侯孟春,廖 辉,王仕英
(阿坝师范学院资源与环境学院,四川阿坝 623000)
蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.)菊科,蒲公英属多年生草本植物。我国四川、贵州、云南等地区均有分布。蒲公英富含维C、铜、蒲公英醇等多种健康营养成分,有利尿、缓泻、退黄疸、利胆等功效,能治急性乳腺炎、淋巴腺炎、瘰疬、疔毒疮肿等疾病。蒲公英还具有一定的食用价值,腌泡的蒲公英花蕾具有提神醒脑的功效;根可以用来替代咖啡;花可以做酒等。目前,市场对蒲公英的需求量很大,而蒲公英的人工种植面临着冻害等问题。植物冻害(Plant frost)是指气温降至冰点以下,植物因细胞间隙结冰引起的伤害。植物冻害对组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和可溶性蛋白质含量有明显的影响。
SOD 是生物体内存在的一种抗氧化金属酶,能够催化超氧阴离子自由基歧化生成氧和过氧化氢,在机体氧化与抗氧化平衡中起到至关重要的作用[1],与很多疾病的发生、发展密不可分。活性氧或其他过氧化物自由基对细胞膜系统的伤害很大,通过测定冻害条件下蒲公英组织中SOD 的活性,从而判断此条件下植株的抗性。根据这一试验结果,分析总结出提高蒲公英组织中SOD 含量的方法,从而解决蒲公英人工种植的冻害问题,提高种植产量,为当地种植户增加收益。
取若干正常生长的蒲公英植株,分为甲乙两组。甲组提供正常的生长条件(室温),乙组提供冻害条件(零下2 ℃),其余条件均相同,培育1 周时间。试验时选择长势良好、健康的植株组织进行测定。
样品中SOD 活性的测定,参照卢少云等人[1]用NBT 还原法进行。
样品中可溶性蛋白质含量的测定,参照赵英永等人[2]考马斯亮蓝G-250 染色法进行。
每组试验重复3 次,取平均值计算。
正常条件下的样品溶液吸光度见表1。
表1 正常条件下的样品溶液吸光度
将测定结果代入公式,即:
冻害条件下的样品溶液吸光度见表2。
表2 冻害条件下的样品溶液吸光度
将测定结果代入公式,即:
甲乙两组SOD 总活性测定结果对比见图1。
图1 甲乙两组SOD 总活性测定结果对比
根据试验数据分析,正常条件下的蒲公英植株样品中SOD 总活性明显低于冻害条件下的蒲公英植株样品中SOD 总活性。冻害条件下的蒲公英植株样品中SOD 总活性比正常条件下的蒲公英植株样品中SOD 总活性高6.6%。一定程度的冻害胁迫可以提升蒲公英植株组织中SOD 的活性,增强植株的抗性。
根据试验结果,利用一定程度的冻害胁迫来提高蒲公英植株样品中SOD 总活性,然后选择抗性好的植株进一步繁殖,再进一步使用冻害胁迫筛选出抗性最强的植株。利用筛选出的优势种进行大量繁殖,提升蒲公英的品质。在一定程度上解决蒲公英人工种植的冻害问题,努力提高蒲公英的种植产量,增加当地种植户的收益,缓解冬季市场上蒲公英紧缺的问题。
试验的冻害胁迫程度固定,接下来试验小组将继续划分更详细的冻害胁迫阶梯,进行更加精细的试验分析,进一步探究冻害胁迫对蒲公英组织中SOD 活性的影响。