肺小细胞恶性肿瘤活检诊断中免疫组化的应用研究

奚剑敏 文欢 黄劲

目前，肺癌疾病发病率已经呈现出逐渐增高的态势，该疾病对患者身心健康造成了极大损伤，同时更影响了患者日常生活，极大降低了患者生活质量[1]。临床中肺癌属于一种恶性肿瘤疾病，该疾病在细胞学、免疫表型以及组织学和分子遗传学水平等多方面均具有一定的异质性，可将其分为两种，其一是小细胞肺癌，其二则是非小细胞肺癌[2]。根据相关数据调查显示[3]，临床中肺癌患者中只有25%左右的患者属于小细胞肺癌。为了能够充分明确肺小细胞恶性肿瘤活检诊断中免疫组化的作用，提升肺小细胞恶性肿瘤疾病临床诊断质量，促进患者疾病治疗和预后效果，基于此，文章对利用免疫组化对肺小细胞恶性肿瘤活检诊断的实际价值进行详细分析，继而提升临床肺小细胞恶性肿瘤活检诊断中免疫组化的应用，结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

对我院2018年1月—2019年3月收治的40例行肺穿刺与支气管镜活检的肺癌患者进行研究，分析免疫组化对肺小细胞恶性肿瘤活检诊断的实际价值。本次研究中患者男29例，女11例，年龄42～78岁，平均年龄为（63.87±3.62）岁。所有患者在进过病理学分析后均确诊为肺癌。所有患者及家属已明确本次研究目的，自愿加入本次研究，我院伦理委员会同意该次试验正常推进。

1.2 方法

病理组织学检查：相关工作人员利用浓度为10%的中性福尔马林将其标本固定，随后对标本进行脱水、切片以及使用石蜡包埋和染色，完成后使用显微镜进行查看，严格按照形体学特征对标本进行诊断。

免疫组化检测：采取免疫组化SP法进行样本检查，其中CgA、CD56、P40、TTF1、CK5/6、Syn、P63均为即用型抗体，来源于安必平技术有限公司提供的试剂盒进行染色，选取PBs取代一抗为阴性对照，选用已知阳性片为阳性对照。对切片行EDTA抗原热修复后，滴加需检测的标记CgA、CD56、P40、TTF1、CK5/6、Syn、P63一抗，经孵育、洗涤后，再滴加辣根过氧化物酶为二抗，孵育、DAB显色后，复染细胞核最后脱水、封片及镜检。

1.3 评价标准

最终检测染色为棕褐色、棕黄色，则认为阳性；具体着色部位根据指标不同，定位也会有差异，在明确各指标阳性后，根据阳性细胞占比，将结果进行如下划分：（1）阴性：未发现阳性细胞；（2）+：发现阳性细胞，阳性细胞低于10%；（3）++：阳性细胞保持在11%～50%；（4）+++：阳性细胞保持在51%～75%；（5）++++：阳性细胞高于75%[4]。

2 结果

2.1 病理组织学结果

本次研究中的40例患者经病理学检查后均确诊为肺癌，其中有1例患者显示为非霍奇金淋巴瘤、6例患者显示为小细胞肺癌、33例患者显示为低分化鳞癌（如表1）。显微镜下小细胞肺癌特点：癌细胞呈现出小梁状、巢状现象，并且片状分布。癌细胞的细胞核显示为圆形、卵圆形和梭形，核染色质呈现出微细颗粒现象，并且核染色质染色较深，严重缺少核仁，并且小细胞肺癌的细胞分界较为模糊，细胞质相对稀少（如图1所示）。显微镜下低分化鳞癌特点：癌细胞呈现出巢状现象，并且片状分布。癌细胞的细胞核显示为卵圆形，染色质和泡状核呈现出过粗现象，核仁较为明显但是胞质少（如图2所示）；显微镜下非霍奇金淋巴瘤特点：肿瘤细胞整体排列分散，细胞核呈现出圆形和卵圆形，且细胞染色质过粗（如图3所示）。

图3 低分化鳞癌病理组织学特点（HE染色×200倍）

表1 病理组织学检查结果

图1 小细胞肺癌病理组织学特点（HE染色×200倍）

图2 非霍奇金淋巴瘤病理组织学特点（HE染色×200倍）

2.2 免疫组化结果

经免疫组化后，小细胞肺癌CD56表达率为95%（38/40），CgA表 达 率 70%（28/40）、TTF-1表 达 率 100%（40/40）、Syn表达率85%（34/40）。1例非霍奇金淋巴瘤患者的Syn灶状区和LCA均显示为阳性，TTF-1、CgA、p63均显示为阴性。5例低分化鳞癌患者中，CK5/6、p63均显示为阳性，其中有1例低分化鳞癌患者的Syn灶状区显示为阳性，TTF-1、CgA显示为阴性。

3 讨论

近年来，随着临床医学技术的不断成熟化，是分子生物学以及肿瘤学等相关研究已经获取了良好发展和进步，更能够根据不同的组织学类型以及肿瘤分子改变为进行差异性病理类型分析和治疗。根据临床实际分析发现[5]，在针对小细胞肺癌疾病诊断过程中与其他类型肺癌诊断相比更加复杂，容易将其诊断为非小细胞肺癌。因此临床中提升对小细胞肺癌疾病的病理诊断准确率是十分重要。目前，临床中诊断小细胞肺癌疾病的常用诊断方法就是活检检测，但是在实际活检检测过程中，由于样本量较少容易出现人工挤压，进而导致样本出现细胞变性，这在一定程度上极大降低了检测人员对于样本结构组织分辨的清晰程度，容易出现误诊的现象[6-8]。

通过免疫组化方式对肺小细胞恶性肿瘤进行诊断与其他诊断方法相比优势更明显，该种检测方式主要是应用不同的酶系统对差异化显色底物进行催化，继而将其显示为对应颜色，以此能够对同一张组织切片当中的不同抗原进行充分表达，不仅如此，与其他诊断方法相比，免疫组化方式具有更强的实用性，并且该种检测方法的实际操作更加便捷，更有着较高的特异性和灵敏性[9]。

但是在应用免疫组化方式对肺小细胞恶性肿瘤进行诊断过程中需要注意一下两点：第一，检测人员需要准确筛选不同酶，从而防止出现交叉感染；第二，检测人员需要尽量选择颜色明显的色组作为底物。同时，在实际操作过程中检测人员需对具体检测环节严格把控，最大程度避免不良因素出现，辅助医师、患者做出正确的治疗判断[10-12]。

通过本文研究发现，40例患者经病理学检查后均确诊为肺癌，其中有1例患者显示为非霍奇金淋巴瘤、33例患者显示为低分化鳞癌、6例患者显示为小细胞肺癌。经免疫组化后，小细胞肺癌表达率为100%，CgA表达率70%、CD56表达率为95%、TTF-1表达率72.5%、Syn表达率85%。

综上所述，利用免疫组化对肺小细胞恶性肿瘤活检诊断的实际价值较高，将各项指标核属于临床中诊断患者肺小细胞恶性肿瘤的重要性可靠指标，同时将指标联合使用对于提升疾病诊断准确率有着极大作用。