙元杰 牛银萍 关红梅

急性淋巴细胞白血病(ALL)是常见的一种儿童血液系统恶性肿瘤，多发于学龄期儿童和学龄前期儿童。依照不同危险强度分为低危、中危和高危，不同危险度的ALL治疗强度也有所不同，预后情况也有所不同。但是对ALL患儿进行长期化疗之后会引发严重不良反应情况，特别是对高危患儿来说，高强度化疗的不良反应会更加严重[1]。因此需要不断发掘新的诊断因素，对急性淋巴细胞白血病患儿危险程度精确诊断，并制定合理的治疗方案，提升对ALL患儿的治疗效果，减少不良反应的发生[2]。因此本文选取60例急性淋巴细胞白血病患儿作为研究对象，分析ABCB1基因C3435T多态性与儿童急性淋巴细胞白血病发病情况的相关性，具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院2018年7月到2021年3月共收治的60例急性淋巴细胞白血病患儿作为研究对象，依照中国抗癌协会小儿专业委员会急性淋巴细胞白血病2015方案(CCCG.ALL.2015)的危险度分级标准[3]，将患儿分为低危组(n=25)和中高危组(n=35)。入选标准：所有患儿经分子生物学、细胞遗传学、免疫学以及形态学等相关检验确诊为急性淋巴细胞白血病；年龄在1～14岁之间；所有患儿及其家属均知情并签署同意书；本研究经我院伦理委员会批准。2组患儿一般资料对比无明显差异，如表1所示。

表1 一般资料对比分析

1.2 方法

用无菌EDTA抗凝管留取ALL患儿和正常儿童骨髓血2 ml，加入Ficoll分离液(天津生物科技有限公司)，参照说明书提取骨髓单个核细胞。

用TRIzol试剂(美国Invitro.gen公司)从骨髓标本中提取RNA。用QuantiTect(德国ChiagenGmbH公司)逆转录试剂盒将RNA逆转录成cDNA。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因为参照基因，用qRT-PCR进行cDNA定量检测。ABCB1C3435T位点上游引物序列为5'-TTCAGCTGCTTGATGGCAAA-3'，下游引物5'-AGGCAGTGACTCGATGAAGG-3'。引物进行聚合酶链式反应得到扩增产物[4-6]。

PCR扩增条件：C3435T，95 °C预变性5 min后进行下序循环，94 °C变性30 s，60 °C退火15 s，72 °C延伸30 s，共32个循环，最后72 °C延伸8 min；C3435T，95 °C预变性5 min后进行下序循环，94 °C变性30 s，54 °C退火15 s，72 °C延伸30 s，共32个循环，最后72 °C延伸10 min。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 2组患儿ABCB1基因C3435T位点对比分析

2组患儿ABCB1基因C3435T位点中CT、CC点位对比无明显差异(P>0.05)，TT点位对比差异显著(P<0.05)，如表2所示。

表2 2组患儿ABCB1基因C3435T位点对比分析/例

2.2 不同点位ABCB1基因C3435T的急性淋巴细胞白血病患儿生存情况对比分析

不同点位ABCB1基因C3435T的急性淋巴细胞白血病患儿生存情况对比无明显差异(P>0.05)，如表3所示。

表3 不同点位ABCB1基因C3435T的急性淋巴细胞白血病患儿生存情况对比分析/例

2.3 60例急性淋巴细胞白血病患儿ABCBl基因多态性相关指标分析

60例急性淋巴细胞白血病患儿ABCBl基因多态性不同点位患儿的性别、年龄、血小板减少患儿、中性粒细胞减少患儿对比均无明显差异(P>0.05)，ABCBl基因多态性不同点患儿的血红蛋白减少情况对比差异显著(P>0.05)，如表4所示。

表4 急性淋巴细胞白血病患儿ABCBl基因多态性的相关指标分析

2.4 儿童急性淋巴细胞白血病发病情况的Logistic回归分析结果

儿童急性淋巴细胞白血病发病情况与血小板、血红蛋白、中性粒细胞、C3435T等位基因、危险度均有明显关系(P<0.05)，如表5所示。

表5 儿童急性淋巴细胞白血病发病情况的Logistic回归分析结果

3 讨论

急性淋巴细胞白血病的发病机制复杂，研究表明[7-8]，环境暴露和遗传背景是ALL发生的两个重要因素，其中遗传为主要因素。ABCB1基因单核苷酸的多态性会对P-糖蛋白的功能与表达产生影响，ABCB1基因C3435T多态性对于癌细胞相关蛋白表达及化疗药物体内代谢具有一定影响，导致ALL治愈率比较低。还有研究认为[9-10]，ABCB1基因C3435T多态性对ALL的易感性具有一定的影响。这些研究结果出现了差异，可能与ALL患儿的多药耐药机制复杂相关，并不是单一因素导致的，可能还存在其他的机制。

本研究结果表明，2组患儿ABCB1基因C3435T位点中CT、CC点位对比无明显差异(P>0.05)，TT点位对比差异显著(P<0.05)。任艳飞等[11]研究表示，不同危险程度的ALL患者ABCB1基因C3435T位点无明显区别，本研究结果中TT点位在不同组别患者中差异显著，与相关研究具有一定差异，这可能与本研究基数较小有关，还有待进一步研究。不同点位ABCB1基因C3435T的急性淋巴细胞白血病患儿生存情况对比无明显差异(P>0.05)，这是因为不同点位ABCB1基因C3435T多态性与ALL患儿的生存率无明显关系，可能与患儿的治疗情况具有相关性[12]。60例急性淋巴细胞白血病患儿ABCBl基因多态性不同点位患儿的性别、年龄、血小板减少患儿、中性粒细胞减少患儿对比均无明显差异(P>0.05)，ABCBl基因多态性不同点位患儿的血红蛋白减少情况对比差异显著(P>0.05)，在不同ABCBl基因C3435T多态性的点位患儿中，只有血红蛋白减少情况差异显著，这说明ABCBl基因C3435T多态性会对ALL患儿的临床相关指标产生一定影响。相关研究表明[13-15]，ABCB1 C3435T位点基因多态性影响ABCB1基因的表达、表达产物P-gp的功能以及P-gp对底物的代谢和处置，而P-gp可阻碍药物的吸收、渗透和保留，与本研究结果具有一定相关性；儿童急性淋巴细胞白血病发病情况与血小板、血红蛋白、中性粒细胞、C3435T等位基因、危险度均有明显关系(P<0.05)，由此证明，除ALL发病情况基本判定指标之外，与ABCB1 C3435T位点基因多态性具有明显的相关性。

综上所述，ABCBl基因C3435T多态性与儿童ALL可能存在着一定关系，具有一定的参考价值。