Mejer-1800尿有形成分分析仪性能评估

罗佳佳，曹丽坤，杨 柳，谢 珍，谢乃亮，彭契六△

广西国际壮医医院检验科，广西南宁 530201

尿有形成分分析作为临床实验室常规检测项目，常用于泌尿系统疾病及肾脏疾病的辅助诊断、鉴别诊断、药物疗效及预后判断等，对健康人群的筛查也起到一定的作用[1]。传统尿有形成分检测手段操作繁杂、耗时长、工作效率低、误差大，不易于室内质量控制。随着科学技术的发展，尿有形成分分析仪相继进入医院实验室，尿液的检测分析实现了自动化、快速化、标准化。ISO 15189规定了尿有形成分分析仪性能验证内容包括精密度、携带污染率及临床可报告范围[2]。仪器的性能验证及质量监督控制是实验室认证的重点[3-4]，为了确保报告的准确性，更好地服务于临床，本文按照ISO 15189及相关行业标准，对Mejer-1800尿有形成分分析仪的检出限、稳定性、精密度、符合率、假阴性率、携带污染率、线性范围、生物参考区间等进行验证，进而评价本实验室Mejer-1800尿有形成分分析仪是否适用于临床。

1 材料与方法

1.1材料 本次实验所用标本均取自2020年2—5月本院门诊和住院及体检健康者随机尿液标本，标本性状均符合相应实验要求。

1.2仪器及试剂 实验仪器为深圳美侨医疗科技有限公司生产的Mejer-1800尿有形成分分析仪，质量控制品由美国伯乐试剂公司提供。

1.3方法

1.3.1检出限 选取5个/微升的红细胞(RBC)和白细胞(WBC)标本，重复检测20次，如果90%及以上的检测结果大于0个/微升，则认为验证通过。

1.3.2稳定性 将阳性质控配制成水平约为200个/微升的标本，混匀后采取手动进样模式分别在开机预热后、4 h、8 h重复检测10次，计算3个不同时间段的变异系数(CV)，CV≤15%即可认为验证通过。

1.3.4符合率 单项结果与人工显微镜镜检结果的符合率。选取150份临床尿液标本，分别进行Mejer-1800尿有形成分分析仪检测和人工显微镜镜检，其中RBC病理标本量不得低于90份，WBC病理标本量不得低于90份，管型(CAST)病理标本量不得低于30份，根据公式C=(t1+t2)+/t总×100%计算符合率，C为各有形成分符合率，人工显微镜镜检结果和Mejer-1800尿有形成分分析仪检测均为阳性的标本数记为t1，人工显微镜镜检结果和Mejer-1800尿有形成分分析仪检测结果均为阴性的标本数记为t2，总标本数为t总。人工显微镜镜检结果阴性、阳性判定标准为红细胞3个/HPF、白细胞5个/HPF、管型1个/LPF。

1.3.5假阴性率 对至少200份随机选取的临床尿液标本进行Mejer-1800尿有形成分检测及人工显微镜镜检，以人工显微镜镜检结果为“金标准”，根据公式F=t0/t总×100%计算RBC、WBC和CAST的假阴性率，假阴性率记为F，RBC、WBC和CAST Mejer-1800尿有形成分分析仪检测结果为阴性但人工显微镜镜检结果为阳性的标本数量记为t0，总标本量记为t总，假阴性率≤3%即可认为验证符合要求。

1.3.6携带污染率 取临床高浓度尿液标本(RBC≥5 000个/微升、WBC≥5 000个/微升)，混匀后在Mejer-1800尿有形成分分析仪上采用手动进样模式连续检查3次，测定值分别为i1、i2、i3；再取低浓度尿液样本(生理盐水)采用手动进样模式连续测定3次，测定值分别为j1、j2、j3，根据公式计算携带污染率T=(i1-i3)/(i3- j3)×100%，携带污染率≤0.05%即可认为验证通过。

1.3.7生物参考区间验证 本实验室以美国临床实验室标准化协会认可的《室间内确定、建立、验证生物参考区间：EP28-A3C》[4]文件进行生物参考区间验证。选取20份参考个体的新鲜尿液标本进行仪器检测，将检测结果与本实验室现用的参考区间作比较。评价标准：测定值至少90%落在参考区间，验证通过。

1.3.8线性范围 选取高浓度临床新鲜尿液标本，要求细胞水平接近分析仪的检测范围上限(WBC接近3 000个/微升，RBC接近5 000个/微升)，两份尿液标本按一定比例量(原尿液∶生理盐水)作1∶4、1∶16、1∶32、1∶128、1∶256的倍比稀释，充分混匀后每个稀释度重复测定3次，计算均值，即为各稀释比例尿液标本的实测值，理论值为原尿除以稀释倍数，将各稀释比例尿液标本的实测值与理论值进行比较，计算Y=aX+b。评价标准：0.95

1.4统计学处理 实验数据采用Excel2007进行统计描述和直线回归分析。

2 结 果

2.1检出限 稀释后的RBC和WBC标本20次检测中19次(95%)检测结果均大于0个/微升，验证通过。

2.2稳定性 在开机预热后、4 h、8 h将配制成功的标本重复检测10次，计算所有数据均数为184.7，标准差为25.42，CV为13.76%，按照CV≤15%为评价标准，Mejer-1800尿有形成分分析仪稳定性验证通过。

