重庆市江津区不同孕期、基因型的珠蛋白生成障碍性贫血孕妇血常规指标分析

白文学，刘焰利，张 霞，龙尧水

重庆市江津区妇幼保健院检验科，重庆 402260

珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)是一种因珠蛋白合成障碍所致的遗传性溶血性疾病[1-3]。我国长江以南各省地贫发病率较高、影响较大，重庆市每年约有1万例孕妇可能会生出重型地贫患儿，重型地贫患儿的出生对其家庭和社会带来了沉重的负担[4-5]。目前地贫尚无有效的治疗方法,所以早期检测对于地贫的诊断及干预尤为重要。目前常用检测方法为地贫基因检测、血红蛋白分析、血常规检测，其中地贫基因检测逐渐成为最重要的检测方法。地贫基因检测可用于地贫诊断及分型，但在医疗水平尚比较薄弱的偏远地区或者社区，医生无法及时有效地开展基因检测，而不同类型的地贫患者其血常规检测相关指标表现也不一，所以血常规检测成为地贫筛查的重要指标[6-9]。为研究重庆市江津区孕妇人群地贫遗传学特点，本文重点研究不同孕期、基因型地贫孕妇血常规指标变化，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016-2020年在重庆市江津区妇幼保健院产检的孕妇，对其资料进行整理，剔除重复、关键信息缺失等不符合本研究的对象，最终纳入8 559例孕妇作为研究对象。将8 559例孕妇地贫基因检测结果中地贫基因阳性孕妇作为地贫组、地贫基因阴性孕妇作为对照组。地贫组按照孕期分为孕早期(<14周)165例、孕中期(14～28周)87例、孕晚期(>28周)126例；对照组孕早期6 076例、孕中期1 698例、孕晚期407例。8 559例孕妇年龄为15～50岁，平均年龄(27.06±5.03)岁。本研究经重庆市江津区妇幼保健院医学伦理委员会研究批准。

1.2方法

1.2.1血常规指标检测 采用真空采血管分别抽取研究对象静脉血2 mL于乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管中，颠倒混匀8次，备用，血常规指标检测需在 4 h内完成，地贫基因检测在5 d内完成，标本保存在 2～8 ℃冰箱内。采用希森美康XN-1000自动血细胞分析及配套试剂检测红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞比容(HCT)、红细胞平均体积(MCV)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)。

1.2.2地贫基因检测 采用导流杂交法对研究对象进行地贫基因检测。采用裂解法提取DNA，PCR 结合导流杂交技术检测3种缺失型地贫(--SEA、-α3.7和-α4.2)、3种突变类型α地贫(CS、QS和WS)和17种突变类型β地贫[-28(A-G)、-29(A-G)、-30(T-C)、-32(C-A)、CD14/15(+G)、CD17(A-T)、CD27/28(+C)、CD31(-C)、CD41/42(-TCTT)、CD43(G-T)、CD71/72(+A)、IVS-I-1(G-T，G-A)、IVS-I-5(G-C)、IVS-II-654(C-T)、βE(G-A)、CAP(A-C，A-AAAC)、Int(T-G)]。其中-α3.7、--SEA、-α4.2、CS、WS、CD17(A-T)、CD41/42(-TCTT)、IVS-II-654(C-T)基因型改变较常见，纳入常见地贫基因型，剩余基因型改变(包括两种及以上基因型改变)纳入少见地贫基因型。观察整张膜条上出现的蓝紫色斑点。阴性对照检测结果膜条无蓝紫色斑点出现。若在突变或缺失检测探针出显色强度与相应正常对照探针相近的蓝紫色斑点，则该位点为地贫突变或缺失的杂合子；若在突变或缺失检测探针处出现的蓝紫色斑点，相应的正常对照探针处未出现蓝紫色斑点，则该位点为地贫突变或缺失的纯合子；若仅在正常对照探针处出现蓝紫色斑点，则待测样品中没有上述地贫突变或缺失。地贫基因阳性标准：以出现任一种地贫基因阳性者为判定标准。

