葡萄糖酸钙锌口服液联合布拉酵母菌散剂治疗轮状病毒性腹泻的效果

吴 用，孙 冕，黄淑芹，林 容

轮状病毒感染是引起婴幼儿腹泻的常见原因之一，如患儿腹泻症状得不到有效控制，一旦发生脱水症状甚至可引起患儿死亡。由于轮状病毒感染性腹泻的发病机制尚未完全明确，临床上尚缺乏特效治疗药物[1]。常规的抗病毒、补液等方法可在一定程度上控制腹泻病情，但不能纠正患儿肠道菌群紊乱状态。布拉酵母菌散剂是一种真菌类口服微生态制剂，在感染性腹泻、非特异性腹泻、肠易激综合征等疾病的治疗中比较常用，可纠正肠道菌群紊乱、抗毒素、保护肠道上皮细胞[2]。锌是维持小肠上皮细胞结构和功能完整性的重要微量元素，锌缺乏可进一步加重腹泻的严重程度[3]。葡萄糖酸钙锌口服液是临床上常用的锌制剂，有研究将其应用于轮状病毒性腹泻的辅助治疗中，发现其可缩短患儿高热、呕吐、腹泻等症状持续时间，有利于提高疗效[4]。但其对患儿胃肠功能是否存在保护作用相关研究较少。本研究收集三亚市人民医院120例轮状病毒感染患儿作为研究对象，观察葡萄糖酸钙锌口服液联合布拉酵母菌散剂对其症状控制及胃肠功能的影响，以期为临床治疗提供参考，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2017年8月—2019年10月三亚市人民医院收治的120例轮状病毒感染患儿作为研究对象，根据治疗方法分为常规组与联合组，各60例。纳入标准：①符合《诸福棠实用儿科学》[5]中轮状病毒的相关诊断标准，即腹泻多呈水样或蛋花汤便，大便培养无致病菌生长，大便轮状病毒抗原阳性，大便轮状病毒弱阳性或阳性；②腹泻时间12～72 h；③入院前未服用过相关治疗药物；④临床资料完整。排除标准：①肝肾功能障碍、先天性心脏病、先天性肠道发育不全者；②严重营养不良者；③伴有明显的重要器官衰竭症状者；④呕吐不能口服给药者；⑤过敏体质。

1.2 方法

1.2.1 治疗方法 常规组给予饮食指导、合理补液、抗病毒[口服利巴韦林5 mg/（kg·次），2次/d]、预防或纠正电解质紊乱等常规治疗。联合组在常规组治疗基础上给予葡萄糖酸钙锌口服液（澳诺制药有限公司）联合布拉酵母菌散剂（法国百科达制药厂）治疗。布拉酵母菌散剂1袋/次，1次/d，温凉水冲服。葡萄糖酸钙锌口服液3 ml/次，3次/d，口服。连续治疗3 d。

1.2.2 胃肠激素检查方法 分别于治疗前、治疗3 d后抽取患儿外周静脉血3 ml，在4 ℃下以转速3000 r/min、离心半径8 cm、离心时间10 min分离血清，采用酶联免疫吸附法检测血清胃泌素（gastrin,GAS）、胃动素（motilin,MOT）、血管活性肠肽（vascularly active intestinal peptide,VIP）水平。检测仪器：美国Beckman免疫分析仪，试剂盒生产厂家：上海酶联生物科技有限公司。上述实验操作步骤严格遵照试剂盒说明书。

1.2.3 肠道菌群检查方法 分别于治疗前、治疗3 d后取患儿新鲜粪便1 g置于无菌采集管，采用实时荧光定量PCR法检测肠道菌群。采用CA公司QIAamp DNA Stool Mini Kit试剂盒提取粪便中菌群总DNA。设计肠杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌特异性引物，并在BLAST基因库对比引物特异性，引物设计由上海基康公司合成。采用质粒标准品构建标准曲线。分别进行上述3种细菌的实时荧光定量PCR，结果以细菌拷贝数的常用对数/g湿粪表示。

1.3 观察指标 ①临床治疗总有效率；②症状改善时间（退热、止泻、止吐、大便性状正常）、住院时间；③用药期间不良反应发生情况。

1.4 疗效判断[6]①显效：治疗3 d后，体温恢复正常，大便性状、量和次数恢复正常，脱水、呕吐、发热等症状、体征完全消失。②有效：治疗3 d后，体温逐渐下降至正常，大便次数和性状显著改善，脱水、呕吐、发热等症状、体征未完全消失。③无效：未达到上述标准，症状未改善或加重。总有效率=（显效+有效）/患者例数×100%。

1.5 统计学处理 使用SPSS 19.0软件处理数据，计量资料呈正态分布，用±s描表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用自身配对t检验。计数资料用例（%）表示，率的比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 2组一般资料比较 2组性别、年龄、发病至入院时间、入院时体温及脱水程度等一般资料比较，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。见表1。

表1 2组一般资料比较Table 1 Comparison of general data between 2 groups

2.2 2组疗效比较 联合组总有效率为93.33%，明显高于常规组的80.00%，差异具有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 2组疗效比较[例（%）]Table 2 Comparison of curative effect between 2 groups[cases(%)]

