孕妇外周血胎儿游离DNA无创产前检查在诊断胎儿染色体异常中的应用价值

花 睿

（中国贵航集团三〇二医院，贵州 安顺 561000）

导致新生儿发生出生缺陷最主要的原因是其染色体数目为非整倍体。我国是出生缺陷高发国家。加强对孕妇进行产前胎儿染色体异常筛查对提高母婴安全及响应国家优生优育政策具有积极的意义[1]。目前，我国对孕妇进行产前检查的主流应用技术为超声技术。使用超声技术对孕妇进行产前检查具有经济性高、操作简便及显像质量高等优势，但对新生儿出生缺陷的检出率不高，存在一定的误诊率和漏诊率。相关的研究结果显示，染色体异常患儿占所有出生缺陷患儿的80%以上[2]。临床上比较常见的胎儿染色体异常类型包括21-三体异常、18-三体异常及13-三体异常等。对孕妇进行羊水穿刺胎儿染色体核型检查可有效地诊断胎儿染色体异常，但可导致孕妇发生流产、羊水渗漏及宫内感染等并发症。因此羊水穿刺胎儿染色体核型检查未能在临床上得到推广。孕妇外周血胎儿游离DNA无创产前筛查（Non-Invasive Prenatal Testing，NIPT）的出现为产前检查提供了新的措施。本文主要是探讨孕妇外周血胎儿游离DNA NIPT在诊断胎儿染色体异常中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本文的研究对象为2019年4月至2020年10月期间在贵航集团三〇二医院进行产前检查的980例孕妇。研究对象的纳入标准为：1）签署了参与本次研究的知情同意书。2）经超声检查确认为单胎妊娠产妇。3）能配合完成各项检查。4）具有良好的认知功能和沟通能力。5）孕妇及其配偶的染色体正常。5）近30 d内未接受过免疫治疗。研究对象的排除标准为：1）患有严重的妊娠合并症。2）未能完成随访。3）近1年内输注过异体血制品。4）临床资料不全。本次研究经该医院医学伦理委员会批准。这些孕妇的年龄为35～48岁，平均年龄为（38.16±2.15）岁；其孕周为11～22周，平均孕周为（17.48±3.15）周。

1.2 方法

这些孕妇均使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断胎儿染色体异常，方法是：采集这些孕妇10 mL的外周静脉血。将获得的血液标本放在streckcell-FreeDNA BCT管中保存。在72 h内对血液样本进行离心处理。将2 mL的上清血浆放入EP管中，再放入内部温度为-20℃的冰箱中备用。从血浆中游离、提取 DNA，并进行测序。使用晶芯无创产前数据分析管理软件获取21、18、13号染色体及其他染色体的Z值。结合每个样品的Z值判定孕妇发生胎儿染色体异常的情况。对诊断结果为阳性的孕妇进行羊水穿刺胎儿染色体核型检查，方法是：在B超引导下对孕妇进行经腹羊水穿刺。使用细胞培养G显带法或高通量测序法鉴定染色体的核型。将这些孕妇进行羊水穿刺胎儿染色体核型检查的结果作为确诊胎儿核型异常的依据。

1.3 观察指标

观察为这些孕妇使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断胎儿染色体异常的结果，计算其使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断胎儿染色体异常的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值。对检查结果为阴性的孕妇进行随访，观察胎儿是否发生染色体异常的情况。观察不同年龄段孕妇发生胎儿染色体异常的情况。观察这些孕妇发生胎儿染色体异常的核型。

1.4 统计学处理

对本次研究中的数据均采用SPSS 16.0统计软件进行处理，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两个独立样本采用t检验，多个样本采用F检验，采用t检验；计数资料用百分比（%）表示，采用χ²检验。以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 这些孕妇使用外周血胎儿游离DNANIPT诊断胎儿染色体异常的结果

在这些孕妇中，有65例（6.63%）孕妇使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断胎儿染色体异常的结果为阳性。其中21-三体异常、18-三体异常、13-三体异常、性染色体异常及其他染色体异常的孕妇各有21例（2.14%）、10例（1.02%）、5例（0.51%）、4例（0.41%）及25例（2.55%）。对其余孕妇进行随访的结果证实，为980例孕妇使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断胎儿染色体异常均未发生假阴性的情况。为这些孕妇使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断21-三体及18-三体异常的灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值均较高。为这些孕妇使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断13-三体异常的灵敏度、特异度及阴性预测值均较高，但阳性预测值较低。详见表1。

表1 这些孕妇使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断胎儿染色体异常的结果

2.2 不同年龄段孕妇发生胎儿染色体异常的情况

在这些孕妇中，年龄为26～30岁的孕妇发生胎儿染色体异常的几率最低，为4.01%；年龄＞45岁的孕妇发生胎儿染色体异常的几率最高，为30.77%。详见表2。

表2 不同年龄段孕妇发生胎儿染色体异常的情况[例（%）]

2.3 这些孕妇发生胎儿染色体异常的核型

这些孕妇发生胎儿染色体异常的核型为“47，XN，+21”、“47，XXX”及“47，XN，+ 18”。详见表3。

表3 这些孕妇发生胎儿染色体异常的核型

3 讨论

染色体异常是导致新生儿发生出生缺陷的重要因素。染色体是基因的载体。若胎儿的染色体发生异常，则说明胎儿存在发育异常的情况。目前临床上对染色体异常发生的机制尚不明确[3]。据统计，染色体异常新生儿约占所有新生儿的0.6%。染色体为非整倍体是临床上最常见的染色体异常类型。在孕妇妊娠的早期对其进行胎儿DNA筛查可及时地发现胎儿染色体异常的情况，避免为其家庭造成精神和经济负担，达到优生优育的目的[4]。

NIPT技术是一项新兴的产前筛查技术。利用NIPT技术对孕妇外周血中游离的胎儿DNA进行深度测序可获得胎儿染色体的信息，比较准确地判断胎儿染色体异常的情况。为孕妇使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断胎儿染色体异常不会对其造成创伤，操作简单，检查时间短，费用较低[5]。本次研究的结果显示，在这980例孕妇中，胎儿染色体异常发生率最高的是年龄＞45岁的孕妇；其次是年龄为41～45岁的孕妇。由此推测，孕妇年龄超过40岁可能是导致胎儿染色体异常的危险因素[6]。

本次研究的结果证实，使用外周血胎儿游离DNA NIPT诊断胎儿染色体异常的灵敏度、特异度及阴性预测值均较高，值得在临床上推广应用。