于红梅
摘要:为了研究补中益气汤对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响,试验锥鸡在用新城疫La Sota系冻干苗进行免疫时,1~3组分别按0.125、0.25、0.5 g/mL 3个浓度灌服补中益气汤1 mL,连续10 d,4组、5组灌服等量生理盐水。各组分别于21、28、35、42、49日龄采血测定新城疫血凝抑制抗体水平。试验结果显示,高剂量补中益气汤能显著提高新城疫抗体效价,中、高剂量的补中益气汤对抗体产生有不同程度的增强作用。结果表明,补中益气汤能有效提高新城疫疫苗免疫效果。
关键词:补中益气汤;新城疫疫苗;抗体效价;免疫效果
中图分类号:S859.3文献标识码:Bdoi:10.3969/j.issn.2096-3637.2021.24.006
Effect of Bu Zhong Yi Qi Decoction on the Immune Efficacy of Newcastle Disease Vaccine
YU Hongmei
(Animal Disease Prevention and Control Center of Haiyang,Yantai Shandong 265100,China)
Abstract :In order to study the effect of Bu Zhong Yi Qi Decoction on the immune efficacy of Newcastle Disease Vaccine,when experimental chickens were immunized with Newcastle disease La Sota freeze-dried vaccine,groups 1-3 were given BuzhongYiqi Decoction 1 mL at three concentrations of 0.125,0.25 and 0.5 g/mL respectively,for 10 consecutive days. Groups 4 and 5 were given the same amount of normal saline. Blood was collected from each group at 21,28,35,42 and 49 days of age to determine the level of Newcastle disease hemagglutination inhibitory antibody.The test results showed that high-dose Bu Zhong Yi Qi Decoction significantly increased the antibody titer of Newcastle disease,and medium and high Doses Bu Zhong Yi Qi Decoction enhanced the antibody production to different degrees. The results show that Bu Zhong Yi Qi Decoction can effectively improve the immune efficacy of Newcastle disease vaccine.
Keywords:Bu Zhong Yi Qi Decoction,newcastle disease vaccine,antibody titer,immune response
0引言
随着畜牧养殖业的不断发展,通过疫苗免疫控制动物疾病是非常重要且有效的手段。但是,在养禽生产中仍然普遍存在疫苗免疫接种预防效果不佳及用量加大而未达到理想的治疗和预防效果的问题[1]。临床试验表明,免疫增强剂能明显增强机体免疫力,提高机体的抗病能力,加强疫苗的保护力,对控制动物疾病的流行起着非常关键的作用[2]。因此,研究中药免疫增强剂对疫苗免疫效果的影响,对于提高畜禽自身免疫机能、抗病力和生产力及增加畜牧业的经济效益具有十分重要的意义。根据雏鸡的生理特点,组建了中药补中益气汤,检测其在雏禽养殖中对雏禽免疫力的影响效果。
1材料和方法