2.3 2 组症状改善时间、住院时间比较 联合组退热时间为（1.69±0.42）d、止泻时间为（2.28±0.45）d、止吐时间为（1.92±0.44）d、大便性状正常时间为（2.30±0.45）d、住院时间为（4.82±1.37）d，均短于常规组，差异均具有统计学意义（P均＜0.05）。见表3。

表3 2组症状改善时间、住院时间比较（±s，d）Table 3 Comparison of symptom improvement time and hospitalization time between 2 groups(±s,d)

表3 2组症状改善时间、住院时间比较（±s，d）Table 3 Comparison of symptom improvement time and hospitalization time between 2 groups(±s,d)

组别 n退热时间 止泻时间 止吐时间 大便性状正常时间 住院时间常规组 60 2.28±0.47 3.05±0.67 2.47±0.49 3.12±0.74 6.21±1.54联合组 60 1.69±0.42 2.28±0.45 1.92±0.44 2.30±0.45 4.82±1.37 t值 7.251 7.390 6.469 7.334 5.224 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.4 2 组肠道菌群含量比较 治疗前，2组粪便标本中肠道菌群含量组间比较，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。治疗后，2组粪便标本中双歧杆菌、乳酸杆菌含量较治疗前上升，肠杆菌含量较治疗前下降，且联合组粪便标本中肠道菌群含量改善程度均高于常规组（P均＜0.05）。见表4。

表4 2组肠道菌群含量比较（±s，1og 拷贝数/g湿粪）Table 4 Comparison of intestinal flora contents between 2 groups(±s,log copies/ g wet manure)

表4 2组肠道菌群含量比较（±s，1og 拷贝数/g湿粪）Table 4 Comparison of intestinal flora contents between 2 groups(±s,log copies/ g wet manure)

注：常规组治疗前后比较，自身配对t检验：肠杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌依次为t=9.006，P=0.000；t=4.214，P=0.000；t=4.022，P=0.000。联合组治疗前后比较，自身配对t检验：肠杆菌、双歧杆菌、乳酸杆菌依次为t=13.230，P=0.000；t=11.523，P=0.000；t=8.573，P=0.000

组别 n 肠杆菌 双歧杆菌 乳酸杆菌治疗前 治疗后 差值d 治疗前 治疗后 差值d 治疗前 治疗后 差值d常规组 60 7.71±0.36 7.15±0.32 0.56±0.04 7.48±0.45 7.85±0.51 0.37±0.06 7.15±0.56 7.58±0.61 0.43±0.05联合组 60 7.64±0.58 6.54±0.28 1.10±0.30 7.52±0.48 8.64±0.58 1.12±0.10 7.11±0.52 8.04±0.66 0.93±0.14 t值 0.794 13.820 0.471 49.816 0.405 26.053 P值 0.629 0.000 0.639 0.000 0.686 0.000

2.5 2组胃肠激素水平比较 治疗前，2组胃肠激素水平组间比较，差异均无统计学意义（P均＞0.05）。治疗后，2组GAS、MOT、VIP水平均较治疗前下降，且联合组GAS、MOT、VIP水平下降幅度均高于常规组（P均＜0.05）。见表5。

表5 2组胃肠激素水平比较（±s，μg/L）Table 5 Comparison of gastrointestinal hormone levels between 2 groups(±s,μg/L)

表5 2组胃肠激素水平比较（±s，μg/L）Table 5 Comparison of gastrointestinal hormone levels between 2 groups(±s,μg/L)

注：常规组治疗前后比较，自身配对t检验：GAS、MOT、VIP依次为t=11.309，P=0.000；t=18.965，P=0.000；t=13.363，P=0.000。联合组治疗前后比较，自身配对t检验：GAS、MOT、VIP依次为t=14.028，P=0.000；t=19.419，P=0.000；t=17.280，P=0.000

组别 n GAS MOT VIP治疗前 治疗后 差值d 治疗前 治疗后 差值d 治疗前 治疗后 差值d常规组 60 1258.54±254.63 845.61±123.14 412.93±131.49 561.47±79.58 323.02±56.14 238.45±23.44 614.56±214.02 212.35±92.47 402.21±121.55联合组 60 1238.56±261.11 728.59±105.44 509.97±155.67 549.96±101.44 271.56±45.19 278.40±56.25 628.46±198.88 152.37±77.42 476.09±121.46 t值 0.424 3.689 0.692 5.078 0.369 3.330 P值 0.672 0.000 0.491 0.000 0.713 0.001

2.6 2组用药期间不良反应情况 2组患儿均未发生不良反应及变态反应。

3 讨 论

轮状病毒是引起婴幼儿秋、冬季腹泻常见的病原体，由于3岁以下的婴幼儿肠道功能尚未发育成熟，因此是轮状病毒性腹泻的高发群体[7]。目前，轮状病毒性腹泻的发病机制尚未完全阐明，尚无特效治疗方法[8]。因此寻找安全、有效的治疗方案对改善轮状病毒性腹泻患儿预后有益[9]。

