乌骨羊超数排卵效果的研究

任俊光 ，刘 佳 ，李 勇 ，张博宇 ，白恩宇 ，傅丞毅 ，孟 娜 ，菅瑞珍

（1.内蒙古草原乌骨羊科技有限公司，内蒙古 呼和浩特 010010；2.内蒙古自治区农牧业科学院 内蒙古 呼和浩特 010018）

超数排卵（通常简称超排）是在繁殖机能正常母畜发情周期的适当时期通过注射超过体内正常水平的外源性促性腺激素[1]，以提高动物体内促性腺激素的浓度，继而诱发卵巢中本将于排卵前闭锁的卵泡突破闭锁机制，从而使更多发育成熟的卵泡被排出。应用超排技术可使每次排卵数由原来的1～3个增至10～20个。超数排卵是胚胎移植的核心技术环节。在家畜胚胎移植技术中，超数排卵在单胎或双胎动物胚胎移植中具有重要作用，可以让优良母畜排出比正常多几倍甚至几十倍的卵子，从而使其优良品质得到最大限度的利用。超数排卵所用激素主要有促卵泡素（FSH）、孕马血清促性腺激素（PMSG）和促排卵素，前列腺素和孕激素是超排的辅助激素[2]。PMSG的效果比较平缓，使用后卵巢体积不会剧烈增大，处理后的卵巢容易恢复正常，排卵比较整齐且排卵效率高，但是由于其半衰期较长，容易引发卵巢囊肿，从而引起供体体内雌激素水平增高，进而对卵子成熟、受精和胚胎的发育产生不利影响，导致回收胚胎的质量下降[3-5]。在排卵率、受精率和高质量胚胎的数量方面，FSH的超排效果比PMSG好，但FSH的半衰期短，需要进行多次注射，处理程度比较繁琐。人们经过综合对于后发现FSH的超排效果较为理想，是目前牛、羊超排中最常用的促性腺激素。

本试验对比不同季节乌骨羊的超排数，确定最佳的超排季节，为后期对乌骨羊开展纯种扩繁技术提供理论支持。

1 材料与方法

1.1 试验时间和地点

分别于2020年12月与2021年8月在新疆和田皮山县种羊场进行。

1.2 试验羊的选择与饲养管理

经过预饲养、体格健壮、无传染性及遗传性疾病，繁殖机能正常，经产羊没有空胎史的乌骨羊。所有试验羊均圈养舍饲。

1.3 试验方法

1.3.1 超数排卵。任选一天为第0天放栓（同受体同步），开始超数排卵处理。在第10天采用CIDR（孕酮栓）-FSH（促卵泡素）-LH（促黄体素）法对供体进行超数排卵，并持续3 d。

1.3.2 发情鉴定。第13天供、受体同步取栓，去栓后24 h进行发情鉴定。准确判断供体的发情时间，从而为确定供体腹腔镜输精时间及胚胎采集时结合观察母羊发情兴奋行为判断发情。

1.3.3 采集胚胎与鉴定。在超排供体羊发情后第3天和第6天，分别进行输卵管、子宫角采胚。将所采集的胚胎进行形态鉴定，并依质量好坏分为A、B、C、D4个等级[6]，A级胚胚胎发育与胚龄一致，形态完整，结构紧凑，卵裂球轮廓清晰，细胞团致密，色调均一，本试验只采用A级胚进行胚胎移植。

备选的供体羊在超数排卵处理前观察两个发情周期，对供体羊进行外阴部消毒清洗，把 CIDR放入消毒好的PVC投放管内，将PVC投放管缓缓放入供体羊的阴道内，然后用消毒好的玻璃棒把管内的CIDR轻轻推入供体羊的阴道里。在埋入CIDR后的第11天对肉羊肌肉注射FSH，注射总剂量为350 IU，分3 d逐渐递减注射量，每日早晚各一次，间隔 10～12 h，早晚注射剂量相同。 在埋植CIDR的第13天上午取出CIDR，同时每只肉羊注射0.1～0.15 mg PG。第2天开始试情，同时对发情的供体羊采用自然交配配种，8～10 h后复配一次，直到发情结束[6]。

1.4 数据分析

试验数据利用统计学软件GraphPad Prism 6.0进行统计分析，数据釆用平均值±标准误进行表示。

2 结果与分析

由表1可知，不同季节在饲养管理、操作方法、激素剂量相同的条件下对乌骨羊进行超排。在冬季（12月份）进行了3组试验，A组共有36只受体羊，A级胚平均出胚数为3.56，B组共有32只受体羊，A级胚平均出胚数为1.94，C组共有37只受体羊，A级胚平均出胚数为2.65。相同条件下在秋季（8月份）也进行了3组试验，A组共有24只受体羊，A级胚平均出胚数为2.96，B组也有24只受体羊，A级胚平均出胚数为3.54，C组受体羊数为19只，A级胚平均出胚数为2.68。秋季对乌骨羊进行超排，A级胚平均出胚数优于冬季，差异不显著。这表明季节对乌骨羊超数排卵有一定影响。

表1 不同季节对乌骨羊的超排效果的影响

3 结论与讨论

北方绵羊是季节性繁殖动物，除湖羊、小尾寒羊和多赛特等品种常年发情外，大多数品种都在短光照的秋冬季发情，每年的繁殖季节为7～8月；发情及排卵率在 10月份达到高峰。繁殖季节，成年母羊卵巢处于活动状态，对激素比较敏感，卵巢发育较好，卵泡数量较多且没有较大卵泡，超排结果较为稳定，且可用胚数量多。

关于季节对超排效果的影响至今没有统一的意见。较多研究表明季节对超排效果有一定影响。赵霞[7]分别从8月中旬～12月中旬在内蒙古地区对肉羊进行超排试验。试验结果表明，8月中旬～11月中旬的秋季肉羊超排效果较好，且较为稳定，11月中旬～12月中旬的冬季超排效果不是很好，这与本试验的结果一致，说明季节对肉羊超排效果有一定影响，秋季超排效果优于冬季。尹峰[8]分别于春季、夏季、秋季对羔羊进行超排试验。结果表明，秋季是羔羊超排效果最佳的季节。袁玉国等[9]分别于春季与秋季对山羊进行超数排卵处理。结果发现，秋季山羊的可用胚数明显高于春季。余文莉等[10]的研究发现，当气温急剧升高或降低时超排效果也会出现波动，这可能与供体的应激性内分泌变化有关。当气温改变时，山羊的生理及生殖特性也随之改变、随着温度的升 高或降低，山羊的卵巢对促性激素的敏感性较为迟缓，所以超排效果会出现差异。

也有相关研究表明，季节对绵羊的超排效果没有影响。Lehloenya[11]等分别于秋季和其他季节对波尔山羊进行超数排卵。结果表明，虽然秋季的未受精率显著高于非繁殖季节，但是可用胚总数不受季节影响，这与赵伟的结果一致。赵伟等[12]的研究结果表明，季节对排卵数没有影响。