一测多评法在中药质量控制中的应用

张 敏 王 芳 刘惠娟 石 岩 张文斌

1.甘肃医学院，甘肃 平凉 744000；2 甘肃医学院附属医院，甘肃 平凉 744000

中药作为我国流传千年的传统药物，其在中医理论指导之下，用于预防、治疗、诊断疾病或调节人体机能，是在我国劳动人民长期与疾病作斗争的过程中发展起来的。中药质量评价是中药现代化的基础，与单一指标相比，多指标的质量评价模式更符合中药多成分、多功效的特点[1]。但中药对照品由于其本身化学性质、分离难度而导致的高价等因素，始终处于一个无法大批量、稳定、廉价供应的状态。使得多指标成分分析受到一定限制。2006年，王智民等[2]首次提出一测多评法(Quantitative analysis of multi-components by single-marker QAMS)，论证其基本原理，同时通过对木通药材的检测，实践证实了一测多评法在中药检测领域有优良表现。随后，以《中国药典》2010 年版为代表的质量标准已经确立了“从单指标向多指标、从指标性成分向药效成分控制”的发展方向[3]。2015版《中国药典》新增8个药材使用一测多评法进行质量分析[4]。随着发展，一测多评法在中药检测上的研究应用仍旧不断被发掘出新的应用，说明该种方法是中药现代化进步中一个不可或缺的研究方向。

1 一测多评法的基本原理

一测多评法的基本原理为，在一定的线性范围内，其组分量(质量或者浓度)，与检测器的响应值成正比。在多指标质量评价中，设置一种稳定且廉价易得的对照品作为内标参照物，同时建立其与其他待测组之间的相对校正因子(f)，通过即可计算其他组分含有量[2]，具体如图1所示。

图1 一测多评法基本原理示意图

2 一测多评法在中药质量控制中的应用

2.1 一测多评法在单一药材及饮片中的应用 自从一测多评法提出以来，在多种中药材及其饮片的质量控制标准研究中都得到了充分的应用。表1列出了近3年一测多评法在中药材及其饮片中的的应用情况，由表1可以看出，其应用多见于同类成分的测定。同类成分，紫外吸收相近，有利于检测波长的选择。测定结果准确，体现一测多评法的优势[5]。

表1 一测多评法在中药材及其饮片中的应用

表1 一测多评法在中药材及其饮片中的应用

2.2 一测多评在成方制剂中的应用 中药制剂，相对于单味药材和饮片来说，成分更为复杂。在2015版《中国药典》中已经收录了银杏叶滴丸、银杏叶胶囊、以及咳特灵胶囊的一测多评法应用方法。近年来，QAMS在中药制剂的质量分析的应用迅速增加。表2列出来近3年的应用实例。

表2 一测多评法在中药制剂中的应用

3 一测多评法在中药质量控制中的主要问题

3.1 相对校正因子的测定 相对校正因子的准确与否，直接影响含量测定结果。目前，常见的测定方法为多点校正和斜率法。多点矫正法适用于浓度值在一定范围内的成分分析[5]，其应用更加广泛[32]。斜率法是基于标准曲线进行，结果相对比较准确。

在使用一测多评法进行中药质量控制中，相对校正因子受测试条件的影响较大。不同实验室，不同仪器和色谱柱、不同的PH值、柱温和检测波长的变动等均会引起值的改变。因此，在进行一测多评对中药进行检测时，需要充分考虑实际实验因素对相对校正因子的影响，对导致其产生较大波动的因素进行限定，以保证最终实验结果具有可重现性。

3.2 色谱峰的定位 在使用一测多评法时，供试品的测试中只有内标参照物使用对照品，其余成分不设置对照品。因此，如何对待测成分的目标峰进行定位是目前一测多评法存在的关键问题之一。常见的方法有时间差法和相对保留时间法。时间差法，据报道在不同的仪器和色谱柱上，会有较大的波动[33]。而相对保留时间法，应用比较广泛。其原理是先利用各自对照品的保留时间，计算出相对保留时间(为相对保留时间，为内参物对照品峰保留时间，为待测组分对照品峰保留时间)，后在供试品中根据确定待测组分的位置。如图2所示，峰5(内标参照物)的保留时间为24.33 min，峰1的R为0.81，即供试品中相对保留时间为0.81的色谱峰就定位为成分1。其他成分依法确定。本方法适用于定位与参照物性质类似的成分。如果结构相差较大，误差较大。同时，还可结合待测峰形状、紫外光谱信息以及液质联用技术给出的质谱信息等进行相关辅助确认。如仍旧不能定位，可以采用待测成分中药对照提取物定位。

图2 典型色谱图

4 小结与展望

对于目前的中药现代化研究来说，所面临的问题之一即是化学对照品与质量检测需求之间的矛盾，而一测多评法的出现，能够显著降低检测成本，取得了方便、廉价、稳定的效果。因此，虽然一测多评法在实际应用当中尚存在不少问题，依然是中药现代化一个重要的前进方向，其对于中药药效物质基础和作用机制的阐明、中药新药研究和开发具有重要意义。