2.3精密度 RBC和WBC的批内精密度均通过验证，见表1。日间精密度符合评价标准，见表2。

表1 Mejer-1800各参数批内精密度验证结果

表2 Mejer-1800日间精密度验证结果

2.4符合率 RBC、WBC和CAST的符合率验证结果见表3。

表3 Mejer-1800各参数符合率验证结果

2.5假阴性率 RBC、WBC和CAST的假阴性率验证结果见表4。

表4 Mejer-1800各参数假阴性率验证结果

2.6携带污染率 RBC和WBC的携带污染率验证结果见表5。

表5 Mejer-1800各参数携带污染率验证结果

2.7生物参考区间验证 20份参考个体的尿液标本RBC检测结果有18份(90%)落在参考区间内，20份参考个体的尿液标本WBC检测结果有19份(95%)落在参考区间内，表明该参考区间适用于本实验室。

2.8线性范围 将倍比稀释标本连续检测3次，均值与理论值比较，得出RBC线性回归方程为Y=0.964 7X+94.371 0，见图1。

图1 线性范围

3 讨 论

实验室尿有形成分分析主要依靠人工显微镜检查，人工显微镜检查耗时长且无法进行大批量尿液标本的检测[5]。近年来，尿有形成分的检测手段随科技发展不断更新，尿有形成分分析仪已普遍应用于临床实验室中，其分析速度快，多项目参数同时检测，标准化操作易于进行室内质量控制[6-7]。尿有形成分是尿液分析的重要组成部分，其分析仪的性能验证就显得尤为重要。本实验按照ISO 15189的要求，同时结合相关行业标准，对本实验室中Mejer-1800尿有形成分分析仪的检出限、稳定性、精密度、符合率、假阴性率、携带污染率及临床可报告范围等指标进行验证。并确认其生物参考区间是否适用于本实验室。

Mejer-1800尿有形成分分析仪检出限验证中，RBC和WBC标本20次检测中19次结果均大于0个/微升，验证通过，和厂家给出的检出限范围一致。开机预热后、4 h、8 h对配制的标本重复检测10次，计算所有数后得出CV为13.76%，按照CV≤15%为评价标准，Mejer-1800尿有形成分分析仪稳定性验证通过，提示仪器长时间运行对稳定性有一定的影响，为保证结果的准确性，Mejer-1800尿有形成分分析仪每日应关机并定期保养。Mejer-1800尿有形成分分析仪RBC和WBC的精密度性能良好，因采用的伯乐质控品只有WBC、RBC 2种有形成分，所以本研究只验证了WBC和RBC 2项参数，研究显示该分析仪精密度符合厂家要求，且检测系统重复性较好。本研究中携带污染率、线性范围也符合Mejer-1800尿有形成分分析仪的仪器要求。生物参考区间的验证研究中，20份参考个体的尿液标本检测结果中，RBC有18份落在参考区间内， WBC检测结果有19份落在参考区间内，表明该生物参考区间适用于本实验室。按照相关行业标准需要对待测仪器的识别率验证，本研究对单项参数(RBC、WBC、CAST)与人工显微镜镜检进行比较，结果表明各项参数符合率均验证合格；RBC假阴性率为2.5%，WBC假阴性率为1.0%，CAST假阴性率为1.0%，各参数假阴性率验证合格，表明Mejer-1800尿有形成分分析仪识别率符合要求。

另外，有文献指出，伯乐质控品影响精密度的检测[8]，由于伯乐质控品包含RBC、WBC及结晶等多种成分，在高浓度水平检测分析时，仪器会把部分RBC归入WBC栏或者未能识别分类，CV过大，需要人工修正，主观因素导致验证过程中不确定度的增加，进而影响精密度的检测。另外由于质控品的局限性，在后续研究中可加入其他参数如CAST的精密度验证。此外，Mejer-1800尿有形成分分析仪是依据尿液中细胞体积、核染色及颗粒大小进行形态识别，干扰因素不可避免。在实际工作中，Mejer-1800尿有形成分分析仪易把酵母菌识别成RBC，同时也存在把黏液丝、上皮细胞等误认为透明管型的现象；另外，当尿液中磷酸盐结晶增多时，RBC检测会出现假阴性的情况，并且仪器常会把附着有磷酸盐结晶的黏液丝误认为是颗粒管型；其次，Mejer-1800尿有形成分分析仪结晶图谱尚未完善，目前只能识别草酸钙结晶，对临床常出现的尿酸结晶等暂无识别能力。因此，每个实验室应根据实际情况严格制订尿有形成分分析仪的复检规则，将分析仪检测和人工显微镜镜检相结合，提高复检率，降低假阴性率，确保尿液结果的准确性[9]。

综上所述，本研究中Mejer-1800尿有形成分分析仪的检出限、稳定性、精密度、携带污染率、线性范围及生物参考区间等符合质量标准要求，必要时将尿有形成分分析仪和人工显微镜镜检结合，可以为临床提供更好的服务。