FASN、Runx2在老年脑胶质瘤患者中表达及与临床病理特征、预后生存的相关性

李忠华 彭臻 李劲松 王勇

(1百色市人民医院脑科，广西 百色 533000；2贵州医科大学第三附属医院神经外科)

脑胶质瘤是由神经外胚叶衍化而来的胶质细胞发生的肿瘤，是颅内肿瘤中最常见的一种疾病，在胶质瘤中以星形细胞瘤最为常见，好发于老年人〔1〕。早期脑胶质瘤患者可无明显症状，容易延误最佳治疗时机；且该病恶性程度高，临床治疗难度大，生存率低，严重威胁患者的生命安危〔2〕。随着细胞与生物分子研究的开展，脑胶质瘤与转移的分子机制与肿瘤治疗新靶点引起广泛关注〔3〕。

脂肪酸合成酶(FASN)存在于脂质合成代谢活跃及激素敏感型细胞中；相关研究表示其与肿瘤的转移、增殖、凋亡等方面密切相关，在乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌等多种癌症中呈高表达状态〔4〕。而人类runt相关转录因子(Runx)2基因是近年来临床研究中新发现的成员，已被确定为肿瘤抑制基因，其与脑胶质瘤的关系一直是研究的热点〔5〕。本研究拟分析老年脑胶质瘤患者FASN、Runx2的表达情况及与病理特征、预后生存的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年6月至2018年6月于百色市人民医院病理科进行收集手术切除的67例老年脑胶质瘤组织及相关临床资料，纳入标准：①研究对象均明确病理；②诊疗前未行相关治疗干预。排除标准：①存在血液系统异常者；②存在肝癌、胃癌等恶性肿瘤者；③中途退出研究者。最终65例符合本次研究，其中男30例，女35例，平均年龄(68.71±3.82)岁。同时选取同期50例本院病理科保存的脑胶质瘤癌旁相对正常标本及相关临床资料，所有患者临床资料完整，将其作为对照组，男26例，女24例，平均(68.75±3.79)岁。两组基线资料对比无显著差异(P>0.05)。

1.2研究方法 收集所有患者临床资料，比较FASN、Runx2在各组的表达情况；分析FASN、Runx2与老年脑胶质瘤患者各病理参数的相关性，并对患者进行追踪随访，统计2年内(截止于2020年6月30日)预后情况，分析影响老年脑胶质瘤患者预后生存的危险因素及预测价值。

1.3仪器与试剂 SP试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)、磷酸盐缓冲液(PBS，北京赛默飞世尔生物化学制品有限公司)、FASN、Runx2兔抗人多克隆抗体(美国Santa Crutz公司)。

1.4检测方法 检测FASN、Runx2蛋白：SP法〔6〕，石蜡切片、烘烤、脱蜡，浸泡、冲洗。采用酶阻断剂对其进行滴加，于温室内孵育并清洗。而后再次滴加聚合物，于温室孵育。另一组人群一抗采用PBS，将二抗滴入室温孵育。苏木精复染，脱水，封片。

1.5结果判定 FASN、Runx2蛋白的免疫组织学结果判定〔7〕：根据阳性细胞百分比、染色强度综合判定，阳性细胞数量及染色程度由少(无染色)至多(棕褐色)计0～3分。细胞数量+染色程度得分之和判断高低表达情况，≤3分为低表达，4～6分为高表达。

1.6统计学方法 采用SPSS22.0软件进行χ2检验、t检验及多元Logistic回归分析和受试者工作特征(ROC)曲线分析。

2 结 果

2.1两组FASN、Runx2表达比较 研究组FASN、Runx2高表达率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.001)，见表1，图1。

表1 两组FASN、Runx2表达情况比较〔n(%)〕

图1 免疫组化染色(×400)

2.2FASN、Runx2与患者临床病理因素的关系 老年脑胶质瘤患者FASN、Runx2水平与组织分化类型、组织学分级、远处转移有关(P<0.05)，与年龄、肿瘤直径、病理类型、肿瘤部位等无关(P>0.05)，见表2。