轮状病毒性腹泻具有一定的自限性，临床治疗以抗病毒、补液等综合治疗为主。布拉酵母菌是临床常用的肠道微生态制剂，可干扰肠道致病菌定植、生长，促进肠道分泌蛋白酶水解有害菌产生的毒素[10]。有研究发现，布拉酵母菌治疗轮状病毒腹泻具有良好的效果，可减轻腹泻症状，减少患儿住院时间，同时抑制患儿免疫炎症反应，降低血清TNF-α、IL-6等炎症因子的表达，但仍有相当一部分患儿的疗效欠佳，腹泻症状不能得到及时、有效的缓解[11]。

近年来关于轮状病毒腹泻的研究发现，锌元素缺乏与腹泻病情加重密切相关[12]。锌是人体必需的微量元素，参与多种代谢酶合成，并与酶活性直接相关[13]。锌缺乏可直接影响多种免疫细胞的分化，造成免疫应答紊乱，进一步加重小肠黏膜上皮细胞结构和功能损伤[14]。有学者提出，在轮状病毒性腹泻的治疗中应注重补充锌元素[15]。葡萄糖酸钙锌是临床上常用的锌制剂，有研究证实其可缩短轮状病毒性腹泻病程，促进不适症状消失[16]。本研究中依据说明书和临床用药经验，在常规治疗的基础上采用合适剂量的葡萄糖酸钙锌联合布拉酵母菌治疗，发现其总有效率高于常规治疗组，退热时间、止泻时间、止吐时间、大便性状正常时间、住院时间均短于常规治疗组，以上结果与已有的临床研究结论一致[17]。可能是由于葡萄糖酸钙锌中所含的锌离子能促进肠黏膜细胞再生、修复，改善肠道对水、电解质的重吸收而缓解腹泻症状。葡萄糖酸钙锌中所含的钙离子还能补充腹泻导致的钙流失。

目前临床常用的肠道益生菌包括细菌、真菌两大类，其中真菌类微生态制剂并非胃肠道原籍菌，口服后不会被胃酸、胆酸、抗生素等破坏[18]。布拉酵母菌是一种真菌类微生态制剂，可激活网状内皮系统、补体系统，促进免疫球蛋白分泌而抑制肠道致病微生物生存[19]。本研究中2组患儿治疗后粪便标本中双歧杆菌、乳酸杆菌含量均较治疗前上升，肠杆菌含量较治疗前下降，且联合组粪便标本中肠道菌群含量改善程度均高于常规组。以上结果提示，葡萄糖酸钙锌口服液联合布拉酵母菌散剂可更好地促进轮状病毒感染患儿肠道菌群平衡重建，双歧杆菌、乳酸杆菌含量升高后可迅速在肠黏膜表面形成保护性屏障，其肠道代谢产物具有抗菌活性，可抑制致病菌肠杆菌的繁殖。锌作为多种酶的辅酶，可升高小肠上皮细胞刷状缘的酶水平和活性，增加肠道抗感染能力，进一步促进肠道菌群平衡重建。

胃肠道不仅是消化器官，也是复杂的内分泌器官，通过释放胃肠激素而调控胃肠功能。GAS是由小肠上部黏膜、胃窦合成的激素，过高的GAS可引起肠道过度运动而导致腹泻[20]。MOT 可引起消化间期运动综合波，增加肠黏膜水电解质分泌而引起腹泻[21]。VIP 是一种胃肠神经肽，可增强肠道神经应激反应而引起腹泻[22]。轮状病毒感染后肠黏膜细胞被破坏，产生肠毒素，破坏肠功能，胃肠道激素分泌异常，引起肠蠕动功能异常、肠黏膜水电解质分泌紊乱而发生腹泻。本研究中2组患儿治疗后血清GAS、MOT、VIP水平均较治疗前下降，且联合组GAS、MOT、VIP水平下降幅度均高于常规组，以上结果提示，葡萄糖酸钙锌口服液联合布拉酵母菌散剂可更好地改善轮状病毒感染患儿胃肠激素水平。可能是由于锌元素能促进肠道黏膜的修复、再生，促进肠道上皮修复，纠正了胃肠激素分泌紊乱状态。本研究中2组患儿均未发生不良反应及变态反应，说明葡萄糖酸钙锌口服液联合布拉酵母菌散剂治疗轮状病毒感染的安全性良好。

本研究结果证实了葡萄糖酸钙锌口服液联合布拉酵母菌散剂在治疗轮状病毒感染中的优势，但这两种药是何种在发挥作用以及发生了多少作用并不能确定，因此在后续治疗中应进行细化分析，增加葡萄糖酸钙锌口服液组、布拉酵母菌散剂组以进一步探讨葡萄糖酸钙锌口服液、布拉酵母菌散剂在治疗轮状病毒感染中的作用。

综上所述，葡萄糖酸钙锌口服液联合布拉酵母菌散剂可促进轮状病毒感染患儿临床症状的消失，改善胃肠激素水平，平衡肠道菌群，提高疗效。