1.1实验动物和分组
150只1日齡非免疫健康817维鸡随机分为5组,每组30只,常规饲养管理。1~3组为补中益气汤低、中、高剂量组,按0.125、0.25、0.5 g/mL 3个浓度每天灌服补中益气汤1 mL,连续10 d,4组为生理盐水对照组,5组为空白非免疫对照组,4组和5组灌服等量生理盐水。7日龄进行首次免疫,1~4组每只鸡经点眼、滴鼻免疫2羽份(106 EID50/羽)鸡新城疫La Sota系冻干苗0.5 mL,25日龄加强免疫1次。5组空白非免疫组隔离饲养(注:1组为补中益气汤低剂量组,2组为补中益气汤中剂量组,3组为补中益气汤高剂量组,4组为生理盐水对照组,5组为空白非免疫对照组,下同)[3]。
1.2实验仪器和材料:
(1)仪器与设备。离心机、冰箱、恒温箱、高压蒸汽灭菌锅、96孔“V”形微量反应板、50 uL微量移液器、枪头(若干)、离心试管、一次性注射器、微量振荡器等。
(2)中药。炙黄、党参、白术、炙甘草、当归、陈皮、升麻、柴胡,上述中药均购于海阳市立健大药店[4]。
(3)新城疫标准抗原(中国兽医药品监察所)。
(4)鸡新城疫La Sota系冻干苗(普瑞(保定)生物药业有限公司)。
(5)成年公鸡一只,购于兴海农贸市场。
(6)其他试剂:葡萄糖、枸酸酸钠、氯化钠、蒸馏水、氯化钾、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、灭菌生理盐水、盐酸等。
1.3实验方法
各实验组分别于免疫后第21日龄(D21)、28日龄(D28)、35日龄(D35)、42日(D42)、49日龄(D49)随机抽取10只鸡,翅静脉下无菌采血0.5 mL,置于离心管中,以2 000 r/min离心15 min,分离血清,采用红细胞凝集抑制实验检測鸡的新城疫抗体效价,并进行生物统计分析,其操作和判定方法按照国家标准《新城疫诊断技术》(GB/T16500—2008)进行[5]。
1.4数据处理
记录不同实验组鸡新城疫抗体效价,并计算每组数据的平均数和标准差,根据每组数据的平均数做不同实验组鸡新城疫抗体效价折线图,最终数据以平均数土标准差表示。
2结果
2.1各组鸡新城疫抗体效价平均值
各组鸡新城疫抗体效价平均值见表1。
2.2各组鸡新城疫抗体效价平均值折线图
各组鸡新城疫抗体效价平均值折线图见图1。
2.3各组鸡新城疫抗体效价数据统计
各组鸡新城疫抗体效价见表2。
3讨论与结论
体液免疫是由B淋巴细胞介导的一种非常重要的特异性免疫反应,同时也是机体抵御传染病的一个主要因素[6]。禽类机体内抗体效价水平是衡量机体体液免疫强弱的重要标志之一。补中益气汤组方严谨、遣药精良,本方中多种单味药如黄芪、人参、白术、甘草等经实验证明具有免疫增强作用[7-8]。高剂量组较其它组产生抗体更加迅速、抗体水平更高、持续时间更长,说明补中益气汤对新城疫疫苗诱导的特异性免疫有显著的增强作用,可以作为新城疫La Sota疫苗佐剂使用,明显提高新城疫免疫合格率。实验结果显示,浓度为0.5 g/mL的补中益气汤对新城疫疫苗的免疫增强作用最佳;鸡群免疫新城疫La Sota疫苗后抗体水平先增加,达到抗体高峰后逐渐下降;通过新城疫疫苗免疫的方式,可以控制减少鸡群新城疫疾病的发生。以上结论可以看出,补中益气汤作为一种中草药成分的绿色免疫增强剂,可以提高雏鸡免疫新城疫疫苗后的抗体水平,对新城疫疫苗免疫效果有显著的促进作用,能够有力降低发病风险,减少经济损失。
参考文献
[1]任成林,王鹏,杨永红.中草药兔疫增强剂在养高生产中的应用研究[J].养禽与疾病防治,2007 (10):30-34.
[2]胡元亮.中药免疫增强剂最新研究成果发布[J].北方牧业,2009(20):30-31.
[3]汪得刚.实用中兽医方剂学[M].北京:中国农业大学出版社,2006.
[4]王自然.中药乳炎康治疗乳牛乳腺炎的临床试验[J].中国兽医科技,2004,34(2):68-69.
[5]崔晓,秦爱建,崔治中,等.鸽新城疫病毒的分离及鸽群自然感染状况的调查[J].中国兽医杂志,2000,31(2):6-10.
[6]陆承平.兽医微生物学[M].北京:中国农业出版社,2001.
[7]危北海.中医脾胃学说[M].北京:北京出版社,1993.
[8]骆和生,王建华.中药方剂的药理与临床研究进展[M].广州:华南理工大学出版社,1991.