表2 FASN、Runx2与患者不同病理参数的关系(n)

续表2 FASN、Runx2与患者不同病理参数的关系(n)

2.3老年脑胶质瘤患者2年内预后情况 2年随访发现，生存46例，死亡19例，预后不良率为29.23%。

2.4生存组与死亡组FASN、Runx2表达比较 死亡组FASN、Runx2高表达率高于生存组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 生存组与死亡组FASN、Runx2表达比较〔n(%)〕

2.5影响患者预后生存的因素 影响患者预后的因素与组织中低分化、组织学分级Ⅲ+Ⅳ、FASN、Runx2高表达有关(P<0.05)。见表4。

表4 影响老年脑胶质瘤患者预后生存的单因素、多因素分析

2.6FASN、Runx2蛋白对老年脑胶质瘤患者预后的预测价值 采用ROC曲线分析FASN、Runx2蛋白及两者联合对老年脑胶质瘤患者预后的预测价值，以FASN、Runx2联合曲线下面积最大，故预测价值最佳。见表5，图2。

表5 FASN、Runx2蛋白对老年脑胶质瘤患者预后的预测价值

图2 FASN、Runx2蛋白对老年脑胶质瘤患者预后的预测价值

3 讨 论

脑胶质瘤是一种严重威胁人类健康的恶性肿瘤，随着社会老龄化程度的加剧和生活方式的改变，该症发病率和死亡率呈逐年上升趋势〔8〕。随着外科技术及放疗和化疗药物的进展，脑胶质瘤的治疗方法有了一定进展，但部分患者治疗效果仍不理想，预后较差〔9〕。因此，老年脑胶质瘤患者的早期诊断、有效治疗至关重要〔10〕。

相关学者表示，该疾病的进展与多基因、多细胞共同作用有关。其中，FASN定位于染色体19q22上，全长50 kb，有3个外显子和3个内含子，3个转录起始位点和2个启动子〔11〕。研究表明其直接影响着脂肪酸合成酶多寡，对控制体内体脂沉积具有重要意义；同时，FASN已被证明在肿瘤中起抑癌作用〔12〕。有关FASN在肿瘤方面的报道主要集中在其作为肿瘤抑制基因抑制乳腺癌、甲状腺癌、脑膜瘤等的进展，而在老年脑胶质瘤方面的研究报道甚少〔13〕。本研究结果提示FASN在老年脑胶质瘤中起抑癌作用，抑制前列腺癌进展。同时，本研究结果显示FASN表达水平与组织分化类型、组织学分级关系密切。分析其原因可能为：FASN能够上调血管内皮生长因子和微血管密度的表达，且FASN基因可抑制细胞凋亡，但一旦FASN发生变异，会增加细胞，减少凋亡机制，促进癌细胞的表型转化和增殖，增加了肿瘤的侵袭行为，因此其高表达状态可导致高组织分级及组织低、中分化〔14〕。

Runx2是Runx转录因子家族成员的重要组成部分〔15〕。不仅在成骨细胞早期增殖过程中起作用，也在成骨细胞的分化成熟过程中发挥重要作用〔13，16〕。Alves等〔17〕研究发现，Runx2的表达与其在乳腺癌微钙化形成关系密切。研究发现，Runx2表达水平对肿瘤病理参数及生物学效应作用具有一定临床意义〔18〕。而本研究结果说明Runx2与脑胶质瘤患者进展关系密切，可为未来临床诊治提供有效参考依据。此外，本研究利用ROC曲线证实临床可通过联合检测Runx2与FASN蛋白提高对患者预后的研究作用。另本研究纳入患者例数较少，年限过短，可能在结果表示上存在一定误差，后续笔者将对老年脑胶质瘤患者Runx2与FASN蛋白的关系进行深入研究。

综上，老年脑胶质瘤患者FASN、Runx2呈高表达状态；FASN、Runx2与患者预后生存关系密切，可作为预测老年脑胶质瘤患者预后的分子标志物和肿瘤治疗的潜在靶点。