2 结 果

2.1地贫基因检测 8 559例孕妇地贫基因检测结果显示，地贫基因阳性孕妇378例(4.42%)，其中α地贫孕妇238例(62.96%)，其基因型分别为-α3.7 114例(30.16%)、--SEA 89例(23.54%)、-α4.2 15例(3.97%)、CS 7例(1.85%)、WS 6例(1.59%)、少见型α地贫7例(1.85%)；β地贫孕妇140例(37.04%)，其基因型分别为CD17(A-T) 51例(13.49%)、CD41/42(-TCTT) 34例(8.99%)、IVS-II-654(C-T) 28例(7.41%)、少见型β地贫27例(7.14%)。

2.2地贫组和对照组血常规指标比较 与对照组比较，地贫组RBC升高，Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 对照组与地贫组血常规指标比较

2.3α地贫和β地贫孕妇与对照组血常规指标比较 与对照组相比，α地贫、β地贫孕妇Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 α地贫与β地贫孕妇与对照组血常规指标比较

2.4常见地贫基因型孕妇与对照组血常规指标比较 与对照组比较，--SEA基因型孕妇RBC升高，MCV、MCH、MCHC、RDW-SD降低，差异有统计学意义(P<0.05)。CD17(A-T)基因型孕妇RBC升高，Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 常见地贫基因型孕妇与对照组血常规指标比较

2.5少见地贫基因型孕妇与对照组血常规指标比较 与对照组比较，少见α地贫基因型孕妇MCV、MCH、MCHC、RDW-SD降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 少见地贫基因型孕妇与对照组血常规指标比较

2.6不同孕期两组孕妇血常规指标比较 与对照组比较，地贫组孕中期、孕晚期RBC均升高，MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，差异有统计学意义(P<0.05)，见表5。

表5 不同孕期两组孕妇血常规指标比较

3 讨 论

地贫属小细胞低色素性贫血，对于重型地贫新生儿，其出生后即可出现黄疸、贫血和肝脾肿大等现象，严重时甚至危及新生儿生命[10-14]。重庆江津区位于重庆西南部，属于地贫高发区。相对于群体筛查，地贫基因检测的适应性存在不足，检测周期较长且费用较高，如果把相应的血常规指标作为地贫早期筛查指标，可以提高筛查效率，降低筛查成本。本研究8 559例孕妇地贫基因检测结果显示，地贫基因阳性378例(4.42%)，其中α地贫238例，占62.96%，与文献[15]报道结果相符。本研究结果显示，α地贫孕妇地贫基因型主要为-α3.7、--SEA两种，β地贫孕妇地贫基因型主要为CD17(A-T)、CD41/42(-TCTT)、IVS-II-654(C-T)。与对照组比较，地贫组患者 RBC升高，Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，且MCV<80 fL，MCH<27 pg，RDW-SD降低，符合地贫小细胞低色素性贫血的血常规指标分布特点[16-17]。与α地贫孕妇比较，β地贫孕妇Hb、HCT、MCV、MCH、RDW-SD较低，提示β地贫孕妇血常规指标变化幅度更大，贫血表现更明显。本研究结果显示，与对照组比较，地贫组孕中期、孕晚期MCV、MCH、MCHC、RDW-SD均降低，提示地贫孕妇随孕期延长贫血程度逐渐加重。为避免中重型地贫患儿的出生，夫妇一方确诊为地贫携带者，其配偶应行地贫基因检测。本研究有部分血常规指标正常而地贫基因检测阳性孕妇，是因为孕妇进行产前遗传咨询时，高度怀疑地贫而进行的地贫基因检测。

综上所述，本研究初步了解了重庆市江津区地贫孕妇基因型分布情况和地贫孕妇的血常规指标变化。孕妇血常规检测对孕妇地贫初筛及降低地贫患儿的出生率具有重要的临床意义。